| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第11-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-18页 |
| 1.1 概述 | 第12页 |
| 1.2 PRRS病原及分子生物学特征 | 第12-13页 |
| 1.3 PRRSV感染与免疫机制 | 第13-14页 |
| 1.4 PRRSV感染性克隆构建策略 | 第14-15页 |
| 1.5 PRRSV反向遗传学的应用 | 第15-16页 |
| 1.6 PRRSV防治 | 第16-17页 |
| 1.7 研究目的及意义 | 第17-18页 |
| 第二章 通过全基因组序列合成构建美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒感染性克隆 | 第18-31页 |
| 2.1 材料和方法 | 第18-26页 |
| 2.1.1 病毒株、细胞和抗体 | 第18页 |
| 2.1.2 试剂及仪器 | 第18页 |
| 2.1.3 基因合成 | 第18-19页 |
| 2.1.4 全长cDNA拼接 | 第19-22页 |
| 2.1.5 全长质粒线性化 | 第22-23页 |
| 2.1.6 DNA体外转录 | 第23页 |
| 2.1.7 病毒拯救与传代 | 第23-24页 |
| 2.1.8 拯救病毒的鉴定 | 第24-25页 |
| 2.1.9 亲本病毒与拯救病毒复制能力比较 | 第25-26页 |
| 2.2 结果 | 第26-29页 |
| 2.2.1 PRRSV /GSWW/15 株基因组全长cDNA质粒的鉴定 | 第26-27页 |
| 2.2.2 病毒拯救与传代 | 第27页 |
| 2.2.3 拯救病毒的鉴定 | 第27-28页 |
| 2.2.4 亲本病毒与拯救病毒生长曲线比较 | 第28-29页 |
| 2.3 讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 PRRSV /GSWW/15 株NSP2缺失标记研究 | 第31-40页 |
| 3.1 材料与方法 | 第31-35页 |
| 3.1.1 病毒株、细胞和抗体 | 第31页 |
| 3.1.2 试剂及仪器 | 第31页 |
| 3.1.3 NSP2缺失区域及引物设计 | 第31-33页 |
| 3.1.4 NSP2缺失质粒的构建 | 第33-34页 |
| 3.1.5 NSP2缺失质粒的线性化及体外转录 | 第34页 |
| 3.1.6 NSP2缺失病毒拯救与传代 | 第34页 |
| 3.1.7 拯救病毒的鉴定 | 第34页 |
| 3.1.8 亲本病毒与拯救病毒复制能力比较 | 第34-35页 |
| 3.2 结果 | 第35-38页 |
| 3.2.1 融合PCR扩增结果 | 第35-36页 |
| 3.2.2 重组质粒鉴定 | 第36页 |
| 3.2.3 缺失病毒拯救与传代 | 第36页 |
| 3.2.4 拯救缺失病毒的鉴定 | 第36-38页 |
| 3.2.5 亲本病毒与缺失病毒生长曲线比较 | 第38页 |
| 3.3 讨论 | 第38-40页 |
| 第四章 全文结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 作者简介 | 第48页 |
