| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 前言 | 第12-22页 |
| 1 斑翅果蝇概述 | 第12-17页 |
| 1.1 斑翅果蝇的分类及形态特征 | 第12页 |
| 1.2 分布与危害 | 第12-13页 |
| 1.3 生态习性 | 第13-14页 |
| 1.4 综合防治 | 第14-17页 |
| 2 昆虫嗅觉系统 | 第17-20页 |
| 2.1 参与昆虫嗅觉机制的主要蛋白分子 | 第17-19页 |
| 2.2 昆虫嗅觉识别机制 | 第19-20页 |
| 3 非典型嗅觉受体Orco的概述 | 第20页 |
| 4 本课题的研究意义和主要内容 | 第20-22页 |
| 第二章 斑翅果蝇Orco基因的克隆验证及生物信息学分析 | 第22-43页 |
| 1 实验材料 | 第22-23页 |
| 1.1 实验虫源 | 第22页 |
| 1.2 实验试剂和耗材 | 第22页 |
| 1.3 实验仪器和设备 | 第22-23页 |
| 1.4 主要试剂 | 第23页 |
| 2 试验方法 | 第23-31页 |
| 2.1 饲养方法 | 第23-24页 |
| 2.2 供试虫源 | 第24页 |
| 2.3 总RNA提取 | 第24-25页 |
| 2.4 反转录合成第一链cDNA和gDNA去除 | 第25页 |
| 2.5 PCR扩增Orco基因部分编码区序列 | 第25-27页 |
| 2.6 斑翅果蝇Orco基因全长克隆 | 第27-30页 |
| 2.7 全长序列拼接 | 第30-31页 |
| 2.8 克隆所得序列与Genbank中查询的序列对比分析 | 第31页 |
| 2.9 斑翅果蝇Orco基因的生物信息学分析 | 第31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-41页 |
| 3.1 斑翅果蝇总RNA提取和质量检测 | 第31-32页 |
| 3.2 斑翅果蝇Orco基因全长序列拼接 | 第32-33页 |
| 3.3 克隆所得序列与Genbank中查询的序列对比分析结果 | 第33页 |
| 3.4 斑翅果蝇Orco生物信息学分析结果 | 第33-41页 |
| 4 讨论 | 第41-43页 |
| 第三章 斑翅果蝇非典型嗅觉受体Orco基因的表达谱分析 | 第43-51页 |
| 1 实验材料 | 第43页 |
| 1.1 供试虫源 | 第43页 |
| 1.2 实验试剂和耗材 | 第43页 |
| 1.3 实验仪器和设备 | 第43页 |
| 2 试验方法 | 第43-47页 |
| 2.1 斑翅果蝇成虫不同组织样品收集 | 第43页 |
| 2.2 斑翅果蝇不同发育时期样品收集 | 第43页 |
| 2.3 引物设计 | 第43-44页 |
| 2.4 实时荧光定量检测斑翅果蝇成虫各组织Orco基因表达量 | 第44-46页 |
| 2.5 实时荧光定量检测斑翅果蝇各时期Orco基因表达量 | 第46-47页 |
| 2.6 数据统计与分析 | 第47页 |
| 3 结果与分析 | 第47-49页 |
| 3.1 目的基因引物特异性检测 | 第47页 |
| 3.2 斑翅果蝇成虫各组织Orco基因表达量分析 | 第47-48页 |
| 3.3 斑翅果蝇各时期Orco基因表达量分析 | 第48-49页 |
| 4 讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 斑翅果蝇非典型嗅觉受体Orco基因的功能鉴定 | 第51-62页 |
| 1 实验材料 | 第51-52页 |
| 1.1 供试虫源 | 第51页 |
| 1.2 实验试剂和耗材 | 第51页 |
| 1.3 实验仪器和设备 | 第51-52页 |
| 2 实验方法 | 第52-57页 |
| 2.1 dsRNA沉默斑翅果蝇Orco基因的表达 | 第52-56页 |
| 2.2 注射后试虫存活率统计及qPCR样品采集 | 第56页 |
| 2.3 注射后目的基因表达的qPCR分析 | 第56页 |
| 2.4 RNA干扰后斑翅果蝇行为学检测实验 | 第56-57页 |
| 2.5 数据统计与分析 | 第57页 |
| 3 结果与分析 | 第57-60页 |
| 3.1 dsRNA的合成 | 第57-58页 |
| 3.2 注射后成虫存活率统计 | 第58-59页 |
| 3.3 RNA干扰后基因表达的qPCR分析 | 第59-60页 |
| 3.4 行为学测定结果 | 第60页 |
| 4 讨论 | 第60-62页 |
| 第五章 结论与展望 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-75页 |
| 附图 | 第75-77页 |
| 攻读学位期间的学术论文与研究成果 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
