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血液中循环肿瘤细胞的捕集与SERS成像检测及其相关蛋白质组学研究新技术的开发

中文摘要第10-13页
Abstract第13-16页
第一章 文献综述第17-49页
    1.1 引言第17-18页
    1.2 循环肿瘤细胞(CTC)第18-28页
        1.2.1 循环肿瘤细胞概述第18-20页
        1.2.2 CTCs的分离技术第20-26页
        1.2.3 CTC的检测手段第26-28页
    1.3 表面增强拉曼光谱(SERS)第28-35页
        1.3.1 SERS的起源和特点第28-29页
        1.3.2 SERS的增强机理第29-30页
            1.3.2.1 电磁增强机理第29-30页
            1.3.2.2 化学增强机理第30页
        1.3.3 SERS基底的制备第30-32页
            1.3.3.1 直接法第30-31页
            1.3.3.2 间接法第31-32页
        1.3.4 SERS的应用第32-34页
            1.3.4.1 食品安全检测第32页
            1.3.4.2 环境监测第32-33页
            1.3.4.3 生命科学第33页
            1.3.4.4 医学第33-34页
            1.3.4.5 单分子亚纳米成像第34页
        1.3.5 SERS成像在CTC检测中的前景第34-35页
    1.4 单细胞蛋白质组学第35-40页
        1.4.1 低丰度蛋白质富集第36-37页
        1.4.2 蛋白质高效酶解技术第37-40页
            1.4.2.1 固定酶技术第37-39页
            1.4.2.2 辅助酶解技术第39-40页
    1.5 本论文的选题与意义第40页
    1.6 参考文献第40-49页
第二章 硝酸纤维素膜芯片对CTC的捕获第49-69页
    2.1 硝酸纤维素膜基底对CTC的捕获第49-56页
        2.1.1 前言第49-50页
        2.1.2 实验部分第50-52页
            2.1.2.1 材料与试剂第50页
            2.1.2.2 NC膜的透明化处理和固定第50-51页
            2.1.2.3 抗体的吸附自组装第51页
            2.1.2.4 抗体吸附量的考察第51页
            2.1.2.5 CTC的捕集与条件优化第51页
            2.1.2.6 模拟实际血样中CTC捕获第51-52页
        2.1.3 结果与讨论第52-56页
            2.1.3.1 硝酸纤维素膜的固化与透明第52页
            2.1.3.2 抗体的固定第52-53页
            2.1.3.3 NC膜基底对CTC的捕集第53-56页
            2.1.3.4 模拟血液中CTC的捕获第56页
    2.2 基于NC膜的CTC芯片对CTC的捕获第56-65页
        2.2.1 前言第56-57页
        2.2.2 实验部分第57-60页
            2.2.2.1 材料与试剂第57页
            2.2.2.2 CTC芯片的制备第57-59页
            2.2.2.3 CTC芯片抗体固定条件的优化第59页
            2.2.2.4 CTC芯片的效率验证第59-60页
            2.2.2.5 CTC芯片对血液中CTC的捕获第60页
        2.2.3 结果与讨论第60-65页
            2.2.3.1 CTC芯片的设计与制作第60-61页
            2.2.3.2 CTC芯片的抗体吸附第61-62页
            2.2.3.3 CTC的DAPI荧光染色第62-63页
            2.2.3.4 CTC芯片对癌细胞的捕获第63-65页
            2.2.3.5 CTC芯片对模拟血液的检测第65页
    2.3 本章小结第65-66页
    2.4 参考文献第66-69页
第三章 CTC的高灵敏性SERS成像分析第69-89页
    3.1 前言第69页
    3.2 实验部分第69-71页
        3.2.1 材料与试剂第69-70页
        3.2.2 纳米金球的合成第70-71页
            3.2.2.1 种子生长法第70页
            3.2.2.2 一步合成法第70-71页
        3.2.3 SERS探针的制备第71页
        3.2.4 SERS对细胞的标记第71页
        3.2.5 拉曼检测第71页
    3.3 结果与讨论第71-86页
        3.3.1 纳米金球的制备与表征第71-74页
        3.3.2 SERS探针的构建第74-80页
            3.3.2.1 拉曼信号分子的筛选第75-76页
            3.3.2.2 金球大小对拉曼信号的影响第76-77页
            3.3.2.3 纳米金球团聚的分析第77-78页
