| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 缩略语表 | 第11-12页 |
| 第一章 黄单胞菌中新型激发子的验证 | 第12-47页 |
| 1 前言 | 第12-20页 |
| 1.1 水稻黄单胞菌概述 | 第12-13页 |
| 1.2 水稻黄单胞菌的致病因子 | 第13-15页 |
| 1.3 Ⅲ型分泌系统激发子 | 第15-16页 |
| 1.4 其他分泌系统激发子 | 第16页 |
| 1.5 植物的免疫反应 | 第16-19页 |
| 1.5.1 PTI | 第17-18页 |
| 1.5.2 ETI | 第18-19页 |
| 1.6 本研究的目的及意义 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-28页 |
| 2.1.1 菌株及质粒 | 第20-25页 |
| 2.1.2 培养基与培养条件 | 第25页 |
| 2.1.3 试剂 | 第25-28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-34页 |
| 2.2.1 黄单胞菌总DNA的抽提 | 第28页 |
| 2.2.2 大肠杆菌质粒的抽提 | 第28-29页 |
| 2.2.3 DNA的体外重组 | 第29页 |
| 2.2.4 大肠杆菌的CaCl_2转化 | 第29-30页 |
| 2.2.5 黄单胞菌总DNA的抽提 | 第30页 |
| 2.2.6 PCR扩增 | 第30页 |
| 2.2.7 目标DNA片段回收 | 第30-31页 |
| 2.2.8 大肠杆菌的常规转化 | 第31页 |
| 2.2.9 根癌农杆菌感受态的制备 | 第31-32页 |
| 2.2.10 黄单胞菌电转化感受态细胞的制备 | 第32页 |
| 2.2.11 黄单胞菌电转化 | 第32-33页 |
| 2.2.12 植物PTI表达检测方法 | 第33-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-43页 |
| 3.1 PXO99A基因组中effector的预测 | 第34-36页 |
| 3.2 重组根癌农杆菌的构建 | 第36-37页 |
| 3.3 部分潜在激发子基因同框缺失 | 第37-38页 |
| 3.4 潜在激发子引起植物PTI相关表型的检测 | 第38-43页 |
| 3.4.1 HR反应的检测 | 第38页 |
| 3.4.2 H_2O_2产生的检测 | 第38-40页 |
| 3.4.3 胼胝质产生的检测 | 第40-41页 |
| 3.4.4 PTI标志基因表达的检测 | 第41-43页 |
| 4 讨论 | 第43-46页 |
| 4.1 激发子的预测软件及准确性 | 第43页 |
| 4.2 激发子基因的敲除及其致病性 | 第43-44页 |
| 4.3 激发子的生物学活性检测 | 第44-46页 |
| 5 结论 | 第46-47页 |
| 第二章 来自苏云金芽胞杆菌YBT1520中激发子NEL蛋白的功能验证 | 第47-68页 |
| 1 | 第47-51页 |
| 1.1 苏云金芽胞杆菌简介 | 第47-48页 |
| 1.2 NLPs研究进展 | 第48-49页 |
| 1.3 Ricin研究进展 | 第49-50页 |
| 1.4 研究目的与意义 | 第50-51页 |
| 2 材料与方法 | 第51-54页 |
| 2.1 实验材料 | 第51-52页 |
| 2.1.1 菌株及质粒 | 第51-52页 |
| 2.2 实验方法 | 第52-54页 |
| 2.2.1 苏云金芽胞杆菌总DNA的抽提 | 第52页 |
| 2.2.2 蛋白质组提取方法 | 第52-53页 |
| 2.2.3 培养基 | 第53页 |
| 2.2.4 其他试剂及实验方法见第一章 | 第53-54页 |
| 3 结果与分析 | 第54-66页 |
| 3.1 NEL的生物信息学分析 | 第54-55页 |
| 3.2 NEL能引起模式植物的超敏反应 | 第55-60页 |
| 3.2.1 NEL的克隆表达 | 第55-56页 |
| 3.2.2 NEL引起植物PTI相关表型的检测 | 第56-58页 |
| 3.2.3 NEL能引起多种拟南芥突变体产生超敏反应 | 第58-59页 |
| 3.2.4 PTI反应标志基因的检测 | 第59-60页 |
| 3.3 NEL对秀丽小杆线虫的活性检测 | 第60-64页 |
| 3.3.1 NEL的克隆表达 | 第60-62页 |
| 3.3.2 NEL对秀丽小杆线虫N_2有抑制生长作用 | 第62页 |
| 3.3.3 秀丽小杆线虫糖脂突变体bre-5对NEL有抗性 | 第62-63页 |
| 3.3.4 NEL对秀丽小杆线虫的生物活性高于npp1和Ricin B | 第63-64页 |
| 3.4 Ricin B具有凝集素功能 | 第64-65页 |
| 3.5 NEL处理线虫后的免疫相关蛋白质组研究 | 第65-66页 |
| 3.5.1 线虫蛋白质组样品的提取 | 第65-66页 |
| 3.5.2 蛋白质组的数据分析 | 第66页 |
| 4 结论与讨论 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-73页 |
| 附录 | 第73-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
