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鸡Mx基因的克隆及其抗AIV活性的研究

摘要第1-7页
abstract第7-12页
第一章 引言第12-19页
   ·不同物种的Mx 蛋白第12-15页
     ·Mx 基因的命名第12页
     ·其他哺乳动物Mx 蛋白的发现第12页
     ·鱼类Mx 蛋白的发现第12-13页
     ·禽类Mx 基因的发现第13-14页
     ·软体动物或多细胞无脊椎动物中Mx 基因的发现第14-15页
   ·Mx 蛋白的结构第15页
   ·Mx 蛋白的诱导表达调控机理第15-16页
   ·Mx 蛋白的抗病毒机理第16-17页
   ·Mx 基因的研究展望第17-19页
第二章 鸡Mx 基因的克隆及诱变修饰第19-30页
   ·材料和方法第19-24页
     ·脾脏组织第19页
     ·载体与菌株第19页
     ·主要试剂第19-20页
     ·主要实验仪器第20页
     ·试剂配制第20页
     ·引物设计第20页
     ·RNA 的提取第20-21页
     ·鸡Mx 基因的RT - PCR 扩增第21页
     ·Mx 基因的克隆与筛选第21-23页
     ·真核表达载体的构建第23页
     ·PCR 诱变修饰第23-24页
   ·结果第24-27页
     ·RT -PCR扩增鸡Mx 基因第24-25页
     ·Mx 蛋白特征性功能结构分析第25页
     ·Mx 多态性分析及筛选第25-26页
     ·真核表达载体的构建第26-27页
     ·PCR 诱变修饰第27页
   ·讨论第27-30页
第三章 鸡Mx 蛋白的表达及抗病毒活性检测第30-45页
   ·材料与方法第30-36页
     ·病毒、细胞、质粒第30页
     ·主要试剂及软件第30页
     ·仪器设备第30-31页
     ·试剂的配制第31-32页
     ·荧光定量PCR 扩增的引物第32页
     ·扩毒及接种剂量的确定第32页
     ·转染第32-33页
     ·RT - PCR 检测鸡Mx 基因在转染MDCK 细胞中的表达第33-34页
     ·免疫印迹杂交检测重组质粒转染MDCK 细胞后的表达第34-35页
     ·流式细胞技术检测Mx 重组质粒转染效率第35页
     ·实时荧光定量PCR 检测检测PB_2 转录基因拷贝数第35-36页
     ·间接免疫荧光检测Mx 蛋白抗禽流感病毒效果第36页
     ·流式细胞仪检测检测Mx 蛋白对病毒增殖的影响第36页
     ·统计学分析第36页
   ·结果第36-43页
     ·病毒滴度测定结果第36-37页
     ·RT - PCR 检测Mx 基因的表达第37页
     ·Western - blot 检测第37-38页
     ·FCM 检测第38页
     ·Real -timePCR 检测鸡Mx 蛋白抗病毒效果第38-40页
     ·间接免疫荧光(IFA)检测鸡Mx 蛋白抗病毒效果第40-42页
     ·流式细胞仪(FCM)检测鸡Mx 蛋白抗病毒效果第42-43页
   ·讨论第43-45页
第四章 结论第45-46页
参考文献第46-52页
致谢第52-53页
作者简历第53页

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