| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 引言 | 第10-13页 |
| 1 材料与仪器 | 第13-19页 |
| 1.1 主要仪器设备 | 第13-14页 |
| 1.2 主要试剂 | 第14-15页 |
| 1.3 菌株与质粒 | 第15页 |
| 1.4 主要溶液的配制 | 第15-19页 |
| 2 实验方法 | 第19-39页 |
| 2.1 pET-28a(+)-preproHNP1、pET-28a(+)-proHNP1和pGEX-4T-3-preproHNP1原核表达载体的构建 | 第19-26页 |
| 2.2 考马斯亮蓝染色及Western-blot检测preproHNP1和proHNP1蛋白的表达效率 | 第26-28页 |
| 2.3 preproHNP1蛋白的纯化 | 第28-33页 |
| 2.4 纯化的preproHNP1抑菌活性检测 | 第33-34页 |
| 2.5 IPTG诱导后检测细菌的生长状态 | 第34页 |
| 2.6 质谱鉴定前体及成熟HNP1 | 第34-35页 |
| 2.7 糖蛋白染色检测HNP1的糖基化修饰 | 第35页 |
| 2.8 Red同源重组技术敲除大肠杆菌糖基化相关基因wecA | 第35-39页 |
| 3 实验结果 | 第39-56页 |
| 3.1 pET-28a(+)-preproHNP1、pET-28a(+)-proHNP1和pGEX-4T-3-preproHNP1重组质粒构建成功 | 第39-44页 |
| 3.2 preproHNP1和proHNP1在BL21(DE3)菌株中表达效率的比较 | 第44-46页 |
| 3.3 preproHNP1包涵体蛋白的纯化结果 | 第46-49页 |
| 3.4 纯化的preproHNP1无明显抑菌效果 | 第49页 |
| 3.5 IPTG诱导后细菌生长状态的变化 | 第49-51页 |
| 3.6 质谱鉴定到前体及成熟HNP1 | 第51-52页 |
| 3.7 糖蛋白染色结果 | 第52-54页 |
| 3.8 Red重组系统构建结果 | 第54-56页 |
| 4 讨论 | 第56-61页 |
| 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-65页 |
| 综述 | 第65-75页 |
| 参考文献 | 第71-75页 |
| 硕士期间发表论文情况说明 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
