摘要 | 第1-7页 |
abstract | 第7-12页 |
第一章 引言 | 第12-19页 |
·不同物种的Mx 蛋白 | 第12-15页 |
·Mx 基因的命名 | 第12页 |
·其他哺乳动物Mx 蛋白的发现 | 第12页 |
·鱼类Mx 蛋白的发现 | 第12-13页 |
·禽类Mx 基因的发现 | 第13-14页 |
·软体动物或多细胞无脊椎动物中Mx 基因的发现 | 第14-15页 |
·Mx 蛋白的结构 | 第15页 |
·Mx 蛋白的诱导表达调控机理 | 第15-16页 |
·Mx 蛋白的抗病毒机理 | 第16-17页 |
·Mx 基因的研究展望 | 第17-19页 |
第二章 鸡Mx 基因的克隆及诱变修饰 | 第19-30页 |
·材料和方法 | 第19-24页 |
·脾脏组织 | 第19页 |
·载体与菌株 | 第19页 |
·主要试剂 | 第19-20页 |
·主要实验仪器 | 第20页 |
·试剂配制 | 第20页 |
·引物设计 | 第20页 |
·RNA 的提取 | 第20-21页 |
·鸡Mx 基因的RT - PCR 扩增 | 第21页 |
·Mx 基因的克隆与筛选 | 第21-23页 |
·真核表达载体的构建 | 第23页 |
·PCR 诱变修饰 | 第23-24页 |
·结果 | 第24-27页 |
·RT -PCR扩增鸡Mx 基因 | 第24-25页 |
·Mx 蛋白特征性功能结构分析 | 第25页 |
·Mx 多态性分析及筛选 | 第25-26页 |
·真核表达载体的构建 | 第26-27页 |
·PCR 诱变修饰 | 第27页 |
·讨论 | 第27-30页 |
第三章 鸡Mx 蛋白的表达及抗病毒活性检测 | 第30-45页 |
·材料与方法 | 第30-36页 |
·病毒、细胞、质粒 | 第30页 |
·主要试剂及软件 | 第30页 |
·仪器设备 | 第30-31页 |
·试剂的配制 | 第31-32页 |
·荧光定量PCR 扩增的引物 | 第32页 |
·扩毒及接种剂量的确定 | 第32页 |
·转染 | 第32-33页 |
·RT - PCR 检测鸡Mx 基因在转染MDCK 细胞中的表达 | 第33-34页 |
·免疫印迹杂交检测重组质粒转染MDCK 细胞后的表达 | 第34-35页 |
·流式细胞技术检测Mx 重组质粒转染效率 | 第35页 |
·实时荧光定量PCR 检测检测PB_2 转录基因拷贝数 | 第35-36页 |
·间接免疫荧光检测Mx 蛋白抗禽流感病毒效果 | 第36页 |
·流式细胞仪检测检测Mx 蛋白对病毒增殖的影响 | 第36页 |
·统计学分析 | 第36页 |
·结果 | 第36-43页 |
·病毒滴度测定结果 | 第36-37页 |
·RT - PCR 检测Mx 基因的表达 | 第37页 |
·Western - blot 检测 | 第37-38页 |
·FCM 检测 | 第38页 |
·Real -timePCR 检测鸡Mx 蛋白抗病毒效果 | 第38-40页 |
·间接免疫荧光(IFA)检测鸡Mx 蛋白抗病毒效果 | 第40-42页 |
·流式细胞仪(FCM)检测鸡Mx 蛋白抗病毒效果 | 第42-43页 |
·讨论 | 第43-45页 |
第四章 结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
作者简历 | 第53页 |