摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
英文缩略表 | 第10-11页 |
第一章 引言 | 第11-17页 |
1.1 口蹄疫病毒概述 | 第11页 |
1.2 自噬 | 第11-14页 |
1.2.1 自噬概述 | 第11-14页 |
1.2.2 FMDV与自噬的研究进展 | 第14页 |
1.3 天然免疫 | 第14-16页 |
1.3.1 天然免疫概述 | 第14-15页 |
1.3.2 FMDV与天然免疫的研究进展 | 第15-16页 |
1.4 自噬和天然免疫关系的研究进展 | 第16页 |
1.5 研究目的及意义 | 第16-17页 |
第二章 FMDV感染诱导PK-15细胞发生自噬 | 第17-23页 |
2.1 材料与方法 | 第17-19页 |
2.1.1 病毒、细胞系及抗体 | 第17页 |
2.1.2 主要生物学试剂 | 第17-18页 |
2.1.3 仪器和设备 | 第18页 |
2.1.4 病毒感染 | 第18页 |
2.1.5 Western blot检测 | 第18-19页 |
2.1.6 激光共聚焦扫描显微镜观察 | 第19页 |
2.1.7 灰度值分析和统计学分析 | 第19页 |
2.2 结果 | 第19-21页 |
2.2.1 FMDV感染PK-15细胞后激活LC3和ATG5-ATG12 | 第19-20页 |
2.2.2 FMDV感染PK-15细胞后引起LC3聚集 | 第20-21页 |
2.3 讨论 | 第21-23页 |
第三章 ATG5-ATG12促进FMDV诱导的I型干扰素信号通路的激活 | 第23-39页 |
3.1 材料与方法 | 第23-29页 |
3.1.1 病毒、菌种、细胞系、表达载体、siRNA及抗体 | 第23页 |
3.1.2 主要生物学试剂 | 第23-24页 |
3.1.3 仪器和设备 | 第24页 |
3.1.4 引物设计 | 第24页 |
3.1.5 真核表达质粒的构建 | 第24-27页 |
3.1.6 转染、干扰试验及接毒试验 | 第27-28页 |
3.1.7 Western blot检测 | 第28页 |
3.1.8 实时荧光定量PCR(SYBR? Green法)检测 | 第28-29页 |
3.1.9 TCID50试验 | 第29页 |
3.1.10 间接免疫荧光试验(Indirect luorescence assay,IFA) | 第29页 |
3.2 结果 | 第29-37页 |
3.2.1 重组质粒pXJ-ATG5和pXJ-ATG12的构建及其验证表达 | 第29-31页 |
3.2.2 过表达ATG5-ATG12抑制FMDV在PK-15细胞中的复制 | 第31-32页 |
3.2.3 过表达ATG5-ATG12上调IFN-β及细胞因子 | 第32-33页 |
3.2.4 过表达ATG5-ATG12促进FMDV诱导的IFN-β信号通路的激活 | 第33-34页 |
3.2.5 ATG5-ATG12 siRNA干扰效率的探索 | 第34页 |
3.2.6 下调表达ATG5-ATG12促进FMDV在PK-15细胞中的复制 | 第34-35页 |
3.2.7 下调表达ATG5-ATG12抑制IFN-β及细胞因子的表达 | 第35-36页 |
3.2.8 下调表达ATG5-ATG12抑制FMDV诱导的IFN-β信号通路的激活 | 第36页 |
3.2.9 ATG5-ATG12的抗病毒作用在其他细胞系上的验证 | 第36-37页 |
3.3 讨论 | 第37-39页 |
第四章 全文结论 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-43页 |
致谢 | 第43-44页 |
作者简历 | 第44页 |