摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5页 |
第1章 绪论 | 第8-20页 |
1.1 Fe/S簇 | 第8-9页 |
1.1.1 Fe/S簇的发现 | 第8页 |
1.1.2 Fe/S簇的重要作用 | 第8-9页 |
1.2 真核细胞线粒体中Fe/S簇的装配 | 第9-13页 |
1.3 细胞质中Fe/S簇的装配 | 第13-14页 |
1.4 Dre2的发现及其重要作用 | 第14-16页 |
1.5 EPR方法用于Fe/S簇的研究 | 第16-18页 |
1.5.1 电子顺磁共振的发现与应用 | 第16页 |
1.5.2 电子顺磁共振的原理 | 第16页 |
1.5.3 电子顺磁共振的组成 | 第16-17页 |
1.5.4 电子顺磁共振的检测分类 | 第17页 |
1.5.5 电子顺磁共振的g因子 | 第17-18页 |
1.6 本课题研究意义 | 第18-20页 |
第2章 实验材料与方法 | 第20-38页 |
2.1 实验材料 | 第20-29页 |
2.1.1 菌株和质粒 | 第20-21页 |
2.1.2 引物 | 第21-22页 |
2.1.3 培养基及缓冲液 | 第22-26页 |
2.1.4 重要试剂和试剂盒 | 第26-28页 |
2.1.5 仪器设备 | 第28-29页 |
2.2 实验方法 | 第29-38页 |
2.2.1 大肠杆菌BL21和DH5α感受态细胞的制备 | 第29-30页 |
2.2.2 质粒的转化 | 第30页 |
2.2.3 质粒的定点突变 | 第30-31页 |
2.2.4 Dre2以及各种突变体蛋白的表达和纯化 | 第31-32页 |
2.2.5 EPR图谱实验 | 第32-33页 |
2.2.6 无氧条件下Fe/S簇的重新构建 | 第33页 |
2.2.7 酿酒酵母的转化 | 第33-35页 |
2.2.8 蛋白质印迹 | 第35-38页 |
第3章 实验结果 | 第38-52页 |
3.1 不同来源Dre2氨基酸序列的对比 | 第38-39页 |
3.2 EPR用于Dre2中Fe/S簇的研究 | 第39-45页 |
3.2.1 Dre2-C116A突变体的EPR分析 | 第39-40页 |
3.2.2 Dre2保守CXnCX2CXC区域突变体的EPR分析 | 第40-41页 |
3.2.3 Dre2保守CX2C区域突变体的EPR分析 | 第41-42页 |
3.2.4 Fe/S簇中g因子的研究 | 第42-44页 |
3.2.5 人同源anamorsin(hDre2)的EPR分析 | 第44-45页 |
3.3 紫外可见光吸收光谱用于Dre2中Fe/S簇的研究 | 第45-46页 |
3.4 Dre2对于细胞生长的研究 | 第46-50页 |
3.4.1 Dre2对于细胞生长的作用 | 第47-49页 |
3.4.2 anamorsin(hDre2)对于细胞生长影响的研究 | 第49-50页 |
3.5 Dre2蛋白表达水平与细胞生长相互关系的研究 | 第50-52页 |
第4章 实验讨论 | 第52-60页 |
4.1 蛋白纯化过程的研究 | 第52-55页 |
4.2 Cys252对于细胞生长影响的研究 | 第55-57页 |
4.3 紫外可见光吸收光谱用于Dre2-C325A中Fe/S簇的研究 | 第57-60页 |
第5章 实验结论与展望 | 第60-62页 |
5.1 实验结论 | 第60-61页 |
5.2 前景展望 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-70页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第70-72页 |
致谢 | 第72-73页 |