| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-22页 |
| 1.1 百合及病毒防治 | 第11-16页 |
| 1.1.1 百合概述 | 第11页 |
| 1.1.2 百合病毒的危害 | 第11-12页 |
| 1.1.3 百合病毒的检测 | 第12-13页 |
| 1.1.4 百合病毒的防治 | 第13-16页 |
| 1.2 百合无症病毒概述 | 第16-18页 |
| 1.2.1 百合无症病毒编码蛋白结构及功能 | 第16-17页 |
| 1.2.2 16kDa,TGB1蛋白研究进展 | 第17-18页 |
| 1.3 RNA沉默抑制子概述 | 第18-21页 |
| 1.3.1 植物病毒沉默抑制子的发现 | 第18-19页 |
| 1.3.2 沉默抑制子作用机制 | 第19页 |
| 1.3.3 沉默抑制子的鉴定法 | 第19-20页 |
| 1.3.4 沉默抑制子研究进展 | 第20页 |
| 1.3.5 细胞定位 | 第20-21页 |
| 1.4 研究目的、意义及内容 | 第21-22页 |
| 1.4.1 研究目的、意义 | 第21页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第21-22页 |
| 2 百合无症病毒16kDa蛋白原核表达及纯化 | 第22-39页 |
| 2.1 实验材料与试剂 | 第22-24页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第22页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第22-24页 |
| 2.2 实验仪器 | 第24-25页 |
| 2.3 实验方法 | 第25-31页 |
| 2.3.1 原核表达载体pET28a-16kDa的构建 | 第25-28页 |
| 2.3.2 融合蛋白的诱导表达及SDS-PAGE检测 | 第28-29页 |
| 2.3.3 融合蛋白的Western blot检测 | 第29-30页 |
| 2.3.4 融合蛋白16kDa质谱分析 | 第30页 |
| 2.3.5 融合蛋白的纯化 | 第30-31页 |
| 2.3.6 纯化蛋白浓度的测定 | 第31页 |
| 2.4 实验结果与分析 | 第31-37页 |
| 2.4.1 原核表达载体pET28a-16kDa的构建 | 第31-33页 |
| 2.4.2 融合蛋白的诱导表达及SDS-PAGE电泳检测 | 第33-34页 |
| 2.4.3 融合蛋白的Western blot检测 | 第34页 |
| 2.4.4 融合蛋白16kDa质谱分析 | 第34-36页 |
| 2.4.5 融合蛋白的纯化 | 第36页 |
| 2.4.6 纯化蛋白浓度的测定 | 第36-37页 |
| 2.5 讨论 | 第37-38页 |
| 2.6 小结 | 第38-39页 |
| 3 百合无症病毒16kDa,TGB1蛋白抗血清制备及检测 | 第39-46页 |
| 3.1 实验材料与试剂 | 第39页 |
| 3.2 实验仪器 | 第39页 |
| 3.3 实验方法 | 第39-41页 |
| 3.3.1 16 kDa,TGB1抗血清制备及抗血清效价测定 | 第39-41页 |
| 3.3.2 Western blot检测 | 第41页 |
| 3.3.3 百合无症病毒检测 | 第41页 |
| 3.4 实验结果与分析 | 第41-44页 |
| 3.4.1 16 kDa,TGB1抗血清制备及抗血清效价测定 | 第41-42页 |
| 3.4.2 Western blot检测 | 第42-43页 |
| 3.4.3 百合无症病毒检测 | 第43-44页 |
| 3.5 讨论 | 第44-45页 |
| 3.6 小结 | 第45-46页 |
| 4 百合无症病毒16kDa,TGB1沉默抑制子的鉴定与研究 | 第46-68页 |
| 4.1 实验材料与试剂 | 第46页 |
| 4.2 实验仪器 | 第46-47页 |
| 4.3 实验方法 | 第47-52页 |
| 4.3.1 重组载体构建 | 第47-48页 |
| 4.3.2 农杆菌浸润接种及鉴定 | 第48页 |
| 4.3.3 实时定量PCR检测 | 第48-50页 |
| 4.3.4 Western blot分析 | 第50-51页 |
| 4.3.5 细胞定位 | 第51-52页 |
| 4.4 实验结果与分析 | 第52-65页 |
| 4.4.1 重组载体构建 | 第52-57页 |
| 4.4.2 RNA沉默抑制子的鉴定 | 第57-62页 |
| 4.4.3 细胞定位 | 第62-65页 |
| 4.5 讨论 | 第65-67页 |
| 4.6 小结 | 第67-68页 |
| 5 结论与展望 | 第68-70页 |
| 5.1 结论 | 第68页 |
| 5.2 展望 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-76页 |
| 附录A 论文病毒序列 | 第76-78页 |
| 附录B 质粒图谱及实验所用Marker | 第78-81页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
