摘要 | 第8-11页 |
Abstract | 第11-14页 |
缩略词表 | 第15-16页 |
第一章 前言 | 第16-37页 |
1 课题提出 | 第16-18页 |
2 食物不良反应的研究进展 | 第18-24页 |
2.1 食物不良反应的分类 | 第18-19页 |
2.2 食物过敏的种类及致病机理 | 第19-20页 |
2.3 水果过敏和流行病学调查 | 第20-21页 |
2.4 水果过敏与花粉等过敏的交叉反应 | 第21页 |
2.5 主要水果过敏原蛋白家族分类和特征 | 第21-23页 |
2.5.1 病程相关蛋白第10家族 | 第22页 |
2.5.2 脂质转移蛋白 | 第22-23页 |
2.5.3 类甜蛋白 | 第23页 |
2.6 不同品种致敏性差异 | 第23-24页 |
3 炎症 | 第24-30页 |
3.1 炎症概述 | 第24-25页 |
3.2 炎症发生途径 | 第25-26页 |
3.3 饮食结构与炎症 | 第26-28页 |
3.3.1 饮食中的脂肪酸和炎症 | 第26-27页 |
3.3.2 饮食中的糖类和炎症 | 第27-28页 |
3.3.3 饮食中的蛋白与炎症 | 第28页 |
3.3.4 生物活性成分和炎症 | 第28页 |
3.4 小鼠巨噬细胞炎症模型的建立 | 第28-30页 |
4 DNA分子标记 | 第30-35页 |
4.1 不同类型DNA分子标记技术 | 第30-31页 |
4.2 功能标记的开发 | 第31-32页 |
4.2.1 功能基因的确定 | 第31-32页 |
4.2.2 基于功能基因序列多态性FMs开发 | 第32页 |
4.3 功能标记在果实品质改良中的应用 | 第32-33页 |
4.4 真核生物基因组短片段的重复 | 第33-35页 |
4.4.1 微卫星 | 第34页 |
4.4.2 小卫星 | 第34页 |
4.4.3 双联体 | 第34页 |
4.4.4 以微卫星为基础开发的分子标记在柑橘中的应用 | 第34-35页 |
4.4.5 以小卫星为基础开发的分子标记在果树中的应用 | 第35页 |
5 本研究的目的、内容与意义 | 第35-37页 |
第二章 温州蜜柑诱导人体免疫炎症反应:一项基于双盲的口腔食物激发试验研究 | 第37-52页 |
1 引言 | 第37-38页 |
2 材料与方法 | 第38-41页 |
2.1 实验材料及试剂 | 第38页 |
2.2 实验方法 | 第38-41页 |
2.2.1 研究对象 | 第38页 |
2.2.2 过量食用温州蜜柑激发实验 | 第38-40页 |
2.2.3 标准问卷设计 | 第40页 |
2.2.4 全血分析 | 第40页 |
2.2.5 血清总IgE和IgG的测量 | 第40-41页 |
2.2.6 数据分析 | 第41页 |
3 结果 | 第41-49页 |
3.1 过量食用温州蜜柑志愿者SIS症状观察 | 第41-44页 |
3.2 血液分析 | 第44-47页 |
3.3 血清总IgE含量测定 | 第47-48页 |
3.4 血清总IgG含量测定 | 第48-49页 |
4 讨论 | 第49-52页 |
4.1 标准问卷评分系统的应用 | 第49页 |
4.2 IgE和IgG在志愿者SIS症状中的作用 | 第49-50页 |
4.3 血细胞在志愿者SIS症状中的作用 | 第50-52页 |
第三章 温州蜜柑诱导人体炎症反应血清蛋白标志物的筛选与验证 | 第52-73页 |
1 引言 | 第52-53页 |
2 材料与方法 | 第53-62页 |
2.1 实验试剂及仪器 | 第53页 |
2.2 样本采集 | 第53-54页 |
2.3 MARS亲和色谱柱去除血清高丰度蛋白 | 第54-55页 |
2.3.1 血清样本预处理 | 第54页 |
