| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-23页 |
| 1.1 甘蓝型油菜含油量育种现状 | 第13-14页 |
| 1.2 植物的油脂代谢 | 第14-17页 |
| 1.2.1 TAG代谢途径 | 第14-16页 |
| 1.2.2 油体的细胞学基础 | 第16-17页 |
| 1.3 环境因素对含油量的影响 | 第17-18页 |
| 1.4 含油量遗传控制机理研究进展 | 第18-19页 |
| 1.5 含油量性状QTL定位的研究进展 | 第19-21页 |
| 1.6 含油量组学研究进展 | 第21-22页 |
| 1.7 本研究的目的与意义 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-36页 |
| 2.1 研究材料 | 第23-24页 |
| 2.1.1 双单倍体群体ZD-DH | 第23页 |
| 2.1.2 精细定位群体 | 第23页 |
| 2.1.3 BC_1F_2:3后代测验群体 | 第23页 |
| 2.1.4 转基因材料 | 第23-24页 |
| 2.2 材料的种植与性状考察 | 第24-25页 |
| 2.2.1 材料的种植 | 第24页 |
| 2.2.2 性状考察 | 第24-25页 |
| 2.3 技术路线 | 第25-26页 |
| 2.3.1 精细定位技术路线 | 第25页 |
| 2.3.2 HB2基因转基因验证技术路线 | 第25-26页 |
| 2.4 基因型鉴定 | 第26-30页 |
| 2.4.1 DNA提取 | 第26-27页 |
| 2.4.2 DNA浓度检测 | 第27页 |
| 2.4.3 PCR反应 | 第27-28页 |
| 2.4.4 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第28-29页 |
| 2.4.5 基因型记录和电子版保存 | 第29-30页 |
| 2.5 定位群体的构建 | 第30页 |
| 2.5.1 近等基因系的进一步创建 | 第30页 |
| 2.5.2 精细定位群体的构建 | 第30页 |
| 2.6 遗传图谱的构建和QTL的定位 | 第30-31页 |
| 2.6.1 局部遗传连锁图的构建 | 第30页 |
| 2.6.2 QTL的定位和效应分析 | 第30-31页 |
| 2.6.3 基于亲本重测序的InDel标记的开发 | 第31页 |
| 2.7 甘蓝型油菜下胚轴遗传转化 | 第31-32页 |
| 2.8 转基因阳性鉴定 | 第32-34页 |
| 2.9 RNA提取及CDNA第一链的合成 | 第34-35页 |
| 2.9.1 油菜叶片RNA提取 | 第34页 |
| 2.9.2 油菜种子RNA提取 | 第34-35页 |
| 2.9.3 cDNA第一链的合成以及BnActin2检测 | 第35页 |
| 2.10 数据整理与分析 | 第35-36页 |
| 3 结果分析 | 第36-59页 |
| 3.1 利用ZD-DH群体进行含油量初定位 | 第36-43页 |
| 3.1.1 ZD-DH群体含油量表型变异 | 第36-38页 |
| 3.1.2 ZD-DH群体遗传连锁图谱的构建 | 第38-40页 |
| 3.1.3 含油量QTL定位 | 第40-41页 |
| 3.1.4 ZD-DH群体qOilA5位点标记加密 | 第41-42页 |
| 3.1.5 ZD-DH群体qOilA5位点QTL分析 | 第42-43页 |
| 3.2 精细定位群体亲本全基因组重测序及标记开发 | 第43-47页 |
| 3.2.1 测序亲本材料的选择 | 第43-44页 |
| 3.2.2 全基因组重测序 | 第44页 |
| 3.2.3 亲本间差异分析及标记开发 | 第44-47页 |
| 3.3 精细定位 | 第47-51页 |
| 3.3.1 近等基因系的构建 | 第47-48页 |
| 3.3.2 qOilA5位点BC_1F_2群体重组单株的表型变异 | 第48-49页 |
| 3.3.3 qOilA5位点BC_1F_2群体的基因型分析 | 第49-50页 |
| 3.3.4 qOilA5位点BC_1F_2群体局部遗传连锁图谱 | 第50页 |
| 3.3.5 qOilA5位点BC_1F_2群体QTL定位结果 | 第50-51页 |
| 3.4 qOilA5目标区段内候选基因的分析 | 第51-54页 |
| 3.4.1 共线性分析 | 第51-52页 |
| 3.4.2 qOilA5目标区段内候选基因的分析 | 第52-54页 |
| 3.5 HB2基因转基因验证 | 第54-59页 |
| 3.5.1 载体的构建 | 第54页 |
| 3.5.2 转基因植株阳性鉴定 | 第54-55页 |
| 3.5.3 p35S:Hb表达载体转基因后代分析 | 第55-57页 |
| 3.5.4 pNapin:Hb种子特异表达载体转基因后代分析 | 第57-59页 |
| 4 讨论 | 第59-63页 |
| 4.1 qOilA5位点可以明显提高油菜含油量 | 第59-61页 |
| 4.1.1 qOilA5位点精细定位群体的构建 | 第59页 |
| 4.1.2 含油量表型考察需要注意的问题 | 第59-60页 |
| 4.1.3 利用全基因组重测序技术加快精细定位进程和候选基因筛选 | 第60-61页 |
| 4.2 HB2基因可能不是qOilA5位点对应的基因 | 第61-62页 |
| 4.3 下一步工作设想 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-70页 |
| 附录1 油菜含油量QTL定位的研究进展 | 第70-71页 |
| 附录2 实验所需试剂的配制 | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
