| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 缩略表 | 第13-16页 |
| 1 文献综述 | 第16-43页 |
| 1.1 流感病毒的综述 | 第16-29页 |
| 1.1.1 流感病毒的分类 | 第16页 |
| 1.1.2 流感病毒的形态和结构 | 第16-19页 |
| 1.1.3 流感病毒的生命周期 | 第19-22页 |
| 1.1.4 流感病毒的传播与宿主 | 第22-23页 |
| 1.1.5 流感病毒的致病机理 | 第23-29页 |
| 1.2 脱水穿心莲内酯的研究概况 | 第29-32页 |
| 1.2.1 脱水穿心莲内酯的简介 | 第29-30页 |
| 1.2.2 脱水穿心莲内酯及其它主要内酯类化合物的药理作用 | 第30-32页 |
| 1.2.3 穿心莲及其内酯类化合物的临床应用 | 第32页 |
| 1.3 抗流感病毒药物的研究现状 | 第32-43页 |
| 1.3.1 神经氨酸酶抑制剂 | 第32-34页 |
| 1.3.2 M2离子通道抑制剂 | 第34-35页 |
| 1.3.3 细胞信号通路的抑制剂 | 第35-39页 |
| 1.3.4 流感病毒复制的阻断剂 | 第39-40页 |
| 1.3.5 抗流感病毒的天然药物 | 第40-43页 |
| 2 研究的目的和意义 | 第43-44页 |
| 3 材料与方法 | 第44-64页 |
| 3.1 材料 | 第44-48页 |
| 3.1.1 细胞 | 第44页 |
| 3.1.2 病毒 | 第44页 |
| 3.1.3 实验动物 | 第44页 |
| 3.1.4 抗体 | 第44-45页 |
| 3.1.5 主要药品、试剂与试剂盒 | 第45-47页 |
| 3.1.6 主要仪器和设备 | 第47-48页 |
| 3.1.7 动物实验需要的材料 | 第48页 |
| 3.2 方法 | 第48-64页 |
| 3.2.1 CCK-8方法检测药物对细胞的毒性 | 第48页 |
| 3.2.2 细胞上感染病毒后给药及细胞病变的观察 | 第48-49页 |
| 3.2.3 TCID_(50)方法检测病毒的滴度 | 第49页 |
| 3.2.4 细胞病变抑制实验 | 第49-50页 |
| 3.2.5 血凝实验与血凝抑制实验 | 第50页 |
| 3.2.6 神经氨酸酶抑制实验 | 第50页 |
| 3.2.7 间接免疫荧光实验 | 第50-51页 |
| 3.2.8 RNA的提取 | 第51-52页 |
| 3.2.9 荧光定量PCR | 第52-53页 |
| 3.2.10 SDS-PAGE电泳 | 第53-54页 |
| 3.2.11 蛋白质转膜 | 第54-55页 |
| 3.2.12 Westernblot实验 | 第55页 |
| 3.2.13 流式细胞法检测细胞凋亡 | 第55-56页 |
| 3.2.14 流式细胞法检测线粒体膜电势 | 第56-57页 |
| 3.2.15 化学发光法检测Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的活性 | 第57页 |
| 3.2.16 ELISA法测定IFN-β的浓度 | 第57-58页 |
| 3.2.17 线粒体的分离和提取 | 第58页 |
| 3.2.18 动物实验 | 第58-63页 |
| 3.2.19 统计分析软件 | 第63-64页 |
| 4 结果与分析 | 第64-93页 |
| 4.1 脱水穿心莲内酯体外抗流感病毒效果的评价 | 第64-84页 |
| 4.1.1 脱水穿心莲内酯的细胞毒性检测 | 第64-65页 |
| 4.1.2 脱水穿心莲内酯抗不同流感病毒效果的筛选 | 第65页 |