2.3.2 MARS亲和色谱柱去除血清高丰度蛋白 | 第54-55页 |
2.4 低丰度蛋白浓缩、除盐及溶剂置换 | 第55页 |
2.5 处理后的血清样品蛋白浓度测定 | 第55-56页 |
2.6 双向电泳 | 第56-59页 |
2.6.1 双向电泳过程中所配主要试剂: | 第56-57页 |
2.6.2 血清蛋白质样品水化与上样 | 第57页 |
2.6.3 第一向等电聚焦 | 第57-58页 |
2.6.4 第二向SDS-PAGE电泳 | 第58-59页 |
2.6.5 染色 | 第59页 |
2.7 建立血清蛋白质差异表达图谱 | 第59页 |
2.8 差异蛋白点质谱分析与鉴定 | 第59-60页 |
2.9 鉴定结果数据分析 | 第60页 |
2.10 差异蛋白Complement component C9 precursor的验证 | 第60-61页 |
2.11 血清样本SEDLI-TOF-MS分析 | 第61-62页 |
2.12 SELDI-TOF-MS数据分析 | 第62页 |
3 实验结果 | 第62-69页 |
3.1 温州蜜柑诱导SIS症状观察 | 第62-63页 |
3.2 双向凝胶电泳 | 第63-65页 |
3.2.1 血清样品蛋白浓度测定 | 第63页 |
3.2.2 二维凝胶电泳结果 | 第63-65页 |
3.3 ELISA验证结果 | 第65页 |
3.4 SELDI-TOF-MS数据分析 | 第65-68页 |
3.5 主成分分析 | 第68-69页 |
4 讨论 | 第69-73页 |
4.1 SIS与过敏的异同 | 第69页 |
4.2 双向电泳结果讨论 | 第69-71页 |
4.3 SIS生物标志物的生物功能分析 | 第71-73页 |
第四章 柑橘炎症相关分子标记的开发及应用 | 第73-99页 |
1 引言 | 第73-74页 |
2 材料与方法 | 第74-83页 |
2.1 柑橘材料与实验试剂 | 第74-76页 |
2.2 实验方法 | 第76-83页 |
2.2.1 柑橘组织RNA抽取 | 第76-77页 |
2.2.2 cDNA的合成 | 第77页 |
2.2.3 CitSH1表达分析 | 第77-78页 |
2.2.4 柑橘基因组DNA提取 | 第78页 |
2.2.5 启动子克隆 | 第78-79页 |
2.2.6 回收,转化和测序 | 第79-80页 |
2.2.7 分子标记的开发及应用 | 第80页 |
2.2.8 柑橘果肉总蛋白提取及蛋白定量 | 第80-81页 |
2.2.9 RAW264.7细胞培养 | 第81-82页 |
2.2.10 不同处理条件下COX-2表达检测 | 第82页 |
2.2.11 细胞总RNA提取 | 第82-83页 |
3 结果 | 第83-93页 |
3.1 CitSH1基因表达分析 | 第83-86页 |
3.2 启动子克隆及序列分析 | 第86-88页 |
3.3 分子标记开发及应用 | 第88-90页 |
3.4 分子标记的遗传 | 第90-91页 |
3.5 分子标记与促炎基因CitSH1表达量之间关系 | 第91-92页 |
3.6 分子标记与柑橘促炎性状之间的关系 | 第92-93页 |
4 讨论 | 第93-99页 |
4.1 CitSH1在植物中的功能 | 第93-94页 |
4.2 小卫星增加了CitSH1启动子的类型 | 第94-96页 |
4.3 柑橘蛋白成分的促炎作用与人体的口服耐受 | 第96-97页 |
4.4 柑橘功能性成分的抗炎作用 | 第97-99页 |
参考文献 | 第99-117页 |
附录Ⅰ 温州蜜柑诱导综合症问卷评分系统 | 第117-118页 |
附录Ⅱ 攻读博士期间发表的论文 | 第118-119页 |
致谢 | 第119页 |