摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
1. 绪论 | 第10-18页 |
1.1 生物冶金的现状及前景 | 第10页 |
1.1.1 生物冶金技术的概念及优缺点 | 第10页 |
1.1.2 生物冶金的前景与挑战 | 第10页 |
1.2 冶金微生物及其作用机理 | 第10-13页 |
1.2.1 生物冶金中主要微生物种类 | 第10-12页 |
1.2.2 冶金微生物的作用机理 | 第12-13页 |
1.3 传统的冶金微生物组成的研究方法 | 第13页 |
1.4 荧光原位杂交技术概述 | 第13-15页 |
1.4.1 原理 | 第13页 |
1.4.2 特点 | 第13-14页 |
1.4.3 荧光原位杂交技术研究进展 | 第14页 |
1.4.4 荧光原位杂交技术的应用进展 | 第14页 |
1.4.5 FISH技术的应用前景及展望 | 第14-15页 |
1.5 实时荧光定量PCR技术概述 | 第15-16页 |
1.5.1 原理 | 第15页 |
1.5.2 特点 | 第15页 |
1.5.3 荧光定量PCR技术在环境微生物研究领域的应用 | 第15-16页 |
1.5.4 实时荧光定量PCR技术的前景及展望 | 第16页 |
1.6 课题研究目的、意义及内容 | 第16-18页 |
1.6.1 研究目的及意义 | 第16-17页 |
1.6.2 研究内容 | 第17-18页 |
2. 实验材料及实验方法 | 第18-38页 |
2.1 主要试剂、仪器及耗材、材料 | 第18-24页 |
2.1.1 主要试剂 | 第18-20页 |
2.1.2 主要仪器及耗材 | 第20页 |
2.1.3 溶液配制 | 第20-24页 |
2.2 实验方法 | 第24-38页 |
2.2.1 分析测试方法 | 第24-25页 |
2.2.2 活性实验方法 | 第25页 |
2.2.3 极限稀释方法 | 第25-26页 |
2.2.4 菌株鉴定方法 | 第26-28页 |
2.2.5 混合菌群群落结构分析方法 | 第28-32页 |
2.2.6 荧光原位杂交技术 | 第32-33页 |
2.2.7 DAPI染色 | 第33页 |
2.2.8 荧光定量PCR技术 | 第33-38页 |
3. 样品铁氧化活性研究以及初始菌群结构的确定 | 第38-46页 |
3.1 样品铁氧化活性研究 | 第38-42页 |
3.1.1 样品来源 | 第38-40页 |
3.1.2 样品活性实验 | 第40-41页 |
3.1.3 样品MPN实验 | 第41-42页 |
3.2 菌株鉴定 | 第42-43页 |
3.2.1 复壮 | 第42页 |
3.2.2 菌株DNA的提取及鉴定 | 第42-43页 |
3.3 群落结构分析 | 第43页 |
3.4 本章小结 | 第43-46页 |
4. K-JCK-22样品的Q-PCR技术定量分析研究 | 第46-56页 |
4.1 At.f重组质粒标准品的制备 | 第46-48页 |
4.1.1 DNA的提取及标准品片段的扩增 | 第46页 |
4.1.2 At.f重组阳性质粒的构建 | 第46-47页 |
4.1.3 标准曲线的建立 | 第47页 |
4.1.4 荧光定量PCR的特异性实验 | 第47-48页 |
4.2 重组质粒制备结果分析 | 第48-50页 |
4.2.1 重组质粒标准品的PCR鉴定 | 第48页 |
4.2.2 重组质粒标准品的酶切鉴定 | 第48页 |
4.2.3 测序鉴定 | 第48-49页 |
4.2.4 荧光定量PCR方法的特异性实验结果 | 第49-50页 |
4.3 At.f Plasmid标准曲线的建立 | 第50-51页 |
4.4 运用荧光定量PCR技术对K-JCK-22样品的检测 | 第51-55页 |
4.4.1 样品总DNA的提取 | 第51页 |
4.4.2 对样品中At.f、At.t和L.f数量的检测 | 第51-52页 |
4.4.3 样品荧光定量PCR技术方法检测结果 | 第52-55页 |
4.5 本章小结 | 第55-56页 |
5. K-JCK-22样品的FISH技术定量分析研究 | 第56-60页 |
5.1 细菌FISH技术分析方法 | 第56页 |
5.2 荧光原位杂交技术的特异性实验 | 第56-58页 |
5.3 运用荧光原位杂交检测方法对样品的检测 | 第58-59页 |
5.4 本章小结 | 第59-60页 |
6. 结论及存在问题与建议 | 第60-62页 |
6.1 结论 | 第60-61页 |
6.2 存在的问题与建议 | 第61-62页 |
致谢 | 第62-64页 |
参考文献 | 第64-68页 |
附录 | 第68-69页 |