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鹅胚胎期及出生早期骨骼肌发育过程中MRFs/Pax3/Pax7和Tmem8c的表达模式和调控机制研究

摘要第4-5页
ABSTRACT第5页
第一章 文献综述第9-18页
    1.1 骨骼肌的结构和组成第9-10页
    1.2 骨骼肌的发生发育及调控第10-14页
        1.2.1 骨骼肌的发生和发育第10-11页
        1.2.2 骨骼肌发生与发育的分子调控第11-14页
    1.3 膜蛋白与骨骼肌发育第14-15页
        1.3.1 细胞膜蛋白在肌细胞分化中的研究第14页
        1.3.2 膜蛋白Tmem8c的研究第14-15页
    1.4 miRNA对骨骼肌发生的调控作用第15-17页
    1.5 本研究的目的、意义及内容第17-18页
        1.5.1 本研究的目的及意义第17页
        1.5.2 本研究的主要内容第17-18页
第二章 鹅胚胎期胸肌腿肌组织形态研究第18-24页
    2.1 实验材料第18页
        2.1.1 主要试剂与耗材第18页
        2.1.2 主要仪器第18页
        2.1.3 实验样品第18页
    2.2 肌肉石蜡切片的制作方法第18-20页
        2.2.1 冲洗第18页
        2.2.2 脱水和透明第18-19页
        2.2.3 浸蜡第19页
        2.2.4 包埋第19页
        2.2.5 切片和展片第19页
        2.2.6 烤片第19页
        2.2.7 HE染色第19页
        2.2.8 切片的观察第19-20页
    2.3 实验结果与分析第20-22页
        2.3.1 鹅不同胚龄阶段胚胎发育情况第20页
        2.3.2 鹅不同胚龄胸肌和腿肌组织变化情况第20-21页
        2.3.3 鹅不同胚龄的胸肌组织形态的变化第21-22页
    2.4 讨论第22-23页
    2.5 小结第23-24页
第三章 鹅骨骼肌发育相关因子MRFs和Pax3/Pax7的表达规律研究第24-36页
    3.1 实验材料第24-25页
        3.1.1 实验试剂与仪器第24-25页
        3.1.2 实验样品第25页
    3.2 实验方法第25-27页
        3.2.1 组织总RNA的提取第25页
        3.2.2 cDNA合成第25-26页
        3.2.3 实时荧光定量PCR反应体系第26-27页
        3.2.4 数据分析方法第27页
    3.3 实验结果与分析第27-32页
        3.3.1 胸肌腿肌组织RNA提取情况第27-28页
        3.3.2 胸肌和腿肌组织中MyoD表达情况第28-29页
        3.3.3 胸肌和腿肌组织中Myf5表达情况第29-30页
        3.3.4 胸肌和腿肌组织中MyoG表达情况第30页
        3.3.5 胸肌和腿肌组织中Myf6表达情况第30-31页
        3.3.6 胸肌和腿肌组织中Pax3表达情况第31-32页
        3.3.7 胸肌和腿肌组织中Pax7表达情况第32页
    3.4 讨论第32-34页
        3.4.1 MRFs家族对于鹅胚胎期及出生早期胸肌腿肌生长发育的作用第32-34页
        3.4.2 Pax3和Pax7基因对于鹅胚胎期及出生早期胸肌腿肌生长发育的作用第34页
    3.5 小结第34-36页
第四章 鹅骨骼肌发育相关因子Tmem8c的表达规律研究第36-59页
    4.1 实验材料第36-38页
        4.1.1 实验试剂与仪器第36-37页
        4.1.2 实验样品第37页
        4.1.3 实验所用细胞、载体和菌株第37-38页
        4.1.4 实验所用主要分子生物学软件、数据库和网站第38页
        4.1.5 实验试剂的配制第38页
    4.2 实验方法第38-48页
        4.2.1 检测Tmem8c在鹅骨骼肌发育过程中表达量第38-39页
        4.2.2 RACE法获得Tmem8c基因的全长第39-43页
        4.2.3 靶向Tmem8c基因的miRNA的预测和筛选第43页
        4.2.4 mi RNA在骨骼肌发育过程中表达量的检测第43-45页
        4.2.5 双荧光素报告系统的构建以及活性检测第45-48页
    4.3 实验结果与分析第48-56页
        4.3.1 浙东白鹅胸肌组织总RNA提取结果第48页
        4.3.2 3’RACE和 5’RACE PCR结果第48-49页
        4.3.3 Tmem8c基因序列分析第49-52页
        4.3.4 Tmem8c基因的遗传进化分析第52页
        4.3.5 Tmem8c在骨骼肌发育过程中的表达情况第52-53页
        4.3.6 靶向鹅Tmem8c的miRNA的预测筛选第53-55页
        4.3.7 靶向鹅Tmem8c的miRNA的鉴定第55-56页
    4.4 讨论第56-58页
        4.4.1 Tmem8c基因序列分析第56-57页
        4.4.2 Tmem8c在骨骼肌发育过程中的表达情况分析第57页
        4.4.3 mi RNA对Tmem8c的调控第57-58页
    4.5 小结第58-59页
第五章 结论第59-60页
    5.1 主要研究结果第59页
    5.2 本研究的不足及后续实验计划第59-60页
参考文献第60-66页
作者简介第66-67页
致谢第67页

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