中文摘要 | 第10-13页 |
Abstract | 第13-16页 |
第一章 文献综述 | 第17-49页 |
1.1 引言 | 第17-18页 |
1.2 循环肿瘤细胞(CTC) | 第18-28页 |
1.2.1 循环肿瘤细胞概述 | 第18-20页 |
1.2.2 CTCs的分离技术 | 第20-26页 |
1.2.3 CTC的检测手段 | 第26-28页 |
1.3 表面增强拉曼光谱(SERS) | 第28-35页 |
1.3.1 SERS的起源和特点 | 第28-29页 |
1.3.2 SERS的增强机理 | 第29-30页 |
1.3.2.1 电磁增强机理 | 第29-30页 |
1.3.2.2 化学增强机理 | 第30页 |
1.3.3 SERS基底的制备 | 第30-32页 |
1.3.3.1 直接法 | 第30-31页 |
1.3.3.2 间接法 | 第31-32页 |
1.3.4 SERS的应用 | 第32-34页 |
1.3.4.1 食品安全检测 | 第32页 |
1.3.4.2 环境监测 | 第32-33页 |
1.3.4.3 生命科学 | 第33页 |
1.3.4.4 医学 | 第33-34页 |
1.3.4.5 单分子亚纳米成像 | 第34页 |
1.3.5 SERS成像在CTC检测中的前景 | 第34-35页 |
1.4 单细胞蛋白质组学 | 第35-40页 |
1.4.1 低丰度蛋白质富集 | 第36-37页 |
1.4.2 蛋白质高效酶解技术 | 第37-40页 |
1.4.2.1 固定酶技术 | 第37-39页 |
1.4.2.2 辅助酶解技术 | 第39-40页 |
1.5 本论文的选题与意义 | 第40页 |
1.6 参考文献 | 第40-49页 |
第二章 硝酸纤维素膜芯片对CTC的捕获 | 第49-69页 |
2.1 硝酸纤维素膜基底对CTC的捕获 | 第49-56页 |
2.1.1 前言 | 第49-50页 |
2.1.2 实验部分 | 第50-52页 |
2.1.2.1 材料与试剂 | 第50页 |
2.1.2.2 NC膜的透明化处理和固定 | 第50-51页 |
2.1.2.3 抗体的吸附自组装 | 第51页 |
2.1.2.4 抗体吸附量的考察 | 第51页 |
2.1.2.5 CTC的捕集与条件优化 | 第51页 |
2.1.2.6 模拟实际血样中CTC捕获 | 第51-52页 |
2.1.3 结果与讨论 | 第52-56页 |
2.1.3.1 硝酸纤维素膜的固化与透明 | 第52页 |
2.1.3.2 抗体的固定 | 第52-53页 |
2.1.3.3 NC膜基底对CTC的捕集 | 第53-56页 |
2.1.3.4 模拟血液中CTC的捕获 | 第56页 |
2.2 基于NC膜的CTC芯片对CTC的捕获 | 第56-65页 |
2.2.1 前言 | 第56-57页 |
2.2.2 实验部分 | 第57-60页 |
2.2.2.1 材料与试剂 | 第57页 |
2.2.2.2 CTC芯片的制备 | 第57-59页 |
2.2.2.3 CTC芯片抗体固定条件的优化 | 第59页 |
2.2.2.4 CTC芯片的效率验证 | 第59-60页 |
2.2.2.5 CTC芯片对血液中CTC的捕获 | 第60页 |
2.2.3 结果与讨论 | 第60-65页 |
2.2.3.1 CTC芯片的设计与制作 | 第60-61页 |
2.2.3.2 CTC芯片的抗体吸附 | 第61-62页 |
2.2.3.3 CTC的DAPI荧光染色 | 第62-63页 |
2.2.3.4 CTC芯片对癌细胞的捕获 | 第63-65页 |
2.2.3.5 CTC芯片对模拟血液的检测 | 第65页 |
2.3 本章小结 | 第65-66页 |
2.4 参考文献 | 第66-69页 |
第三章 CTC的高灵敏性SERS成像分析 | 第69-89页 |
3.1 前言 | 第69页 |
3.2 实验部分 | 第69-71页 |
3.2.1 材料与试剂 | 第69-70页 |
3.2.2 纳米金球的合成 | 第70-71页 |
3.2.2.1 种子生长法 | 第70页 |
3.2.2.2 一步合成法 | 第70-71页 |
3.2.3 SERS探针的制备 | 第71页 |
3.2.4 SERS对细胞的标记 | 第71页 |
3.2.5 拉曼检测 | 第71页 |
3.3 结果与讨论 | 第71-86页 |
3.3.1 纳米金球的制备与表征 | 第71-74页 |
3.3.2 SERS探针的构建 | 第74-80页 |
3.3.2.1 拉曼信号分子的筛选 | 第75-76页 |
3.3.2.2 金球大小对拉曼信号的影响 | 第76-77页 |
3.3.2.3 纳米金球团聚的分析 | 第77-78页 |
3.3.2.4 抗体特异性的考察 | 第78-80页 |