| 4.1.3 脱水穿心莲内酯对流感病毒导致的CPE的抑制效果 | 第65-67页 |
| 4.1.4 脱水穿心莲内酯抗流感病毒感染的量效关系 | 第67页 |
| 4.1.5 脱水穿心莲内酯对细胞形态及对流感病毒导致的细胞病变的影响 | 第67-68页 |
| 4.1.6 脱水穿心莲内酯对流感病毒感染细胞时吸附过程的影响 | 第68-69页 |
| 4.1.7 脱水穿心莲内酯对流感病毒感染细胞时解离过程的影响 | 第69-70页 |
| 4.1.8 荧光定量实验检测脱水穿心莲内酯对流感病毒的NP mRNA产生的影响 | 第70-71页 |
| 4.1.9 间接免疫荧光实验检测脱水穿心莲内酯对流感病毒NP蛋白产生的影响 | 第71页 |
| 4.1.10 Westernblot检测脱水穿心莲内酯对流感病毒NP和NS1蛋白表达的影响 | 第71-73页 |
| 4.1.11 脱水穿心莲内酯对流感病毒vRNP复合物出核的影响 | 第73-74页 |
| 4.1.12 荧光定量检测脱水穿心莲内酯对炎性因子/趋化因子表达的影响 | 第74-75页 |
| 4.1.13 ELISA检测脱水穿心莲内酯对IFN-β表达的影响 | 第75-76页 |
| 4.1.14 流式细胞法检测脱水穿心莲内酯对流感病毒诱导的细胞凋亡的影响 | 第76页 |
| 4.1.15 Westernblot检测脱水穿心莲内酯对Cleaved-PARP p89和Caspase-3(active)蛋白表达的影响 | 第76-77页 |
| 4.1.16 Westernblot检测脱水穿心莲内酯对Cleaved-Caspase-8和Cleaved-Caspase-9蛋白表达的影响 | 第77-79页 |
| 4.1.17 化学发光法检测脱水穿心莲内酯对Caspase-3,Caspase-8和Caspase-9活性的影响 | 第79页 |
| 4.1.18 Caspase抑制剂对脱水穿心莲内酯抑制细胞凋亡活性的影响 | 第79-81页 |
| 4.1.19 脱水穿心莲内酯对细胞凋亡过程中线粒体膜电势的影响 | 第81-82页 |
| 4.1.20 Westemblot检测脱水穿心莲内酷对Cytochrome C,Bax和Bcl-2等蛋白表达的影响 | 第82-83页 |
| 4.1.21 Westernblot检测脱水穿心莲内酯对Akt, p65和ERK等蛋白激活表达的影响 | 第83-84页 |
| 4.2 脱水穿心莲内酯体内抗流感病毒效果的评价 | 第84-93页 |
| 4.2.1 脱水穿心莲内酯在小鼠体内毒性的检测 | 第84页 |
| 4.2.2 脱水穿心莲内酯(单剂量)体内抗流感病毒效果评价 | 第84-90页 |
| 4.2.3脱水穿心莲内酯(双剂量)体内抗流感病毒效果评价 | 第90-93页 |
| 5 讨论 | 第93-101页 |
| 5.1 穿心莲内酯类药物的筛选 | 第94页 |
| 5.2 脱水穿心莲内酯抗流感作用的广谱性和现实意义 | 第94-95页 |
| 5.3 脱水穿心莲内酯抗病毒环节的探讨 | 第95-96页 |
| 5.4 脱水穿心莲内酯的抗炎效果及其与抗病毒作用的联系 | 第96-97页 |
| 5.5 脱水穿心莲内酯抑制流感病毒导致的细胞凋亡作用 | 第97-98页 |
| 5.6 脱水穿心莲内酯抑制NS1蛋白的表达和降低IFN-β水平的关系 | 第98-99页 |
| 5.7 动物实验中脱水穿心莲内酯灌胃剂量的确定 | 第99页 |
| 5.8 体内与体外实验结果的一致性 | 第99-101页 |
| 6 结论 | 第101-102页 |
| 参考文献 | 第102-114页 |
| 个人简历 | 第114-115页 |
| 已发表及待发表的主要论文 | 第115-116页 |
| 致谢 | 第116页 |
