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玉米高亲和钾转运体ZmHAK1的亚细胞定位及其功能研究

中文摘要第5-7页
abstract第7-8页
第1章 文献综述第13-24页
    1.1 钾素资源的现状第13-14页
        1.1.1 钾素在土壤中的概况第13-14页
        1.1.2 钾素在植物中的功能和运输第14页
    1.2 植物的钾转运蛋白第14-17页
        1.2.1 植物的KUP/HAK/KT家族高亲和钾转运体蛋白第15-17页
        1.2.2 玉米的高亲和钾转运体蛋白ZmHAK第17页
    1.3 亚细胞定位第17-20页
        1.3.1 亚细胞定位的方法第18-19页
        1.3.2 基于融合报告基因法的植物亚细胞定位瞬时表达方法第19-20页
    1.4 RNA干扰第20-23页
        1.4.1 RNA干扰的原理第21-22页
        1.4.2 RNA干扰的应用第22-23页
    1.5 研究目的与意义第23-24页
第2章 ZmHAK1基因的亚细胞定位第24-36页
    2.1 材料与方法第24-31页
        2.1.1 实验材料第24-25页
        2.1.2 扩增带有attB接头的ZmHAK1基因第25-27页
        2.1.3 构建含有ZmHAK1基因的入门载体第27-28页
        2.1.4 构建含有ZmHAK1基因的表达载体第28-29页
        2.1.5 目的基因的亚细胞定位第29-31页
    2.2 结果与分析第31-35页
        2.2.1 带attB接头的ZmHAK1基因PCR扩增验证第31-32页
        2.2.2 pEarleyGate101-ZmHAK1表达载体的鉴定第32-33页
        2.2.3 转入pEarleyGate101-ZmHAK1表达载体的农杆菌PCR鉴定第33页
        2.2.4 ZmHAK1的亚细胞定位第33-35页
    2.3 讨论第35-36页
        2.3.1 烟草叶片注射法进行的亚细胞定位研究第35页
        2.3.2 ZmHAK1基因的亚细胞定位第35-36页
第3章 ZmHAK1基因RNA干扰载体转化拟南芥第36-46页
    3.1 材料与方法第36-42页
        3.1.1 实验材料第36-37页
        3.1.2 RNA干扰载体转入农杆菌感受态细胞第37-39页
        3.1.3 植物材料的培养第39页
        3.1.4 蘸花侵染法转化拟南芥第39页
        3.1.5 转基因拟南芥的筛选第39-40页
        3.1.6 转基因拟南芥基因组DNA的PCR检测第40-42页
    3.2 结果与分析第42-45页
        3.2.1 ZmHAK1基因RNA干扰载体转化菌种的验证第42页
        3.2.2 转入ZmHAK1基因RNA干扰载体的农杆菌PCR鉴定第42-43页
        3.2.3 转基因阳性苗的筛选第43-44页
        3.2.4 T1代转基因拟南芥DNA的PCR鉴定第44页
        3.2.5 转基因拟南芥的稳定性检测第44-45页
    3.3 讨论第45-46页
第4章 转RNA干扰载体拟南芥的耐低钾胁迫研究第46-61页
    4.1 材料与方法第46-50页
        4.1.1 实验材料第46-47页
        4.1.2 拟南芥根伸长量的测量第47页
        4.1.3 植物材料的处理第47页
        4.1.4 qRT-PCR定量分析第47-49页
        4.1.5 拟南芥钾含量的测定和钾利用指数的计算第49-50页
    4.2 结果与分析第50-59页
        4.2.1 RNA干扰株系的根系伸长量比较分析第50-51页
        4.2.2 拟南芥总RNA提取的鉴定第51页
        4.2.3 低钾胁迫诱导ZmHAK1基因表达量的分析第51-53页
        4.2.4 低钾胁迫下拟南芥植株生长势的分析第53-58页
        4.2.5 植株吸钾量的分析第58页
        4.2.6 钾利用指数的分析第58-59页
    4.3 讨论第59-61页
        4.3.1 拟南芥的水培第59页
        4.3.2 RNA干扰株系耐低钾胁迫的研究第59-61页
第5章 ZmHAK1基因RNA干扰载体转化玉米自交系第61-66页
    5.1 材料与方法第61-63页
        5.1.1 实验材料第61-62页
        5.1.2 植物材料的培养第62页
        5.1.3 自交系玉米的转化第62-63页
        5.1.4 转基因玉米的筛选第63页
        5.1.5 转基因玉米DNA的PCR检测第63页
    5.2 结果与分析第63-65页
        5.2.1 转基因阳性苗的筛选第63-64页
        5.2.2 T1代转基因玉米DNA的PCR检测第64-65页
    5.3 讨论第65-66页
研究结论第66-67页
参考文献第67-75页
作者介绍第75-76页
致谢第76页

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