| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 插图清单 | 第9-11页 |
| 附表清单 | 第11-12页 |
| 缩略词 | 第12-13页 |
| 第一章 研究背景综述 | 第13-33页 |
| 1.1 生物固氮 | 第13-14页 |
| 1.2 固氮酶的结构 | 第14-19页 |
| 1.3 固氮酶的催化机制 | 第19-31页 |
| 1.4 论文的立题依据及研究路线 | 第31-33页 |
| 第二章 材料与方法 | 第33-50页 |
| 2.1 菌株及质粒 | 第33-35页 |
| 2.2 化学药品及培养基 | 第35-36页 |
| 2.3 体外定点诱变 | 第36-38页 |
| 2.4 定点突变向基因组DNA的置换(细菌接合实验) | 第38-39页 |
| 2.5 细胞的固氮生长及细胞固氮酶活性检测 | 第39-40页 |
| 2.6 K.oxytoca菌株大规模厌氧发酵培养 | 第40-41页 |
| 2.7 RT-qPCR检测基因的相对表达量 | 第41-42页 |
| 2.8 固氮酶的提取和纯化 | 第42-47页 |
| 2.9 固氮酶催化活性的检测 | 第47-48页 |
| 2.10 静态EPR样品的制备 | 第48-50页 |
| 第三章 生物信息学分析供试菌株固氮酶突变策略 | 第50-60页 |
| 3.1 前言 | 第50-51页 |
| 3.2 结果 | 第51-59页 |
| 3.3 小结与分析 | 第59-60页 |
| 第四章 不同单一位点突变菌株的构建及其表型分析 | 第60-74页 |
| 4.1 前言 | 第60页 |
| 4.2 结果 | 第60-72页 |
| 4.3 小结与分析 | 第72-74页 |
| 第五章 Iα423P固氮酶的提纯及特征分析 | 第74-86页 |
| 5.1 前言 | 第74页 |
| 5.2 结果 | 第74-83页 |
| 5.3 小结与分析 | 第83-86页 |
| 第六章 固氮酶双位点突变菌株的构建及表型分析 | 第86-103页 |
| 6.1 前言 | 第86-87页 |
| 6.2 结果 | 第87-100页 |
| 6.3 小结与分析 | 第100-103页 |
| 第七章 A.vinelandii固氮酶电子传递通路的理论计算及验证 | 第103-127页 |
| 7.1 前言 | 第103页 |
| 7.2 结果 | 第103-123页 |
| 7.3 小结与分析 | 第123-127页 |
| 第八章 结论与展望 | 第127-136页 |
| 8.1 总结 | 第127-130页 |
| 8.2 讨论 | 第130-134页 |
| 8.3 本研究创新点 | 第134页 |
| 8.4 对下一步工作的思考及建议 | 第134-136页 |
| 参考文献 | 第136-147页 |
| 附录 | 第147-155页 |
| 致谢 | 第155-157页 |
| 作者简历 | 第157-158页 |