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藤茶活性成分DMY对乳腺癌细胞增殖、凋亡和侵袭转移的影响

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-16页
第一章 绪论第16-31页
   ·乳腺癌第16-17页
   ·癌症转移第17-18页
   ·天然植物提取物治疗乳腺癌的研究进展第18-24页
     ·干预乳腺癌细胞增殖第19-20页
     ·促进乳腺癌细胞的凋亡第20-21页
     ·改善乳腺癌细胞的多药耐药性第21页
     ·对乳腺癌细胞抑癌相关基因的去甲基化作用第21-22页
     ·对乳腺癌细胞侵袭、转移的影响第22-23页
     ·对乳腺癌细胞端粒酶活性的影响第23页
     ·抑制雌激素合成相关酶的活性第23-24页
     ·调节细胞信号传导通路第24页
   ·DMY 的研究进展第24-28页
     ·DMY 的简介第24-25页
     ·DMY 的生理活性研究第25-26页
     ·DMY 的抗肿瘤作用第26-27页
     ·DMY 的抗肿瘤作用机理第27-28页
   ·本课题的研究目的、意义及主要内容第28-31页
     ·本课题的研究目的和意义第28-29页
     ·本课题的主要研究内容第29-31页
第二章 DMY 对人乳腺癌细胞体外抗增殖作用评价及其机制探讨第31-49页
   ·材料第31-35页
     ·细胞株第31页
     ·主要试剂、试剂盒及耗材第31-33页
     ·主要试剂的配制第33-34页
     ·主要实验仪器第34-35页
   ·方法第35-38页
     ·细胞培养第35-36页
     ·DMY 纯度检测第36页
     ·DMY 对乳腺癌细胞的抗增殖作用第36页
     ·DMY 对人正常细胞增殖的作用第36页
     ·细胞周期分析第36-37页
     ·DNA ladder 分析第37-38页
     ·明胶酶谱分析第38页
   ·结果与讨论第38-48页
     ·DMY 的纯度检测第38-39页
     ·不同乳腺癌细胞对 DMY 敏感性比较第39-40页
     ·DMY 对 MDA-MB-231 细胞形态的影响第40-41页
     ·DMY 对 MDA-MB-231 细胞增殖的时间-剂量关系第41页
     ·DMY 处理 MDA-MB-231 细胞 1 h 后对细胞增殖的影响第41-42页
     ·DMSO 对 MDA-MB-231 细胞增殖的影响第42页
     ·DMY 对人胚肾细胞 HEK-293 和人肝细胞 L-02 增殖的影响第42-45页
     ·DMY 对 MDA-MB-231 细胞周期和细胞凋亡的影响第45-47页
     ·DMY 对 MDA-MB-231 细胞明胶酶谱的影响第47-48页
   ·本章小结第48-49页
第三章 DMY 诱导人乳腺癌 MDA-MB-231 细胞凋亡的机制研究第49-62页
   ·材料第50-51页
     ·细胞株第50页
     ·主要试剂、试剂盒及耗材第50-51页
     ·主要试剂的配制第51页
     ·仪器设备第51页
   ·方法第51-54页
     ·DAPI 染色观察细胞凋亡第51-52页
     ·Annexin V-FITC/PI 双标记法检测细胞凋亡第52页
     ·流式细胞术检测细胞内钙离子浓度第52-53页
     ·流式细胞术检测线粒体跨膜电位(ΔΨm)第53页
     ·Western 印迹检测 Caspase-3 和 Caspase-9 蛋白表达第53-54页
   ·结果与讨论第54-61页
     ·DAPI 染色观察细胞凋亡第54-55页
     ·Annexin V-FITC/PI 双标记法检测 MDA-MB-231 细胞凋亡第55-57页
     ·DMY 对 MDA-MB-231 细胞内钙离子浓度的影响第57-58页
     ·DMY 对 MDA-MB-231 细胞线粒体跨膜电位(ΔΨm)的影响第58-59页
     ·Western 印迹检测 Caspase-3 和 Caspase-9 蛋白表达第59-61页
   ·本章小结第61-62页
第四章 DMY 对人乳腺癌 MDA-MB-231 细胞侵袭转移的抑制效应和分子机制第62-85页
   ·材料第62-63页
     ·细胞株第62页
     ·主要试剂、试剂盒和耗材第62-63页
     ·主要仪器设备第63页
   ·方法第63-69页
     ·原子力显微镜扫描细胞表面结构第63-64页
     ·细胞划痕实验第64页
     ·细胞体外侵袭实验第64-65页
     ·Real-time PCR 分析第65-68页
     ·Western 印迹分析检测 MMP-9 和 MM-2 蛋白表达第68-69页
   ·结果与讨论第69-84页
     ·原子力显微镜扫描细胞表面结构第69-70页
