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FISH和Q-PCR技术在生物地浸样品分析中的应用

摘要第4-5页
Abstract第5页
1. 绪论第10-18页
    1.1 生物冶金的现状及前景第10页
        1.1.1 生物冶金技术的概念及优缺点第10页
        1.1.2 生物冶金的前景与挑战第10页
    1.2 冶金微生物及其作用机理第10-13页
        1.2.1 生物冶金中主要微生物种类第10-12页
        1.2.2 冶金微生物的作用机理第12-13页
    1.3 传统的冶金微生物组成的研究方法第13页
    1.4 荧光原位杂交技术概述第13-15页
        1.4.1 原理第13页
        1.4.2 特点第13-14页
        1.4.3 荧光原位杂交技术研究进展第14页
        1.4.4 荧光原位杂交技术的应用进展第14页
        1.4.5 FISH技术的应用前景及展望第14-15页
    1.5 实时荧光定量PCR技术概述第15-16页
        1.5.1 原理第15页
        1.5.2 特点第15页
        1.5.3 荧光定量PCR技术在环境微生物研究领域的应用第15-16页
        1.5.4 实时荧光定量PCR技术的前景及展望第16页
    1.6 课题研究目的、意义及内容第16-18页
        1.6.1 研究目的及意义第16-17页
        1.6.2 研究内容第17-18页
2. 实验材料及实验方法第18-38页
    2.1 主要试剂、仪器及耗材、材料第18-24页
        2.1.1 主要试剂第18-20页
        2.1.2 主要仪器及耗材第20页
        2.1.3 溶液配制第20-24页
    2.2 实验方法第24-38页
        2.2.1 分析测试方法第24-25页
        2.2.2 活性实验方法第25页
        2.2.3 极限稀释方法第25-26页
        2.2.4 菌株鉴定方法第26-28页
        2.2.5 混合菌群群落结构分析方法第28-32页
        2.2.6 荧光原位杂交技术第32-33页
        2.2.7 DAPI染色第33页
        2.2.8 荧光定量PCR技术第33-38页
3. 样品铁氧化活性研究以及初始菌群结构的确定第38-46页
    3.1 样品铁氧化活性研究第38-42页
        3.1.1 样品来源第38-40页
        3.1.2 样品活性实验第40-41页
        3.1.3 样品MPN实验第41-42页
    3.2 菌株鉴定第42-43页
        3.2.1 复壮第42页
        3.2.2 菌株DNA的提取及鉴定第42-43页
    3.3 群落结构分析第43页
    3.4 本章小结第43-46页
4. K-JCK-22样品的Q-PCR技术定量分析研究第46-56页
    4.1 At.f重组质粒标准品的制备第46-48页
        4.1.1 DNA的提取及标准品片段的扩增第46页
        4.1.2 At.f重组阳性质粒的构建第46-47页
        4.1.3 标准曲线的建立第47页
        4.1.4 荧光定量PCR的特异性实验第47-48页
    4.2 重组质粒制备结果分析第48-50页
        4.2.1 重组质粒标准品的PCR鉴定第48页
        4.2.2 重组质粒标准品的酶切鉴定第48页
        4.2.3 测序鉴定第48-49页
        4.2.4 荧光定量PCR方法的特异性实验结果第49-50页
    4.3 At.f Plasmid标准曲线的建立第50-51页
    4.4 运用荧光定量PCR技术对K-JCK-22样品的检测第51-55页
        4.4.1 样品总DNA的提取第51页
        4.4.2 对样品中At.f、At.t和L.f数量的检测第51-52页
        4.4.3 样品荧光定量PCR技术方法检测结果第52-55页
    4.5 本章小结第55-56页
5. K-JCK-22样品的FISH技术定量分析研究第56-60页
    5.1 细菌FISH技术分析方法第56页
    5.2 荧光原位杂交技术的特异性实验第56-58页
    5.3 运用荧光原位杂交检测方法对样品的检测第58-59页
    5.4 本章小结第59-60页
6. 结论及存在问题与建议第60-62页
    6.1 结论第60-61页
    6.2 存在的问题与建议第61-62页
致谢第62-64页
参考文献第64-68页
附录第68-69页

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