摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6页 |
第1章 文献综述 | 第10-24页 |
1.1 鹅细小病毒流行现状 | 第10-11页 |
1.2 鹅细小病毒的特性 | 第11-17页 |
1.2.1 GPV形态结构和理化特性 | 第11页 |
1.2.2 宿主范围和培养特性 | 第11-12页 |
1.2.3 临床症状及病理特性 | 第12-13页 |
1.2.4 GPV的基因结构 | 第13-15页 |
1.2.5 GPV编码蛋白及功能 | 第15-17页 |
1.3 鹅细小病毒诊断方法的研究进展 | 第17-22页 |
1.3.1 病原学诊断 | 第17-18页 |
1.3.2 分子生物学诊断 | 第18-19页 |
1.3.3 血清学诊断 | 第19-22页 |
1.4 鹅细小病毒病的防治 | 第22-23页 |
1.5 本研究的目的和意义 | 第23-24页 |
第2章 鹅细小病毒VP3蛋白的原核表达 | 第24-33页 |
2.1 材料与试剂 | 第24-27页 |
2.1.1 菌种和载体 | 第24页 |
2.1.2 酶和试剂 | 第24页 |
2.1.3 各种溶液及培养基 | 第24-26页 |
2.1.4 主要仪器 | 第26-27页 |
2.2 方法 | 第27-30页 |
2.2.1 鹅细小病毒的分离鉴定 | 第27页 |
2.2.2 鹅细小病毒VP3蛋白的原核表达 | 第27-30页 |
2.3 结果 | 第30-32页 |
2.3.1 鹅细小病毒的分离鉴定 | 第30页 |
2.3.2 原核表达载体pET32a-VP3的构建 | 第30-31页 |
2.3.3 目的蛋白的表达 | 第31-32页 |
2.4 讨论 | 第32-33页 |
第3章 鹅细小病毒VP3蛋白的纯化与鉴定 | 第33-37页 |
3.1 材料 | 第33页 |
3.1.1 酶和试剂 | 第33页 |
3.1.2 各种溶液 | 第33页 |
3.1.3 主要仪器 | 第33页 |
3.2 方法 | 第33-35页 |
3.2.1 VP3蛋白包涵体的提取 | 第33-34页 |
3.2.2 包涵体粗纯化 | 第34页 |
3.2.3 VP3蛋白N i柱亲和层析 | 第34页 |
3.2.4 重组VP3蛋白Western-blot分析 | 第34-35页 |
3.3 结果 | 第35-36页 |
3.3.1 包涵体粗纯化 | 第35页 |
3.3.2 VP3蛋白N i柱亲和层析 | 第35-36页 |
3.3.3 重组VP3蛋白Western-blot分析 | 第36页 |
3.4 讨论 | 第36-37页 |
第4章 间接ELISA方法的建立及评价 | 第37-48页 |
4.1 材料 | 第37页 |
4.1.1 病毒和血清 | 第37页 |
4.1.2 试剂及溶液 | 第37页 |
4.1.3 主要设备 | 第37页 |
4.2 方法 | 第37-40页 |
4.2.1 间接ELISA方法步骤 | 第37-38页 |
4.2.2 间接ELISA方法条件的优化 | 第38-39页 |
4.2.3 间接ELISA方法的评价 | 第39-40页 |
4.2.4 血清样品的检测 | 第40页 |
4.3 结果 | 第40-46页 |
4.3.1 间接ELISA方法的建立 | 第40-42页 |
4.3.2 临界值的确定 | 第42-43页 |
4.3.3 特异性试验 | 第43-44页 |
4.3.4 敏感性试验 | 第44-45页 |
4.3.5 重复性试验 | 第45-46页 |
4.3.6 间接ELISA方法敏感性与符合率试验 | 第46页 |
4.4 讨论 | 第46-48页 |
结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
攻读学位期间取得的科研成果 | 第59页 |