     ·DMY 抑制 MDA-MB-231 细胞迁移和侵袭第70-72页
     ·MDA-MB-231 细胞总 RNA 提取第72-73页
     ·DMY 对 MDA-MB-231 细胞 MMP-9 和 MMP-2 基因表达的影响第73-75页
     ·Western blot 分析 MMP-9 和 MMP-2 蛋白的表达第75-76页
     ·DMY 对 MDA-MB-231 细胞其他转移相关基因表达的影响第76-83页
     ·DMY 对 MDA-MB-231 细胞其他基因表达的影响第83-84页
   ·本章小结第84-85页
第五章 DMY 对小鼠乳腺癌 4T1 细胞的增殖、凋亡和侵袭转移的影响第85-97页
   ·材料第85-86页
     ·细胞株和动物第85页
     ·主要试剂、耗材和试剂盒第85页
     ·主要仪器设备第85-86页
   ·方法第86-90页
     ·MTT 法测定 DMY 对 4T1 细胞的体外抗增殖作用第86页
     ·DAPI 染色观察细胞凋亡第86页
     ·流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡第86页
     ·明胶酶谱实验第86-87页
     ·细胞划痕实验第87页
     ·细胞侵袭实验第87-88页
     ·Real-time PCR 检测 MMP-9 和 MMP-2 的表达第88页
     ·ELISA 检测 MMP-9 和 MMP-2 蛋白的表达第88-90页
   ·结果与讨论第90-96页
     ·DMY 对 4T1 细胞增殖的时间剂量关系第90-91页
     ·DMY 对 4T1 细胞形态的影响第91页
     ·DAPI 染色观察 DMY 诱导 4T1 细胞凋亡第91-92页
     ·流式细胞术检测 DMY 对 4T1 细胞细胞周期和晚期凋亡的影响第92-93页
     ·DMY 对 4T1 细胞明胶酶谱的影响第93页
     ·DMY 抑制 4T1 细胞迁移和侵袭第93-95页
     ·DMY 对 4T1 细胞 MMP-9 和 MMP-2 mRNA 表达的影响第95-96页
     ·DMY 对 4T1 细胞 MMP-9 和 MMP-2 蛋白表达的影响第96页
   ·本章小结第96-97页
第六章 DMY 联合阿霉素抗乳腺癌的体外研究第97-107页
   ·材料第98-99页
     ·细胞株第98页
     ·主要试剂、试剂盒和耗材第98页
     ·主要仪器设备第98-99页
   ·方法第99-100页
     ·细胞培养第99页
     ·肿瘤细胞体外增殖抑制实验第99页
     ·药物联合作用评价第99-100页
   ·结果与讨论第100-106页
     ·DMY 和阿霉素单独或联用对 MDA-MB-231 细胞的抗增殖作用第100-101页
     ·DMY 和阿霉素单独或联用对 4T1 细胞的抗增殖作用第101-103页
     ·DMY 与阿霉素作用于 MDA-MB-231 细胞的合用指数第103-104页
     ·DMY 与阿霉素作用于 4T1 细胞的合用指数第104-106页
   ·本章小结第106-107页
第七章 DMY 对乳腺癌 4T1 细胞荷瘤小鼠的抗肿瘤作用第107-123页
   ·材料第108-109页
     ·细胞株和动物第108页
     ·主要试剂、耗材和试剂盒第108页
     ·主要仪器设备第108页
     ·主要试剂的配制第108-109页
   ·方法第109-111页
     ·肿瘤模型建立第109页
     ·动物分组第109页
     ·计算抑瘤率、脾脏指数和肺转移灶第109页
     ·荷瘤小鼠血清微转移的检测第109页
     ·血清生化检测第109页
     ·血清 MMP-9 和 MMP-2 的 ELISA 检测第109-110页
     ·HE 染色观察肿瘤组织形态学第110-111页
   ·结果与讨论第111-122页
     ·DMY 对小鼠体重及取食的影响第111-112页
     ·DMY 对小鼠瘤重及抑瘤率的影响第112-113页
     ·DMY 对小鼠乳腺癌肺转移的影响第113-114页
     ·DMY 对荷瘤小鼠血浆微转移的影响第114-115页
     ·DMY 对荷瘤小鼠脾脏指数的影响第115页
     ·DMY 对阿霉素心脏毒性的影响第115-117页
     ·DMY 对阿霉素肝毒性的影响第117-118页
     ·DMY 对荷瘤小鼠血清 MMP-9 和 MMP-2 水平的影响第118-119页
     ·HE 染色观察瘤块组织形态第119-122页
   ·本章小结第122-123页
结论与展望第123-125页
参考文献第125-141页
攻读博士学位期间取得的研究成果第141-142页
致谢第142-143页
附录第143页

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