| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 符号说明 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-26页 |
| 1.1 副结核分枝杆菌的研究背景 | 第12-17页 |
| 1.1.1 副结核分枝杆菌的感染方式 | 第12-13页 |
| 1.1.2 副结核分枝杆菌对环境的危害 | 第13页 |
| 1.1.3 副结核分枝杆菌与克罗恩病的关系 | 第13页 |
| 1.1.4 副结核分枝杆菌感染 | 第13-14页 |
| 1.1.5 幼畜易感MAP | 第14页 |
| 1.1.6 肠道感染方法 | 第14-15页 |
| 1.1.7 抵抗MAP感染常用疫苗 | 第15-16页 |
| 1.1.8 副结核分枝杆菌感染后引起的T、B淋巴细胞反应 | 第16页 |
| 1.1.9 副结核分枝杆菌引起的细胞因子反应 | 第16-17页 |
| 1.2 表面展示系统的研究背景 | 第17-22页 |
| 1.2.1 载体蛋白 | 第18页 |
| 1.2.2 目的蛋白 | 第18页 |
| 1.2.3 宿主菌 | 第18-19页 |
| 1.2.4 表面展示在革兰氏阴性细菌中发展 | 第19-20页 |
| 1.2.5 表面展示系统在革兰氏阳性细菌中的发展 | 第20-21页 |
| 1.2.6 表面展示系统的应用 | 第21-22页 |
| 1.3 冰核蛋白的研究背景 | 第22-23页 |
| 1.4 MAP3061c的研究背景 | 第23-24页 |
| 1.5 本研究的目的与意义 | 第24-26页 |
| 第二章 副结核分枝杆菌MAP3061c蛋白表面展示载体的构建 | 第26-40页 |
| 2.1 材料 | 第26-27页 |
| 2.1.1 菌株与载体 | 第26页 |
| 2.1.2 工具酶 | 第26页 |
| 2.1.3 核酸与蛋白标准Marker | 第26页 |
| 2.1.4 试剂盒 | 第26页 |
| 2.1.5 主要试剂 | 第26-27页 |
| 2.1.6 主要仪器设备 | 第27页 |
| 2.2 方法 | 第27-33页 |
| 2.2.1 引物的设计与合成 | 第27页 |
| 2.2.2 目的基因的扩增 | 第27-28页 |
| 2.2.3 PCR产物纯化 | 第28页 |
| 2.2.4 目的基因与表达载体的酶切反应 | 第28页 |
| 2.2.5 目的基因与表达载体的连接 | 第28-29页 |
| 2.2.6 连接产物转化 | 第29页 |
| 2.2.7 质粒的小量提取 | 第29-30页 |
| 2.2.8 重组质粒的鉴定 | 第30页 |
| 2.2.9 目的基因的诱导表达 | 第30页 |
| 2.2.10 Western-blot表达与鉴定分析 | 第30-32页 |
| 2.2.11 亚细胞组分分离 | 第32页 |
| 2.2.12 诱导菌的蛋白酶K处理鉴定 | 第32-33页 |
| 2.2.13 诱导菌的斑点印迹鉴定 | 第33页 |
| 2.2.14 细菌免疫荧光 | 第33页 |
| 2.3 结果 | 第33-38页 |
| 2.3.1 重组质粒的鉴定结果 | 第33-34页 |
| 2.3.2 重组质粒的双酶切鉴定结果 | 第34页 |
| 2.3.3 重组菌表达与Western-blot鉴定分析结果 | 第34-35页 |
| 2.3.4 重组菌亚细胞组分分离鉴定结果 | 第35-36页 |
| 2.3.5 重组菌菌的蛋白酶K处理鉴定结果 | 第36-37页 |
| 2.3.6 重组菌的斑点印迹鉴定结果 | 第37-38页 |
| 2.3.7 重组菌免疫荧光鉴定结果 | 第38页 |
| 2.4 讨论 | 第38-40页 |
| 2.4.1 目的基因，载体，宿主菌的选择 | 第38-39页 |
| 2.4.2 表面展示系统的鉴定 | 第39-40页 |
| 第三章 MAP3061c 蛋白表面展示疫苗载体的免疫效力研究 | 第40-60页 |
| 3.1 材料 | 第40页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第40页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第40页 |
| 3.1.3 试剂盒 | 第40页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第40页 |
| 3.2 方法 | 第40-43页 |
| 3.2.1 副结核分枝杆菌的培养 | 第40页 |
| 3.2.2 动物的免疫及相关指标检测 | 第40-43页 |
| 3.2.3 攻毒试验及相关指标检测 | 第43页 |
| 3.3 结果 | 第43-57页 |
| 3.3.1 抗体水平检测结果 | 第43-44页 |
| 3.3.2 流式细胞计数检测结果 | 第44-45页 |
| 3.3.3 细胞因子检测结果 | 第45-53页 |
| 3.3.5 病理变化结果 | 第53-57页 |
| 3.4 讨论 | 第57-60页 |
| 3.4.1 重组展示疫苗对体液免疫的影响 | 第57页 |
| 3.4.2 重组展示疫苗对细胞免疫的影响 | 第57-58页 |
| 3.4.3 重组免疫疫苗的保护效果 | 第58-60页 |
| 第四章 结论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-74页 |
| 致谢 | 第74-76页 |
| 附录 | 第76-80页 |
| 个人简历 | 第80页 |
