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温州蜜柑诱导炎症反应研究及促炎分子标记的开发

摘要第8-11页
Abstract第11-14页
缩略词表第15-16页
第一章 前言第16-37页
    1 课题提出第16-18页
    2 食物不良反应的研究进展第18-24页
        2.1 食物不良反应的分类第18-19页
        2.2 食物过敏的种类及致病机理第19-20页
        2.3 水果过敏和流行病学调查第20-21页
        2.4 水果过敏与花粉等过敏的交叉反应第21页
        2.5 主要水果过敏原蛋白家族分类和特征第21-23页
            2.5.1 病程相关蛋白第10家族第22页
            2.5.2 脂质转移蛋白第22-23页
            2.5.3 类甜蛋白第23页
        2.6 不同品种致敏性差异第23-24页
    3 炎症第24-30页
        3.1 炎症概述第24-25页
        3.2 炎症发生途径第25-26页
        3.3 饮食结构与炎症第26-28页
            3.3.1 饮食中的脂肪酸和炎症第26-27页
            3.3.2 饮食中的糖类和炎症第27-28页
            3.3.3 饮食中的蛋白与炎症第28页
            3.3.4 生物活性成分和炎症第28页
        3.4 小鼠巨噬细胞炎症模型的建立第28-30页
    4 DNA分子标记第30-35页
        4.1 不同类型DNA分子标记技术第30-31页
        4.2 功能标记的开发第31-32页
            4.2.1 功能基因的确定第31-32页
            4.2.2 基于功能基因序列多态性FMs开发第32页
        4.3 功能标记在果实品质改良中的应用第32-33页
        4.4 真核生物基因组短片段的重复第33-35页
            4.4.1 微卫星第34页
            4.4.2 小卫星第34页
            4.4.3 双联体第34页
            4.4.4 以微卫星为基础开发的分子标记在柑橘中的应用第34-35页
            4.4.5 以小卫星为基础开发的分子标记在果树中的应用第35页
    5 本研究的目的、内容与意义第35-37页
第二章 温州蜜柑诱导人体免疫炎症反应:一项基于双盲的口腔食物激发试验研究第37-52页
    1 引言第37-38页
    2 材料与方法第38-41页
        2.1 实验材料及试剂第38页
        2.2 实验方法第38-41页
            2.2.1 研究对象第38页
            2.2.2 过量食用温州蜜柑激发实验第38-40页
            2.2.3 标准问卷设计第40页
            2.2.4 全血分析第40页
            2.2.5 血清总IgE和IgG的测量第40-41页
            2.2.6 数据分析第41页
    3 结果第41-49页
        3.1 过量食用温州蜜柑志愿者SIS症状观察第41-44页
        3.2 血液分析第44-47页
        3.3 血清总IgE含量测定第47-48页
        3.4 血清总IgG含量测定第48-49页
    4 讨论第49-52页
        4.1 标准问卷评分系统的应用第49页
        4.2 IgE和IgG在志愿者SIS症状中的作用第49-50页
        4.3 血细胞在志愿者SIS症状中的作用第50-52页
第三章 温州蜜柑诱导人体炎症反应血清蛋白标志物的筛选与验证第52-73页
    1 引言第52-53页
    2 材料与方法第53-62页
        2.1 实验试剂及仪器第53页
        2.2 样本采集第53-54页
        2.3 MARS亲和色谱柱去除血清高丰度蛋白第54-55页
            2.3.1 血清样本预处理第54页
            2.3.2 MARS亲和色谱柱去除血清高丰度蛋白第54-55页
        2.4 低丰度蛋白浓缩、除盐及溶剂置换第55页
        2.5 处理后的血清样品蛋白浓度测定第55-56页
        2.6 双向电泳第56-59页
            2.6.1 双向电泳过程中所配主要试剂:第56-57页
            2.6.2 血清蛋白质样品水化与上样第57页
            2.6.3 第一向等电聚焦第57-58页
            2.6.4 第二向SDS-PAGE电泳第58-59页
            2.6.5 染色第59页
        2.7 建立血清蛋白质差异表达图谱第59页
        2.8 差异蛋白点质谱分析与鉴定第59-60页
        2.9 鉴定结果数据分析第60页
        2.10 差异蛋白Complement component C9 precursor的验证第60-61页
        2.11 血清样本SEDLI-TOF-MS分析第61-62页
        2.12 SELDI-TOF-MS数据分析第62页
    3 实验结果第62-69页
        3.1 温州蜜柑诱导SIS症状观察第62-63页
        3.2 双向凝胶电泳第63-65页
            3.2.1 血清样品蛋白浓度测定第63页
            3.2.2 二维凝胶电泳结果第63-65页
        3.3 ELISA验证结果第65页
        3.4 SELDI-TOF-MS数据分析第65-68页
        3.5 主成分分析第68-69页
    4 讨论第69-73页
        4.1 SIS与过敏的异同第69页
        4.2 双向电泳结果讨论第69-71页
        4.3 SIS生物标志物的生物功能分析第71-73页
第四章 柑橘炎症相关分子标记的开发及应用第73-99页
    1 引言第73-74页
    2 材料与方法第74-83页
        2.1 柑橘材料与实验试剂第74-76页
        2.2 实验方法第76-83页
            2.2.1 柑橘组织RNA抽取第76-77页
            2.2.2 cDNA的合成第77页
            2.2.3 CitSH1表达分析第77-78页
            2.2.4 柑橘基因组DNA提取第78页
            2.2.5 启动子克隆第78-79页
            2.2.6 回收,转化和测序第79-80页
            2.2.7 分子标记的开发及应用第80页
            2.2.8 柑橘果肉总蛋白提取及蛋白定量第80-81页
            2.2.9 RAW264.7细胞培养第81-82页
            2.2.10 不同处理条件下COX-2表达检测第82页
            2.2.11 细胞总RNA提取第82-83页
    3 结果第83-93页
        3.1 CitSH1基因表达分析第83-86页
        3.2 启动子克隆及序列分析第86-88页
        3.3 分子标记开发及应用第88-90页
        3.4 分子标记的遗传第90-91页
        3.5 分子标记与促炎基因CitSH1表达量之间关系第91-92页
        3.6 分子标记与柑橘促炎性状之间的关系第92-93页
    4 讨论第93-99页
        4.1 CitSH1在植物中的功能第93-94页
        4.2 小卫星增加了CitSH1启动子的类型第94-96页
        4.3 柑橘蛋白成分的促炎作用与人体的口服耐受第96-97页
        4.4 柑橘功能性成分的抗炎作用第97-99页
参考文献第99-117页
附录Ⅰ 温州蜜柑诱导综合症问卷评分系统第117-118页
附录Ⅱ 攻读博士期间发表的论文第118-119页
致谢第119页

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