            3.3.2.4 抗体特异性的考察第78-80页
        3.3.3 SERS探针的表征第80-81页
        3.3.4 SERS探针的特异性考查第81-83页
        3.3.5 细胞的SERS成像分析第83-86页
    3.4 本章小结第86页
    3.5 参考文献第86-89页
第四章 磁性石墨烯材料对低丰度蛋白质的富集第89-119页
    4.1 前言第89-90页
    4.2 Fe_3O_4@SiO_2@G对蛋白质的富集第90-99页
        4.2.1 实验部分第90-93页
            4.2.1.1 材料与试剂第90页
            4.2.1.2 Fe_3O_4@SiO_2@G的合成第90-91页
            4.2.1.3 Fe_3O_4@SiO_2@G的表征第91页
            4.2.1.4 Fe_3O_4@SiO_2@G对标准蛋白的富集第91-92页
            4.2.1.5 Fe_3O_4@SiO_2@G对实际血样的分析第92页
            4.2.1.6 MALDI-TOF/MS质谱鉴定第92页
            4.2.1.7 HPLC分离分析第92-93页
        4.2.2 结果与讨论第93-99页
            4.2.2.1 Fe_3O_4@SiO_2@G磁性石墨烯材料的表征第93-95页
            4.2.2.2 Fe_3O_4@SiO_2@G对标准蛋白的富集考察第95-98页
            4.2.2.3 Fe_3O_4@SiO_2@G对实际血样的富集第98-99页
    4.3 Fe_3O_4@S@G对蛋白质的富集第99-105页
        4.3.1 实验部分第99-101页
            4.3.1.1 材料和试剂第99-100页
            4.3.1.2 Fe_3O_4@S@G的合成第100页
            4.3.1.3 Fe_3O_4@S@G对标准蛋白的富集第100页
            4.3.1.4 Fe_3O_4@S@G对血浆低浓度蛋白的富集第100-101页
        4.3.2 结果与讨论第101-105页
            4.3.2.1 Fe_3O_4@S@G材料的表征第101-103页
            4.3.2.2 Fe_3O_4@S@G对标准蛋白的富集第103-104页
            4.3.2.3 Fe_3O_4@S@G对血液中低浓度蛋白质的富集第104-105页
    4.4 本章小结第105页
    4.5 参考文献第105-106页
    4.6 附录第106-119页
第五章 激光辅助固定酶反应器用于蛋白质高效酶解第119-147页
    5.1 前言第119-120页
    5.2 原位聚合法制备蛋白质快速酶解整体柱的研究第120-130页
        5.2.1 实验部分第120-123页
            5.2.1.1 材料和试剂第120-121页
            5.2.1.2 毛细管酶解整体柱的制备第121-122页
            5.2.1.3 酶解整体柱的表征第122页
            5.2.1.4 酶活性的考察第122页
            5.2.1.5 标准蛋白的酶解第122页
            5.2.1.6 实际样品的酶解第122-123页
            5.2.1.7 质谱分析第123页
        5.2.2 结果与讨论第123-130页
            5.2.2.1 酶解整体柱的表征第123-125页
            5.2.2.2 酶解整体柱活性考察第125页
            5.2.2.3 酶解整体柱对标准蛋白的酶解第125-128页
            5.2.2.4 酶解整体柱对人肝蛋白的酶解第128-130页
    5.3 激光辅助固定酶反应器对蛋白质的高效酶解第130-141页
        5.3.1 实验部分第130-133页
            5.3.1.1 材料和试剂第130-131页
            5.3.1.2 固定酶反应器的制备方法第131页
            5.3.1.3 激光辅助固定酶反应器酶解体系的构建第131-132页
            5.3.1.4 激光辅助的固定酶反应器酶解活性的考察第132页
            5.3.1.5 激光辅助的固定酶反应器对标准蛋白的酶解第132页
            5.3.1.6 激光辅助的固定酶反应器对人血清实际样品的酶解第132-133页
            5.3.1.7 质谱鉴定第133页
        5.3.2 结果与讨论第133-141页
            5.3.2.1 激光辅助的固定酶反应器酶解活性考察第133-135页
            5.3.2.2 激光辅助的固定酶反应器酶解标准蛋白第135-139页
            5.3.2.3 激光辅助的固定酶反应器酶解血清样品第139-141页
    5.4 本章小结第141页
    5.5 参考文献第141-143页
    5.6 附录第143-147页
附录第147-148页
致谢第148-149页

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