| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 目录 | 第6-9页 |
| 第一部分 文献综述 | 第9-23页 |
| 1 橡胶树概述 | 第9页 |
| 2 植物遗传转化技术 | 第9-17页 |
| 2.1 根癌农杆菌介导的植物遗传转化 | 第10-11页 |
| 2.2 影响农杆菌转化效率的因素 | 第11-17页 |
| 3 FT基因及转基因研究进展 | 第17-19页 |
| 3.1 FT基因 | 第17-18页 |
| 3.2 FT基因研究进展 | 第18-19页 |
| 4 橡胶树遗传转化的研究进展 | 第19-20页 |
| 5 橡胶树次生体胚体系的应用 | 第20页 |
| 6 研究目的与意义 | 第20-22页 |
| 7 技术路线 | 第22-23页 |
| 第二部分 农杆菌介导的橡胶树胚状体遗传转化体系的建立 | 第23-41页 |
| 1 实验材料与试剂 | 第23-25页 |
| 1.1 材料 | 第23页 |
| 1.2 常用试剂及药品 | 第23-24页 |
| 1.3 溶液配制 | 第24-25页 |
| 2 方法 | 第25-29页 |
| 2.1 根癌农杆菌的培养 | 第25页 |
| 2.2 农杆菌介导的橡胶树体细胞胚GUS基因瞬时表达 | 第25-28页 |
| 2.3 GUS组织化学染色 | 第28页 |
| 2.4 GUS基因瞬时表达试验数据统计与分析 | 第28页 |
| 2.5 石蜡切片法显微镜观察胚状体GUS基因瞬时表达 | 第28-29页 |
| 3 实验结果与分析 | 第29-39页 |
| 3.1. 胚状体作为受体材料的可行性 | 第29-30页 |
| 3.2 显微镜观察胚状体石蜡切片 | 第30-31页 |
| 3.3 单因素对GUS基因瞬时表达的影响 | 第31-34页 |
| 3.4 复因子试验对GUS基因瞬时表达的影响 | 第34-39页 |
| 4 讨论 | 第39-41页 |
| 4.1 受体材料的选择 | 第39页 |
| 4.2 农杆菌介导的橡胶树胚状体遗传转化的主要影响因素 | 第39-41页 |
| 第三部分 拟南芥FT基因转化橡胶树的初步研究 | 第41-67页 |
| 一、拟南芥FT基因克隆及载体构建 | 第41-60页 |
| 1 实验材料和试剂 | 第41页 |
| 1.1 植物材料 | 第41页 |
| 1.2 菌种和质粒 | 第41页 |
| 1.3 酶与化学试剂 | 第41页 |
| 2 方法 | 第41-51页 |
| 2.1 拟南芥FT基因克隆 | 第41-45页 |
| 2.2 FT植物表达载体的构建 | 第45-51页 |
| 3 结果与分析 | 第51-60页 |
| 3.1 FT基因克隆 | 第51-52页 |
| 3.2 pCAMBIA2301-FT植物表达载体构建 | 第52-54页 |
| 3.3 pCAMBIA2300-FT::GUS融合基因植物表达载体构建 | 第54-60页 |
| 二、拟南芥FT基因转橡胶树 | 第60-67页 |
| 1 实验材料 | 第60页 |
| 1.1 植物材料 | 第60页 |
| 1.2 质粒 | 第60页 |
| 2 方法 | 第60-62页 |
| 2.1 电转化 | 第60-61页 |
| 2.2 农杆菌介导的遗传转化 | 第61页 |
| 2.3 拟转化胚状体的筛选与植株再生 | 第61-62页 |
| 3 结果与分析 | 第62-65页 |
| 3.1 胚状体遗传转化体系的验证 | 第62-63页 |
| 3.2 单因素不同处理GUS基因稳定表达情况 | 第63-65页 |
| 3.3 融合基因瞬时表达检测 | 第65页 |
| 4 讨论 | 第65-66页 |
| 4.1 遗传转化体系的验证 | 第65页 |
| 4.2 不同因素处理对遗传转化的影响 | 第65-66页 |
| 5 后续工作展望 | 第66-67页 |
| 第四部分 结论 | 第67-68页 |
| 附图1 | 第68-69页 |
| 附图2 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 攻读硕士学位期间科研成果 | 第81页 |
