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拟南芥新基因At234的克隆及其在非生物与生物胁迫中的功能分析

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
1 综述第11-21页
    1.1 背景第11-12页
    1.2 几种常见的植物病原菌与植物互作的研究现状第12-17页
        1.2.1 大丽轮枝菌第12-13页
        1.2.2 灰葡萄孢菌第13-14页
        1.2.3 茄病镰刀菌第14页
        1.2.4 大豆核盘菌第14-15页
        1.2.5 小麦赤霉孢菌第15-16页
        1.2.6 植物病原菌互作机制第16-17页
    1.3 拟南芥第17-18页
    1.4 拟南芥RNAi突变体库研究第18-19页
    1.5 生物胁迫和非生物胁迫瓶内互作体系第19-21页
2 材料和方法第21-34页
    2.1 拟南芥RNAi突变体库筛选耐极限高温突变体单株第21-26页
        2.1.1 实验材料第21页
            2.1.1.2 植物材料第21页
            2.1.1.3 工程菌株、试剂和培养基第21页
        2.1.2 实验仪器第21-22页
        2.1.3 实验方法第22-25页
            2.1.3.1 构建RNAi重组质粒库第22页
            2.1.3.2 构建RNAi突变体库第22页
            2.1.3.3 拟南芥T0代种子筛选第22-23页
            2.1.3.4 阳性苗鉴定第23页
            2.1.3.5 耐受极限高温拟南芥RNAi突变体的筛选第23-24页
            2.1.3.6 拟南芥耐极端高温目的基因的克隆第24-25页
        2.1.4 拟南芥表型分析第25-26页
            2.1.4.1 材料种植第26页
            2.1.4.2 高温处理植株第26页
    2.2 拟南芥突变体与棉花大丽轮枝菌互作分析第26-27页
        2.2.1 实验材料第26页
        2.2.2 实验器材第26页
        2.2.3 实验方法第26-27页
            2.2.3.1 棉花大丽轮枝菌的培养第26-27页
            2.2.3.2 拟南芥的种植第27页
            2.2.3.3 致病性检测第27页
    2.3 拟南芥突变体与玉米灰葡萄孢菌互作分析第27-28页
        2.3.1 实验材料第27页
        2.3.2 实验器材第27页
        2.3.3 实验方法第27-28页
            2.3.3.1 玉米灰葡萄孢菌的培养第27页
            2.3.3.2 拟南芥的种植第27页
            2.3.3.3 致病检测第27-28页
    2.4 拟南芥突变体与茄病镰刀菌互作分析第28页
        2.4.1 实验材料第28页
        2.4.2 实验器材第28页
        2.4.3 实验方法第28页
            2.4.3.1 茄病镰刀菌的培养第28页
            2.4.3.2 拟南芥的种植第28页
            2.4.3.3 致病检测第28页
    2.5 拟南芥突变体与大豆核盘菌互作分析第28-29页
        2.5.1 实验材料第28-29页
        2.5.2 实验器材第29页
        2.5.3 实验方法第29页
            2.5.3.1 大豆核盘菌的培养第29页
            2.5.3.2 拟南芥的种植第29页
            2.5.3.3 致病检测第29页
    2.6 拟南芥突变体与小麦赤霉孢菌互作分析第29-30页
        2.6.1 实验材料第29页
        2.6.2 实验器材第29页
        2.6.3 实验方法第29-30页
            2.6.3.1 小麦赤霉孢菌的培养第29-30页
            2.6.3.2 拟南芥的种植第30页
            2.6.3.3 致病检测第30页
    2.7 DAB和台盼蓝双染色致病性检测第30-31页
        2.7.1 溶液配制第30页
        2.7.2 实验方法第30-31页
        2.7.3 镜检第31页
    2.8 拟南芥突变体植株非生物胁迫基因功能分析第31-34页
        2.8.1 重金属盐氯化镉胁迫第31页
            2.8.1.1 实验材料第31页
            2.8.1.2 实验方法第31页
        2.8.2 重金属盐硝酸铅胁迫第31-32页
            2.8.2.1 实验材料第31-32页
            2.8.2.2 实验方法第32页
        2.8.3 人工模拟干旱胁迫第32页
            2.8.3.1 实验材料第32页
            2.8.3.2 实验方法第32页
        2.8.4 氯化钠高盐胁迫第32-34页
            2.8.4.1 实验材料第32页
            2.8.4.2 实验方法第32-34页
3 结果分析第34-49页
    3.1 拟南芥RNAi突变体库阳性苗的筛选与检测第34-35页
        3.1.1 阳性苗筛选第34页
        3.1.2 GUS染色鉴定第34-35页
    3.2 拟南芥耐极端高温RNAi突变体的筛选第35-36页
        3.2.1 拟南芥RNAi突变体阳性苗筛选第35页
        3.2.2 拟南芥RNAi突变体GUS染色鉴定第35-36页
    3.3 拟南芥耐极端高温目的基因的克隆第36-37页
        3.3.1 PCR检测第36页
        3.3.2 目的基因菌液PCR检测第36-37页
        3.3.3 拟南芥耐极端高温RNAi突变体目的基因的克隆第37页
    3.4 拟南芥RNAi突变体at234植株表型分析第37-38页
    3.5 拟南芥RNAi突变体at234植株与棉花大丽轮枝菌互作分析第38-40页
    3.6 拟南芥RNAi突变体at234植株与玉米灰葡萄孢菌互作分析第40-41页
    3.7 拟南芥RNAi突变体at234植株与茄病镰刀菌互作分析第41-43页
    3.8 拟南芥RNAi突变体at234植株与大豆核盘菌互作分析第43-44页
    3.9 拟南芥RNAi突变体at234植株与小麦赤霉孢菌互作分析第44-45页
    3.10 非生物胁迫下基因功能验证和at234突变体植株表型分析第45-49页
        3.10.1 重金属盐氯化镉胁迫第45-46页
        3.10.2 重金属盐硝酸铅胁迫第46-47页
        3.10.3 人为模拟干旱胁迫第47页
        3.10.4 氯化钠高盐胁迫第47-49页
4 结果与讨论第49-51页
5 展望第51-52页
参考文献第52-60页
个人简介第60-61页
致谢第61页

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