| 中文摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 第1章 引言 | 第10-24页 |
| 1.1 寨卡病毒与寨卡热 | 第10-15页 |
| 1.1.1 寨卡病毒的一般生物学特性 | 第10-11页 |
| 1.1.2 寨卡病毒流行病学 | 第11-13页 |
| 1.1.3 寨卡病毒传播途径 | 第13-14页 |
| 1.1.3.1 机械性传播 | 第13页 |
| 1.1.3.2 性传播 | 第13页 |
| 1.1.3.3 母婴传播 | 第13页 |
| 1.1.3.4 血液传播 | 第13-14页 |
| 1.1.4 寨卡病毒感染的临床表现 | 第14页 |
| 1.1.5 寨卡病毒的诊断、治疗和预防 | 第14-15页 |
| 1.2 寨卡病毒关健药物靶点在结构研究中的进展 | 第15-18页 |
| 1.2.1 全病毒的结构研究 | 第15页 |
| 1.2.2 E蛋白的结构研究 | 第15-16页 |
| 1.2.3 非结构蛋白NS1的结构研究 | 第16-17页 |
| 1.2.4 非结构蛋白NS2B-NS3pro蛋白酶的结构研究 | 第17-18页 |
| 1.2.5 非结构蛋白NS5的结构研究 | 第18页 |
| 1.3 黄病毒属解旋酶的研究进展 | 第18-21页 |
| 1.3.1 登革热病毒(DENV)解旋酶的研究进展 | 第20页 |
| 1.3.2 乙型脑炎病毒(JEV)解旋酶的研究进展 | 第20-21页 |
| 1.3.3 西尼罗病毒(WNV)解旋酶的研究进展 | 第21页 |
| 1.4 研究内容与意义 | 第21-24页 |
| 第2章 材料与方法 | 第24-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-28页 |
| 2.1.1 质粒载体 | 第24页 |
| 2.1.2 cDNA | 第24页 |
| 2.1.3 引物 | 第24-25页 |
| 2.1.4 扩增及表达菌株 | 第25页 |
| 2.1.5 实验试剂 | 第25-27页 |
| 2.1.6 实验仪器 | 第27-28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-38页 |
| 2.2.1 基因克隆 | 第28-31页 |
| 2.2.1.1 聚合酶链式反应PCR | 第28-29页 |
| 2.2.1.2 限制性内切酶酶切体系 | 第29页 |
| 2.2.1.3 琼脂糖凝胶DNA回收 | 第29-30页 |
| 2.2.1.4 基因片段连接 | 第30页 |
| 2.2.1.5 感受态细胞的转化 | 第30页 |
| 2.2.1.6 质粒提取(以小提质粒为例) | 第30-31页 |
| 2.2.2 蛋白的表达与纯化 | 第31-33页 |
| 2.2.2.1 蛋白最佳表达条件的筛选 | 第31-32页 |
| 2.2.2.2 蛋白的大量表达与纯化 | 第32-33页 |
| 2.2.3 蛋白ATPase活性测定 | 第33-34页 |
| 2.2.4 同位素标记法测定蛋白的RNA解旋活性 | 第34页 |
| 2.2.4.1 双链RNA的制备和标记 | 第34页 |
| 2.2.4.2 测定RNA解旋活性 | 第34页 |
| 2.2.5 蛋白质结晶 | 第34-36页 |
| 2.2.5.1 结晶条件筛选 | 第34-35页 |
| 2.2.5.2 晶体优化 | 第35-36页 |
| 2.2.6 蛋白质晶体的数据收集与结构解析 | 第36-38页 |
| 2.2.6.1 衍射数据的收集与处理 | 第36页 |
| 2.2.6.2 晶体结构的解析 | 第36-38页 |
| 第3章 寨卡病毒解旋酶的结构研究 | 第38-50页 |
| 3.1 寨卡病毒解旋酶的高分辨率三维空间结构解析 | 第38-43页 |
| 3.1.1 寨卡病毒解旋酶的载体构建 | 第38页 |
| 3.1.2 寨卡病毒解旋酶的表达和纯化 | 第38-40页 |
| 3.1.3 寨卡病毒解旋酶的晶体筛选及优化 | 第40-41页 |
| 3.1.4 寨卡病毒解旋酶的结构解析 | 第41-43页 |
| 3.2 寨卡病毒解旋酶总体结构 | 第43-45页 |
| 3.3 寨卡病毒解旋酶的NTP水解活性位点 | 第45-48页 |
| 3.4 寨卡病毒解旋酶的RNA结合位点 | 第48-50页 |
| 第4章 寨卡病毒解旋酶识别底物的机制研究 | 第50-64页 |
| 4.1 寨卡病毒解旋酶识别ATP-Mn2+和RNA的复合物结构解析 | 第50-56页 |
| 4.1.1 寨卡病毒解旋酶及其截短体的载体构建 | 第50页 |
| 4.1.2 寨卡病毒解旋酶及其截短体的表达和纯化 | 第50-51页 |
| 4.1.3 寨卡病毒解旋酶识别底物的复合物晶体筛选及优化 | 第51-53页 |
| 4.1.4 寨卡病毒解旋酶识别底物的复合物结构解析 | 第53-56页 |
| 4.2 寨卡病毒解旋酶的ATP水解活性和RNA解旋活性 | 第56-57页 |
| 4.2.1 寨卡病毒解旋酶的ATP水解活性 | 第56-57页 |
| 4.2.2 寨卡病毒解旋酶的RNA解旋活性 | 第57页 |
| 4.3 寨卡病毒解旋酶识别ATP-Mn2+的复合物结构 | 第57-59页 |
| 4.4 寨卡病毒解旋酶识别RNA的复合物结构 | 第59-64页 |
| 4.4.1 整体结构 | 第59-60页 |
| 4.4.2 RNA结合诱导构象变化 | 第60-61页 |
| 4.4.3 RNA识别 | 第61-64页 |
| 第5章 研究结论及意义 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-76页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第76-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
