| 提要 | 第4-6页 |
| 中文摘要 | 第6-12页 |
| Abstract | 第12-19页 |
| 第1章 文献综述 | 第25-37页 |
| 1.1 MBP增强免疫应答的机制研究进展 | 第25-26页 |
| 1.2 BCG激活免疫细胞的机制与TLR有关 | 第26-28页 |
| 1.3 Toll样受体 | 第28-32页 |
| 1.3.1 TLRs成员的分布与定位 | 第28页 |
| 1.3.2 TLRs成员的配体和激动剂 | 第28-29页 |
| 1.3.3 TLRs和DC | 第29-32页 |
| 1.4 本课题设计思路及主要研究内容 | 第32-37页 |
| 1.4.1 本课题的设计思路 | 第32页 |
| 1.4.2 本课题研究的具体内容 | 第32-34页 |
| 1.4.3 本课题的特色 | 第34-37页 |
| 第2章 MBP联合BCG体外诱导树突状细胞的成熟促进TH1细胞活化 | 第37-53页 |
| 2.1 实验材料 | 第37-40页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第37页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第37-38页 |
| 2.1.3 主要试剂的配制 | 第38-39页 |
| 2.1.4 主要实验仪器 | 第39-40页 |
| 2.2 主要实验方法 | 第40-44页 |
| 2.2.1 MBP的分离纯化 | 第40-41页 |
| 2.2.2 实验体系建立 | 第41-42页 |
| 2.2.3 流式细胞术检测DC细胞CD80、CD86和MHC-II分子表达 | 第42页 |
| 2.2.4 ELISA实验检测细胞培养上清中IL-12p70的分泌 | 第42-43页 |
| 2.2.5 DC细胞与CD4~+T细胞的共培养及增殖检测 | 第43页 |
| 2.2.6 ELISPOT检测CD4~+T与DC共培养的IFN-γ和IL-4 分泌 | 第43-44页 |
| 2.2.7 统计学处理 | 第44页 |
| 2.3 实验结果 | 第44-50页 |
| 2.3.1 DC细胞的纯度鉴定 | 第44-45页 |
| 2.3.2 CD4~+T细胞的纯度鉴定 | 第45页 |
| 2.3.3 MBP联合BCG促进DC共刺激分子和MHC-II分子的表达 | 第45-47页 |
| 2.3.4 MBP联合BCG促进DC分泌IL-12 | 第47-48页 |
| 2.3.5 MBP联合BCG对DC诱导Th1活化的影响 | 第48-50页 |
| 2.4 讨论 | 第50-51页 |
| 2.5 小结 | 第51-53页 |
| 第3章 MBP联合BCG诱导树突状细胞成熟促进TH1细胞活化的机制分析 | 第53-79页 |
| 3.1 实验材料 | 第53-55页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第53-54页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第54页 |
| 3.1.3 主要试剂的配制 | 第54-55页 |
| 3.1.4 主要实验仪器 | 第55页 |
| 3.2 主要实验方法 | 第55-60页 |
| 3.2.1 RT-PCR实验对TLR2~(-/-)、TLR4~(-/-)小鼠TLR2/TLR4的表达鉴定 | 第55-57页 |
| 3.2.2 小鼠脾脏DC细胞的分离与培养 | 第57页 |
| 3.2.3 小鼠脾脏CD4~+T细胞的分离与培养 | 第57页 |
| 3.2.4 流式细胞术检测TLR2和TLR4表达 | 第57-58页 |
| 3.2.5 流式细胞术检测TLR2~(-/-)、TLR4~(-/-)DC细胞CD80、CD86和MHC-II分子表达 | 第58页 |
| 3.2.6 ELISA实验检测细胞培养上清中IL-12p70的分泌 | 第58页 |
| 3.2.7 不同小鼠来源的DC细胞与CD4~+T细胞的共培养及增殖检测 | 第58-59页 |
