| 中文摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 缩略词表 | 第14-15页 |
| 第—章 前言 | 第15-33页 |
| 第一节 肺炎链球菌疫苗 | 第15-24页 |
| (一) 肺炎链球菌与肺炎链球菌疾病的危害 | 第15-16页 |
| (二) 肺炎链球菌疫苗的现状 | 第16-19页 |
| (三) 肺炎链球菌蛋白疫苗的研发现状 | 第19-24页 |
| 第二节 细菌样颗粒(BLP)技术 | 第24-27页 |
| 第三节 论文设计 | 第27-33页 |
| (一) 论文目的 | 第27页 |
| (二) 实验设计 | 第27-33页 |
| 第二章 肺炎链球菌重组蛋白疫苗PsaA-PspA与PspA4蛋白的制备与评价 | 第33-79页 |
| 第一节 材料、试剂与仪器 | 第33-38页 |
| (一) 主要仪器 | 第33-34页 |
| (二) 菌株、载体、细胞和动物 | 第34-35页 |
| (三) 酶及试剂盒 | 第35页 |
| (四) 主要试剂 | 第35-36页 |
| (五) 主要溶液的配制 | 第36-38页 |
| 第二节 实验方法 | 第38-49页 |
| (一) 转化 | 第38页 |
| (二) 质粒的小量提取 | 第38-39页 |
| (三) 核酸的琼脂糖凝胶回收 | 第39-40页 |
| (四) 目的基因的选取、密码子的优化及表达载体的构建 | 第40-43页 |
| (五) SDS-PAGE蛋白凝胶电泳 | 第43-44页 |
| (六) Western-Blot检测 | 第44页 |
| (七) PsaA-PspA融合蛋白与PspA4蛋白的表达 | 第44-45页 |
| (八) PsaA-PspA融合蛋白与PspA4蛋白的纯化 | 第45-46页 |
| (九) PsaA-PspA融合蛋白与PspA4蛋白的免疫效果评价 | 第46-49页 |
| 第三节 结果与讨论 | 第49-77页 |
| (一) pET20b-PsaA-PspA表达质粒的构建 | 第49-51页 |
| (二) pET20b-PspA4表达质粒的构建 | 第51-52页 |
| (三) PsaA-PspA融合蛋白的表达、纯化与鉴定 | 第52-56页 |
| (四) PspA4蛋白的表达、纯化与鉴定 | 第56-59页 |
| (五) PsaA-PspA与PspA4蛋白的免疫原性检测 | 第59-60页 |
| (六) PsaA-PspA与PspA4蛋白刺激脾细胞分泌IL-17A细胞因子研究 | 第60-61页 |
| (七) PsaA-PspA与PspA4蛋白免疫血清的广谱性研究 | 第61-65页 |
| (八) PsaA-PspA与PspA4蛋白的免疫保护性研究 | 第65-74页 |
| (九) 讨论 | 第74-77页 |
| 第四节 本章小结 | 第77-79页 |
| 第三章 BLP技术在肺炎链球菌蛋白疫苗中的应用 | 第79-133页 |
| 第一节 材料、试剂与仪器 | 第79-80页 |
| (一) 菌种及载体 | 第79页 |
| (二) 主要试剂及仪器 | 第79页 |
| (三) 酶及试剂盒 | 第79-80页 |
| (四) 主要溶液的配制方法 | 第80页 |
| 第二节 实验方法 | 第80-96页 |
| (一) 肺炎链球菌蛋白疫苗抗原的确定与设计 | 第80页 |
| (二) 肺炎链球菌蛋白抗原表达质粒的构建 | 第80-91页 |
| (三) BLP的制备、鉴定与定量方法的建立 | 第91-93页 |
| (四) Plym2-PA- BLP、PspA2-PA- BLP与PspA4-PA-BLP疫苗的制备与鉴定 | 第93-94页 |
| (五) Plym2-PA-BLP、PspA2-PA-BLP与PspA4-PA-BLP疫苗的免疫效果评价 | 第94-96页 |
| 第三节 结果与讨论 | 第96-130页 |
| (一) Plym2-PA、PspA2-PA与PspA4-PA融合蛋白的制备 | 第96-109页 |
| (二) BLP的制备、鉴定与定量方法的建立 | 第109-111页 |
| (三) Plym2-PA-BLP、PspA2-PA-BLP与PspA4-PA-BLP疫苗的制备与鉴定 | 第111-117页 |
| (四) Plym2-PA-BLP、PspA2-PA-BLP与PspA4-PA-BLP疫苗免疫原性检测 | 第117-124页 |
| (五) Plym2-PA-BLP、PspA2-PA-BLP与PspA4-PA-BLP疫苗免疫保护性研究 | 第124-127页 |
| (六) 讨论 | 第127-130页 |
| 第四节 本章小结 | 第130-133页 |
| 结论 | 第133-137页 |
| 一、系统免疫疫苗 | 第133-134页 |
| 二、粘膜免疫疫苗 | 第134-137页 |
| 参考文献 | 第137-149页 |
| 作者简介及在学期间所获得的科研成果 | 第149-151页 |
| 致谢 | 第151页 |
