| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略语说明 | 第10-12页 |
| 前言 | 第12-16页 |
| 研究现状 | 第12-14页 |
| 研究目的、方法 | 第14-16页 |
| 一、PIWIL1shRNA真核表达载体的构建及表达 | 第16-34页 |
| 1.1 材料和方法 | 第16-27页 |
| 1.1.1 研究对象 | 第16页 |
| 1.1.2 主要试剂及配制 | 第16-18页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第18页 |
| 1.1.4 实验方法 | 第18-27页 |
| 1.2 结果 | 第27-30页 |
| 1.2.1 提取总RNA质量鉴定 | 第27页 |
| 1.2.2 Real-time PCR检测PIWI基因家族在结肠癌SW620细胞中的差异表达 | 第27-28页 |
| 1.2.3 PIWIL1shRNA退火鉴定 | 第28页 |
| 1.2.4 重组质粒pSilencer2.1/PIWIL1-shRNA酶切鉴定结果 | 第28-29页 |
| 1.2.5 pSilencer2.1/PIWIL1-shRNA对PIWIL1白表达的影响 | 第29-30页 |
| 1.3 讨论 | 第30-32页 |
| 1.3.1 RNA干扰现象 | 第30-31页 |
| 1.3.2 PIWI参与RNA干扰作用 | 第31页 |
| 1.3.3 shRNA介导的RNA干扰 | 第31-32页 |
| 1.4 小结 | 第32-34页 |
| 二、PIWIL1沉默对结肠癌SW620细胞功能的影响 | 第34-47页 |
| 2.1 材料和方法 | 第34-38页 |
| 2.1.1 研究对象 | 第34页 |
| 2.1.2 主要试剂及配制 | 第34页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第34-35页 |
| 2.1.4 实验方法 | 第35-38页 |
| 2.2 实验结果 | 第38-43页 |
| 2.2.1 pSilencer2.1/PIWIL1-shRNA对SW620细胞增殖活性的影响 | 第38-39页 |
| 2.2.2 pSilencer2.1/PIWILl-shRNA对SW620细胞克隆集落形成能力的影响 | 第39页 |
| 2.2.3 细胞聚集实验结果 | 第39-40页 |
| 2.2.4 体外划痕实验分析PIWIL1静默对细胞移动能力影响 | 第40-42页 |
| 2.2.5 pSilencer2.1/PIWIL1-shRNA使SW620细胞侵袭转移能力减弱 | 第42-43页 |
| 2.3 讨论 | 第43-46页 |
| 2.3.1 PIWIL1基因沉默抑制结肠癌细胞增殖 | 第43-44页 |
| 2.3.2 PIWIL1基因沉默增加SW620细胞粘附力抑制其细胞运动侵袭 | 第44-46页 |
| 2.4 小结 | 第46-47页 |
| 三、PIWIL1因沉默后对结肠癌细胞SW620化疗药物敏感性的影响 | 第47-53页 |
| 3.1 材料和方法 | 第47-49页 |
| 3.1.1 研究对象 | 第47页 |
| 3.1.2 主要试剂及配制 | 第47页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第47-48页 |
| 3.1.4 实验方法 | 第48-49页 |
| 3.2 实验结果 | 第49-51页 |
| 3.2.1 PIWIL1表达下调对结肠癌SW620细胞的5-Fu化疗增敏作用 | 第49-50页 |
| 3.2.2 同一浓度的5-Fu对细胞杀伤作用的动态观察 | 第50-51页 |
| 3.3 讨论 | 第51-52页 |
| 3.4 小结 | 第52-53页 |
| 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第60-61页 |
| 综述 | 第61-69页 |
| 综述参考文献 | 第66-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