| 3.2.8 ELISPOT检测CD4+ T与DC共培养的IFN-γ和IL-4 分泌 | 第59页 |
| 3.2.9 ELISA实验检测细胞培养上清中IL-10 的分泌 | 第59-60页 |
| 3.2.10 统计学处理 | 第60页 |
| 3.3 实验结果 | 第60-75页 |
| 3.3.1 TLR2~(-/-)小鼠或TLR4~(-/-)小鼠脾脏单个核细胞TLR2/TLR4表达的鉴定 | 第60-61页 |
| 3.3.2 MBP 联合 BCG 促进 DC 细胞 TLR2 的表达 | 第61-62页 |
| 3.3.3 MBP联合BCG促进DC细胞TLR4的表达 | 第62-63页 |
| 3.3.4 TLR2对MBP联合BCG促进DC细胞CD80、CD86、MHC-II分子表达的影响 | 第63-67页 |
| 3.3.5 TLR4对MBP联合BCG促进DC细胞CD80、CD86、MHC-II分子的表达 | 第67-70页 |
| 3.3.6 TLR2/TLR4对MBP联合BCG刺激DC分泌IL-12p70的影响 | 第70-71页 |
| 3.3.7 TLR2/TLR4对MBP联合BCG通过DC诱导CD4~+T细胞增殖的影响 | 第71-72页 |
| 3.3.8 TLR2/TLR4对MBP联合BCG通过DC诱导Th1活化的影响 | 第72-75页 |
| 3.4 讨论 | 第75-77页 |
| 3.5 小结 | 第77-79页 |
| 第4章 MBP联合BCG体内对树突状细胞的成熟作用及诱导TH1活化的机制研究 | 第79-101页 |
| 4.1 实验材料 | 第79-81页 |
| 4.1.1 实验动物 | 第79-80页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第80页 |
| 4.1.3 主要试剂的配制 | 第80-81页 |
| 4.1.4 主要实验仪器 | 第81页 |
| 4.2 主要实验方法 | 第81-83页 |
| 4.2.1 MBP联合BCG免疫小鼠的过程 | 第81-82页 |
| 4.2.2 免疫小鼠脾脏DC细胞的分离与培养 | 第82页 |
| 4.2.3 免疫小鼠脾脏CD4~+T细胞的分离与培养 | 第82页 |
| 4.2.4 流式细胞术检测不同小鼠免疫后DC细胞TLR2和TLR4表达 | 第82页 |
| 4.2.5 流式细胞术检测不同小鼠免疫后DC细胞CD80、CD86和MHC-II分子表达 | 第82-83页 |
| 4.2.6 不同免疫小鼠来源的CD4~+T细胞的培养及增殖检测 | 第83页 |
| 4.2.7 不同免疫小鼠来源的CD4~+T细胞的IFN-γmRNA表达检测 | 第83页 |
| 4.2.8 统计学处理 | 第83页 |
| 4.3 实验结果 | 第83-97页 |
| 4.3.1 MBP联合BCG免疫对野生小鼠DC细胞表面TLR2表达的影响 | 第83-84页 |
| 4.3.2 MBP联合BCG免疫对野生小鼠DC细胞表面TLR4表达的影响 | 第84-86页 |
| 4.3.3 MBP联合BCG体内免疫小鼠DC细胞共刺激分子表达的影响 | 第86-88页 |
| 4.3.4 TLR2对MBP联合BCG在体内促进DC细胞CD80、CD86和MHC-II分子的表达的影响 | 第88-91页 |
| 4.3.5 TLR4对MBP联合BCG体内免疫小鼠DC细胞共刺激分子表达的影响 | 第91-95页 |
| 4.3.6 TLR2/TLR4对MBP联合BCG体内免疫小鼠后CD4~+T淋巴细胞增殖的影响 | 第95-96页 |
| 4.3.7 MBP联合BCG免疫对CD4~+T细胞IFN-γ基因表达的影响 | 第96-97页 |
| 4.4 讨论 | 第97-99页 |
| 4.5 小结 | 第99-101页 |
| 第5章 结论 | 第101-103页 |
| 参考文献 | 第103-113页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第113-115页 |
| 致谢 | 第115页 |
