| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 英文缩略语 | 第11-16页 |
| 第一部分 ：miR-155-5p在外阴硬化性苔藓患者中的表达水平的研究 | 第16-31页 |
| 1 前言 | 第16-17页 |
| 2 材料和方法 | 第17-26页 |
| 2.1 实验材料 | 第17页 |
| 2.1.1 外阴硬化性苔藓患者组织标本 | 第17页 |
| 2.2 主要试剂 | 第17-18页 |
| 2.2.1 miRNA芯片检测主要试剂 | 第17-18页 |
| 2.2.2 qRT-PCR主要试剂 | 第18页 |
| 2.3 主要仪器 | 第18-19页 |
| 2.4 实验方法 | 第19-25页 |
| 2.4.1 miRNA芯片检测 | 第19-23页 |
| 2.4.2 逆转录-聚合酶链反应(qRT-PCR) | 第23-25页 |
| 2.5 统计学方法 | 第25-26页 |
| 3 结果 | 第26-29页 |
| 3.1 外阴硬化性苔藓差异表达的miRNA | 第26-27页 |
| 3.2 miR-155-5p在外阴硬化性苔藓组织高表达 | 第27-29页 |
| 4 讨论 | 第29-30页 |
| 5 结论 | 第30-31页 |
| 第二部分 ：miR-155-5p通过调节FOXO信号通路调控成纤维细胞的增殖 | 第31-54页 |
| 1 前言 | 第31-32页 |
| 2 材料和方法 | 第32-40页 |
| 2.1 实验材料 | 第32页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第32页 |
| 2.2 主要试剂 | 第32-35页 |
| 2.2.1 细胞培养相关试剂 | 第32页 |
| 2.2.2 qRT-PCR相关试剂 | 第32页 |
| 2.2.3 细胞转染试剂 | 第32页 |
| 2.2.4 MTT试剂 | 第32页 |
| 2.2.5 流式细胞周期试剂 | 第32页 |
| 2.2.6 WesternBlot相关试剂 | 第32-35页 |
| 2.3 主要仪器 | 第35页 |
| 2.4 实验方法 | 第35-39页 |
| 2.4.1 人成纤维细胞系HFF-1的培养 | 第35-36页 |
| 2.4.2 细胞转染 | 第36页 |
| 2.4.3 MTT细胞增殖实验 | 第36-37页 |
| 2.4.4 流式细胞术 | 第37页 |
| 2.4.5 逆转录-聚合酶链反应(qRT-PCR) | 第37页 |
| 2.4.6 双荧光素酶报告基因实验 | 第37-38页 |
| 2.4.7 蛋白样品制备 | 第38页 |
| 2.4.8 BCA法检测蛋白浓度 | 第38页 |
| 2.4.9 HFF-1总蛋白的处理 | 第38页 |
| 2.4.10 SDS-PAGE电泳： | 第38-39页 |
| 2.5 统计学方法 | 第39-40页 |
| 3 结果 | 第40-48页 |
| 3.1 过表达或干扰miR-155-5p表达的效果检测 | 第40页 |
| 3.2 miR-155-5p对成纤维细胞增殖的影响 | 第40-41页 |
| 3.3 miR-155-5p对成纤维细胞的细胞周期进程的影响 | 第41-42页 |
| 3.4 miR-155-5p与FOXO3结合目标靶点预测 | 第42-43页 |
| 3.5 miR-155-5p与FOXO3结合目标靶点验证 | 第43页 |
| 3.6 miR-155-5p与CDKN1B结合目标靶点预测 | 第43-44页 |
| 3.7 miR-155-5p与CDKN1B结合目标靶点验证 | 第44页 |
| 3.8 miR-155-5p调控FOXO3基因和CDKN1B基因的表达研究 | 第44-45页 |
| 3.9 miR-155-5p与FOXO3基因及CDKN1B基因在外阴硬化性苔藓患者病变组织样本中的表达及相互关系 | 第45-46页 |
| 3.10 miR-155-5p过表达抑制FOXO信号通路激活 | 第46-47页 |
| 3.11 miR-155-5p表达沉默促进FOXO信号通路激活 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 第三部分 ：miR-155-5p靶向FOXO3和CDKN1B影响成纤维细胞增殖 | 第54-64页 |
| 1 前言 | 第54-55页 |
| 2 材料和方法 | 第55-59页 |
| 2.1 实验材料 | 第55页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第55页 |
| 2.2 主要试剂 | 第55页 |
| 2.2.1 细胞培养相关试剂 | 第55页 |
| 2.2.2 蛋白免疫印迹相关试剂 | 第55页 |
| 2.2.3 细胞转染试剂 | 第55页 |
| 2.2.4 MTT试剂 | 第55页 |
| 2.2.5 流式细胞周期试剂 | 第55页 |
| 2.3 主要仪器 | 第55-56页 |
| 2.4 实验方法 | 第56-58页 |
| 2.4.1 人成纤维细胞系HFF-1的培养及转染 | 第56-57页 |
| 2.4.2 MTT细胞实验 | 第57页 |
| 2.4.3 流式细胞术 | 第57-58页 |
| 2.4.4 蛋白免疫印迹法 | 第58页 |
| 2.5 统计学方法 | 第58-59页 |
| 3 结果 | 第59-62页 |
| 3.1 HFF-1细胞中干扰FOXO3或CDKN1B的效果验证 | 第59页 |
| 3.2 干扰FOXO3或CDKN1B的表达促进成纤维细胞的增殖 | 第59-60页 |
| 3.3 干扰FOXO3或CDKN1B的表达对成纤维细胞的细胞周期进程的影响 | 第60-61页 |
| 3.4 miR-155-5p靶向FOXO3和CDKN1B影响成纤维细胞增殖 | 第61-62页 |
| 4 讨论 | 第62-63页 |
| 5 结论 | 第63-64页 |
| 本研究创新性的自我评价 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 综述 | 第73-80页 |
| 参考文献 | 第77-80页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81-83页 |
| 个人简历 | 第83页 |
