中文摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
英文缩略词 | 第6-12页 |
第一章 前言 | 第12-23页 |
1.1 多糖与糖蛋白 | 第12页 |
1.1.1 多糖与糖蛋白的定义 | 第12页 |
1.1.2 生物学功能 | 第12页 |
1.2 多酚类化合物 | 第12-14页 |
1.2.1 多酚类化合物的定义和结构 | 第12-13页 |
1.2.2 多酚类化合物的分类 | 第13页 |
1.2.3 谷物中多酚类化合物的研究进展 | 第13-14页 |
1.3 自由基 | 第14-16页 |
1.3.1 自由基的概念及产生 | 第14页 |
1.3.2 机体内自由基的不同类型 | 第14页 |
1.3.3 自由基对机体的影响 | 第14-15页 |
1.3.4 自由基的清除 | 第15-16页 |
1.4 衰老 | 第16-18页 |
1.4.1 衰老的概念及分类 | 第16页 |
1.4.2 衰老的原因 | 第16-17页 |
1.4.3 衰老的自由基理论 | 第17-18页 |
1.4.4 饮食对寿命的影响 | 第18页 |
1.5 模式生物秀丽线虫(C. elegans) | 第18-19页 |
1.5.1 秀丽线虫的优势 | 第18-19页 |
1.5.2 信号通路的保守性 | 第19页 |
1.6 影响C. elegans寿命的主要途径 | 第19-22页 |
1.6.1 胰岛素信号通路 | 第19-20页 |
1.6.2 雷帕霉素靶蛋白信号通路 | 第20-21页 |
1.6.3 热量限制途径 | 第21页 |
1.6.4 调控寿命通路的作用机制 | 第21-22页 |
1.7 本论文研究的意义及创新点 | 第22-23页 |
第二章 DFG制备及主要成分探究 | 第23-32页 |
2.1 引言 | 第23页 |
2.2 主要实验材料、试剂与仪器 | 第23-24页 |
2.2.1 实验材料 | 第23页 |
2.2.2 主要仪器 | 第23页 |
2.2.3 主要试剂 | 第23-24页 |
2.3 实验方法 | 第24-27页 |
2.3.1 相关溶液配制 | 第24页 |
2.3.2 DFG样品的制备及纯化 | 第24页 |
2.3.3 DFG样品平均分子量的测定 | 第24-25页 |
2.3.4 DFG总糖含量测定 | 第25页 |
2.3.5 DFG还原糖含量测定 | 第25-26页 |
2.3.6 气相色谱检测单糖组成 | 第26页 |
2.3.7 NMR核磁共振解析 | 第26页 |
2.3.8 Folin-Ciocalteu法测定DFG多酚的含量 | 第26-27页 |
2.3.9 DFG元素分析 | 第27页 |
2.3.10 FT-IR红外光谱解析 | 第27页 |
2.4 实验结果与讨论 | 第27-31页 |
2.4.1 DEAE-52离子交换层析纯化DFG | 第27-28页 |
2.4.2 DFG分子量分布测定 | 第28-29页 |
2.4.3 DFG单糖组成测定 | 第29页 |
2.4.4 DFG核磁检测结果 | 第29-30页 |
2.4.5 DFG红外光谱检测 | 第30-31页 |
2.5 本章小结 | 第31-32页 |
第三章 DFG抗氧化活性研究 | 第32-38页 |
3.1 引言 | 第32页 |
3.2 主要实验材料、试剂与仪器 | 第32-33页 |
3.2.1 实验材料 | 第32页 |
3.2.2 主要仪器 | 第32页 |
3.2.3 主要试剂 | 第32-33页 |
3.3 实验方法 | 第33-34页 |
3.3.1 相关溶液配制 | 第33页 |
3.3.2 DFG清除DPPH自由基能力测定 | 第33-34页 |
3.3.3 DFG总抗氧化能力测定 | 第34页 |
3.3.4 B16黑色素瘤细胞培养 | 第34页 |
3.3.5 DFG对B16细胞氧化损伤修复作用的测定 | 第34页 |
3.4 实验结果与讨论 | 第34-37页 |
3.4.1 DFG清除DPPH自由基能力检测 | 第34-35页 |
3.4.2 DFG总抗氧化能力的检测 | 第35-36页 |
3.4.3 DFG细胞内抗氧化能力的测定 | 第36-37页 |
3.5 本章小结 | 第37-38页 |
第四章 DFG对线虫ROS的清除及寿命的影响 | 第38-44页 |
4.1 引言 | 第38页 |
4.2 实验材料试剂与仪器 | 第38-39页 |
4.2.1 实验材料 | 第38页 |
4.2.2 主要仪器 | 第38页 |
4.2.3 实验试剂 | 第38-39页 |
4.3 实验方法 | 第39-41页 |
4.3.1 培养基及溶液配制 | 第39-40页 |
4.3.2 平板以及线虫食物的准备 | 第40页 |
4.3.3 线虫培养以及同期化 | 第40页 |
4.3.4 H2-DCF-DA法检测线虫体内的ROS | 第40页 |
4.3.5 DFG对线虫寿命的影响 | 第40-41页 |
4.4 结果和讨论 | 第41-43页 |
4.4.1 DFG清除线虫体内ROS的研究 | 第41页 |
4.4.2 DFG延长野生型线虫寿命的研究 | 第41-43页 |
4.5 本章小结 | 第43-44页 |
第五章 DFG对daf-16因子的影响 | 第44-50页 |
5.1 引言 | 第44页 |
5.2 主要实验材料、试剂与仪器 | 第44-45页 |
5.2.1 实验材料 | 第44页 |
5.2.2 主要仪器 | 第44-45页 |
5.2.3 实验试剂 | 第45页 |
5.3 实验方法 | 第45-46页 |
5.3.1 线虫,菌株和培养条件 | 第45页 |
5.3.2 DFG对突变体线虫寿命的影响 | 第45-46页 |
5.3.3 DAF-16::GFP细胞内分布情况的测定 | 第46页 |
5.3.4 SOD-3::GFP表达量的测定 | 第46页 |
5.4 结果和讨论 | 第46-49页 |
5.4.1 DFG对daf-16缺失突变体线虫寿命的影响 | 第46-47页 |
5.4.2 DFG对DAF-16细胞核定位的影响 | 第47-48页 |
5.4.3 DFG对DAF-16的转录活性的影响 | 第48-49页 |
5.5 本章小结 | 第49-50页 |
第六章 DFG对sir-2.1 因子的影响 | 第50-57页 |
6.1 引言 | 第50页 |
6.2 实验材料和方法 | 第50-51页 |
6.2.1 实验材料 | 第50页 |
6.2.2 主要仪器 | 第50-51页 |
6.2.3 实验试剂 | 第51页 |
6.3 实验方法 | 第51-53页 |
6.3.1 线虫,菌株和培养条件 | 第51页 |
6.3.2 DFG对突变体线虫寿命的影响 | 第51-52页 |
6.3.3 Trizol法提取线虫总RNA | 第52页 |
6.3.4 Real time qPCR | 第52-53页 |
6.4 结果和讨论 | 第53-55页 |
6.4.1 DFG对sir-2.1 缺失突变体线虫寿命的影响 | 第53-54页 |
6.4.2 DFG对SIR-2.1 去乙酰基酶活性的影响 | 第54-55页 |
6.4.3 DFG对sir-2.1 因子表达量的影响 | 第55页 |
6.5 本章小结 | 第55-57页 |
第七章 总结与展望 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-61页 |
致谢 | 第61页 |