3.3.3 SERS探针的表征 | 第80-81页 |
3.3.4 SERS探针的特异性考查 | 第81-83页 |
3.3.5 细胞的SERS成像分析 | 第83-86页 |
3.4 本章小结 | 第86页 |
3.5 参考文献 | 第86-89页 |
第四章 磁性石墨烯材料对低丰度蛋白质的富集 | 第89-119页 |
4.1 前言 | 第89-90页 |
4.2 Fe_3O_4@SiO_2@G对蛋白质的富集 | 第90-99页 |
4.2.1 实验部分 | 第90-93页 |
4.2.1.1 材料与试剂 | 第90页 |
4.2.1.2 Fe_3O_4@SiO_2@G的合成 | 第90-91页 |
4.2.1.3 Fe_3O_4@SiO_2@G的表征 | 第91页 |
4.2.1.4 Fe_3O_4@SiO_2@G对标准蛋白的富集 | 第91-92页 |
4.2.1.5 Fe_3O_4@SiO_2@G对实际血样的分析 | 第92页 |
4.2.1.6 MALDI-TOF/MS质谱鉴定 | 第92页 |
4.2.1.7 HPLC分离分析 | 第92-93页 |
4.2.2 结果与讨论 | 第93-99页 |
4.2.2.1 Fe_3O_4@SiO_2@G磁性石墨烯材料的表征 | 第93-95页 |
4.2.2.2 Fe_3O_4@SiO_2@G对标准蛋白的富集考察 | 第95-98页 |
4.2.2.3 Fe_3O_4@SiO_2@G对实际血样的富集 | 第98-99页 |
4.3 Fe_3O_4@S@G对蛋白质的富集 | 第99-105页 |
4.3.1 实验部分 | 第99-101页 |
4.3.1.1 材料和试剂 | 第99-100页 |
4.3.1.2 Fe_3O_4@S@G的合成 | 第100页 |
4.3.1.3 Fe_3O_4@S@G对标准蛋白的富集 | 第100页 |
4.3.1.4 Fe_3O_4@S@G对血浆低浓度蛋白的富集 | 第100-101页 |
4.3.2 结果与讨论 | 第101-105页 |
4.3.2.1 Fe_3O_4@S@G材料的表征 | 第101-103页 |
4.3.2.2 Fe_3O_4@S@G对标准蛋白的富集 | 第103-104页 |
4.3.2.3 Fe_3O_4@S@G对血液中低浓度蛋白质的富集 | 第104-105页 |
4.4 本章小结 | 第105页 |
4.5 参考文献 | 第105-106页 |
4.6 附录 | 第106-119页 |
第五章 激光辅助固定酶反应器用于蛋白质高效酶解 | 第119-147页 |
5.1 前言 | 第119-120页 |
5.2 原位聚合法制备蛋白质快速酶解整体柱的研究 | 第120-130页 |
5.2.1 实验部分 | 第120-123页 |
5.2.1.1 材料和试剂 | 第120-121页 |
5.2.1.2 毛细管酶解整体柱的制备 | 第121-122页 |
5.2.1.3 酶解整体柱的表征 | 第122页 |
5.2.1.4 酶活性的考察 | 第122页 |
5.2.1.5 标准蛋白的酶解 | 第122页 |
5.2.1.6 实际样品的酶解 | 第122-123页 |
5.2.1.7 质谱分析 | 第123页 |
5.2.2 结果与讨论 | 第123-130页 |
5.2.2.1 酶解整体柱的表征 | 第123-125页 |
5.2.2.2 酶解整体柱活性考察 | 第125页 |
5.2.2.3 酶解整体柱对标准蛋白的酶解 | 第125-128页 |
5.2.2.4 酶解整体柱对人肝蛋白的酶解 | 第128-130页 |
5.3 激光辅助固定酶反应器对蛋白质的高效酶解 | 第130-141页 |
5.3.1 实验部分 | 第130-133页 |
5.3.1.1 材料和试剂 | 第130-131页 |
5.3.1.2 固定酶反应器的制备方法 | 第131页 |
5.3.1.3 激光辅助固定酶反应器酶解体系的构建 | 第131-132页 |
5.3.1.4 激光辅助的固定酶反应器酶解活性的考察 | 第132页 |
5.3.1.5 激光辅助的固定酶反应器对标准蛋白的酶解 | 第132页 |
5.3.1.6 激光辅助的固定酶反应器对人血清实际样品的酶解 | 第132-133页 |
5.3.1.7 质谱鉴定 | 第133页 |
5.3.2 结果与讨论 | 第133-141页 |
5.3.2.1 激光辅助的固定酶反应器酶解活性考察 | 第133-135页 |
5.3.2.2 激光辅助的固定酶反应器酶解标准蛋白 | 第135-139页 |
5.3.2.3 激光辅助的固定酶反应器酶解血清样品 | 第139-141页 |
5.4 本章小结 | 第141页 |
5.5 参考文献 | 第141-143页 |
5.6 附录 | 第143-147页 |
附录 | 第147-148页 |
致谢 | 第148-149页 |