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手性芳香胺类化合物的微生物酶法拆分研究

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-7页
第一章 文献综述第11-19页
    1.1 手性芳香胺类化合物拆分的研究进展第11-13页
        1.1.1 手性芳香胺化合物的研究概述第11页
        1.1.2 手性芳香胺类化合物的拆分方法第11-13页
            1.1.2.1 诱导结晶拆分法第12页
            1.1.2.2 化学拆分法第12页
            1.1.2.3 不对称合成法第12-13页
            1.1.2.4 生物法第13页
    1.2 脂肪酶在手性芳香胺类化合物合成中的应用第13-16页
        1.2.1 不同来源的脂肪酶第13-14页
        1.2.2 反应体系第14-15页
        1.2.3 其他催化方法第15-16页
    1.3 酰胺酶在手性芳香胺制备中的应用第16-18页
        1.3.1 酰胺水解酶第16-17页
        1.3.2 青霉素酰化酶第17-18页
    1.4 本课题的研究内容和意义第18-19页
        1.4.1 本课题的研究背景及选题意义第18页
        1.4.2 本课题的主要研究内容第18-19页
第二章 产立体选择性脂肪酶菌株的筛选及初步鉴定第19-31页
    2.1 前言第19页
    2.2 材料与方法第19-25页
        2.2.1 实验材料第19-21页
            2.2.1.1 实验菌株第19页
            2.2.1.2 培养基成分第19-20页
            2.2.1.3 主要原料与试剂第20页
            2.2.1.4 主要溶液第20-21页
            2.2.1.5 主要实验仪器第21页
        2.2.2 实验方法第21-25页
            2.2.2.1菌株旳蹄选方法第21-22页
            2.2.2.2 1-苯乙胺的检测方法气相色谱检测法第22页
            2.2.2.3 数据处理方法第22页
            2.2.2.4 脂肪酶活力测定第22-24页
            2.2.2.5 菌种的初步鉴定第24页
            2.2.2.6 酶反应最适pH值和最适温度的确定第24-25页
    2.3 结果与讨论第25-29页
        2.3.1 产脂肪酶菌种的平板初蹄第25页
        2.3.2 1-苯乙胺的标准曲线的建立第25-26页
        2.3.3 产立体选择性脂肪酶菌株的筛选结果第26-27页
        2.3.4 菌种的初步鉴定第27-28页
            2.3.4.1 形态观察第27页
            2.3.4.2 生理生化特征测定第27-28页
        2.3.5 酶最适pH值和最适温度的确定第28-29页
            2.3.5.1 酶反应最适pH值测定第28-29页
            2.3.5.2 酶反应最适温度测定第29页
    2.4 小结第29-31页
第三章 菌株J03产脂肪酶条件优化第31-39页
    3.1 前言第31页
    3.2 材料和方法第31-33页
        3.2.1 实验材料第31-32页
            3.2.1.1 实验菌种第31页
            3.2.1.2 培养基成分第31-32页
            3.2.1.3 主要试剂第32页
            3.2.1.4 主要实验仪器第32页
        3.2.2 实验方法第32-33页
            3.2.2.1 发酵产酶实验第32页
            3.2.2.2 生物量的测定方法第32页
            3.2.2.3 脂肪酶活力测定第32-33页
            3.2.2.4 培养基组分优化第33页
    3.3 结果与讨论第33-38页
        3.3.1 培养基组分优化第33-37页
            3.3.1.1 碳源第33-35页
            3.3.1.2 氮源第35页
            3.3.1.3 诱导剂第35-37页
        3.3.2 发酵产酶时间曲线第37-38页
    3.4 本章小结第38-39页
第四章 静息细胞拆分外消旋的1-苯基乙胺第39-45页
    4.1 前言第39页
    4.2 材料和方法第39-41页
        4.2.1 实验材料第39-40页
            4.2.1.1 实验菌株第39页
            4.2.1.2 培养基成分第39-40页
            4.2.1.3 主要原料与试剂第40页
            4.2.1.4 主要实验仪器第40页
        4.2.2 实验方法第40-41页
            4.2.2.1 JO3静息细胞的制备第40页
            4.2.2.2 静息细胞催化拆分1-苯乙胺外消旋体的基本工艺第40-41页
            4.2.2.3 数据处理方法第41页
    4.3 结果与讨论第41-44页
        4.3.1 不同有机溶剂对催化反应的影响第41-42页
        4.3.2 酰化剂对酶催化的影响第42页
        4.3.3 底物浓度对酶催化反应的影响第42-43页
        4.3.4 底物与酰化剂的比例对酶催化的影响第43-44页
    4.4 本章小结第44-45页
第五章 酰胺酶产生菌的筛选及利用响应面法优化其产酶条件第45-56页
    5.1 前言第45页
    5.2 材料与方法第45-49页
        5.2.1 实验材料第45-46页
            5.2.1.1 实验菌株第45页
            5.2.1.2 培养基成分第45-46页
            5.2.1.3 主要试剂第46页
            5.2.1.4 主要实验仪器第46页
        5.2.2 实验方法第46-49页
            5.2.2.1 底物2-氯-N-(1-(4-氯苯基)乙基)乙酰胺的制备第46-47页
            5.2.2.2 菌种的蹄选第47页
            5.2.2.3 底物2-氯-N-(1-(4-氯苯基)乙基)乙醜胺和产物4-氣苯乙胺的HPLC法分析第47-48页
            5.2.2.4 数据处理第48页
            5.2.2.5 酶活的测定方法第48-49页
            5.2.2.6 Plackett-Burman实验第49页
            5.2.2.7 响应面实验第49页
    5.3 结果与讨论第49-55页
        5.3.1 底物2-氯-N-(1-(4-氯苯基)乙基)乙酰胺标准曲线的建立第49-50页
        5.3.2 产物4-对氯苯乙胺标准曲线的建立第50-51页
        5.3.3 产立体选择性酰胺酶菌株的筛选结果第51页
        5.3.4 响应面法优化产酶条件第51-55页
            5.3.4.1 PI acket-Burman实验第51-53页
            5.3.4.2 响应面实验第53-55页
    5.4 小结第55-56页
第六章 黑曲霉M041水解2-氯-N-(1-(4-氯苯基)乙基)乙酰胺制备4-氯苯乙胺工艺的研究第56-62页
    6.1 前言第56页
    6.2 材料与方法第56-58页
        6.2.1 实验材料第56-57页
            6.2.1.1 实验菌株第56页
            6.2.1.2 培养基成分第56-57页
            6.2.1.3 主要试剂第57页
            6.2.1.4 主要实验仪器第57页
        6.2.2 实验方法第57-58页
            6.2.2.1 静息细胞制备第57页
            6.2.2.2 转化反应第57-58页
            6.2.2.3 数据处理第58页
    6.3 结果与讨论第58-61页
        6.3.1 反应介质的确定第58-59页
        6.3.2 有机试剂的影响第59页
        6.3.3 底物浓度的影响第59-60页
        6.3.4 体系水含量的影响第60-61页
    6.4 本章小结第61-62页
第七章 总结与展望第62-64页
    7.1 总结第62-63页
    7.2 展望第63-64页
参考文献第64-70页
致谢第70-71页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第71页

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