提高11家族木聚糖酶嗜碱性的分子改造
| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 英文缩写与简称 | 第8-11页 |
| 1. 引言 | 第11-21页 |
| 1.1 木聚糖酶 | 第11页 |
| 1.1.1 木聚糖 | 第11页 |
| 1.1.2 木聚糖酶及其分类 | 第11页 |
| 1.2 木聚糖酶的应用 | 第11-14页 |
| 1.2.1 木聚糖酶在动物饲料中的应用 | 第12页 |
| 1.2.2 木聚糖酶在食品工业中的应用 | 第12-13页 |
| 1.2.3 木聚糖酶在造纸工业中的应用 | 第13-14页 |
| 1.3 木聚糖酶的分子改造 | 第14-19页 |
| 1.3.1 蛋白质的分子改造 | 第14-19页 |
| 1.3.2 提高木聚糖酶嗜碱性的分子改造 | 第19页 |
| 1.4 本研究的前期工作基础及目的意义 | 第19-21页 |
| 1.4.1 本研究的前期工作基础 | 第19页 |
| 1.4.2 本研究的目的意义 | 第19-21页 |
| 2. 实验材料与方法 | 第21-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-23页 |
| 2.1.1 菌种和载体 | 第21页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第21-22页 |
| 2.1.3 酶及主要试剂 | 第22页 |
| 2.1.4 培养基和溶液 | 第22-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-35页 |
| 2.2.1 菌种的活化和培养 | 第23页 |
| 2.2.2 质粒的提取和DNA产物的纯化 | 第23-24页 |
| 2.2.3DNA浓度和纯度的测定 | 第24页 |
| 2.2.4 电转感受态细胞的制备 | 第24页 |
| 2.2.5 电转化 | 第24页 |
| 2.2.6 随机突变文库的建立 | 第24-29页 |
| 2.2.7 随机突变文库的筛选 | 第29-30页 |
| 2.2.8 突变体的表达和纯化 | 第30-31页 |
| 2.2.9 蛋白浓度和纯度的测定 | 第31页 |
| 2.2.10 木聚糖酶酶活性的测定 | 第31页 |
| 2.2.11 野生型酶和突变体的酶学表征 | 第31-32页 |
| 2.2.12 突变体的结构模拟与分析 | 第32页 |
| 2.2.13 定点突变 | 第32-35页 |
| 3. 结果与分析 | 第35-47页 |
| 3.1 随机突变文库的建立 | 第35-36页 |
| 3.2 随机突变文库的筛选 | 第36页 |
| 3.3 蛋白的纯化 | 第36-37页 |
| 3.4 突变体的酶学表征 | 第37-38页 |
| 3.5 突变体的位点验证 | 第38-41页 |
| 3.6 蛋白结构模拟 | 第41-42页 |
| 3.7 定点突变及其对酶活的影响 | 第42-47页 |
| 4. 讨论 | 第47-49页 |
| 4.1 突变文库的建立筛选及突变位点鉴定 | 第47页 |
| 4.2 定点突变的选择及影响 | 第47-49页 |
| 5. 结论 | 第49-51页 |
| 致谢 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 攻读硕士期间发表论文 | 第59页 |
