英文缩略词表 | 第7-10页 |
中文摘要 | 第10-13页 |
英文摘要 | 第13-16页 |
1.前言 | 第17-20页 |
2.实验材料 | 第20-24页 |
2.1 实验动物 | 第20页 |
2.2 实验试剂 | 第20-21页 |
2.3 仪器与设备 | 第21-22页 |
2.4 溶液的配制 | 第22-24页 |
3.实验方法 | 第24-38页 |
3.1 佐剂性关节炎(AA)大鼠模型的建立 | 第24页 |
3.2 AA大鼠模型的确立 | 第24-25页 |
3.2.1 多发性关节炎指数(PI)评分 | 第24页 |
3.2.2 膝关节组织病理学检查 | 第24-25页 |
3.3 大鼠滑膜细胞的分离与培养 | 第25-27页 |
3.3.1 实验准备 | 第25-26页 |
3.3.2 大鼠滑膜组织的提取 | 第26页 |
3.3.3 大鼠FLS的分离 | 第26页 |
3.3.4 大鼠FLS的培养与传代 | 第26-27页 |
3.4 lipofectamine~TM 2000试剂瞬时转染实验 | 第27-28页 |
3.5 MTT比色法测细胞增殖 | 第28页 |
3.6 Q-PCR | 第28-33页 |
3.6.1 细胞总RNA的提取 | 第28-29页 |
3.6.2 cDNA的合成 | 第29-30页 |
3.6.3 Real Time PCR反应 | 第30-32页 |
3.6.4 MicroRNA的定量 | 第32-33页 |
3.7 Western Blot | 第33-38页 |
3.7.1 细胞总蛋白的提取 | 第33页 |
3.7.2 BCA法蛋白定量 | 第33-34页 |
3.7.3 SDS-聚丙烯酸胺凝胶电泳 | 第34-35页 |
3.7.4 电转移 | 第35-36页 |
3.7.5 免疫反应 | 第36-37页 |
3.7.6 ECL显色 | 第37页 |
3.7.7 结果分析 | 第37-38页 |
4.统计学分析 | 第38页 |
5.实验结果 | 第38-51页 |
5.1 AA模型的确立 | 第38-39页 |
5.2 AA大鼠FLS中Wnt/β-catenin信号通路的变化 | 第39-40页 |
5.3 APC在FLS活化过程中的作用 | 第40-44页 |
5.3.1 AA大鼠FLS中APC的表达 | 第40-41页 |
5.3.2 沉默APC对AA大鼠FLS增殖的影响 | 第41页 |
5.3.3 沉默APC对AA大鼠FLS中Wnt/β-catenin信号通路的影响 | 第41-44页 |
5.4 APC的上游靶点预测 | 第44页 |
5.5 miRNA-203在FLS活化过程中的作用 | 第44-51页 |
5.5.1 AA大鼠FLS中miR-203的表达 | 第44-45页 |
5.5.2 过表达miR-203对大鼠FLS的影响 | 第45-48页 |
5.5.3 沉默miR-203对大鼠FLS的影响 | 第48-50页 |
5.5.4 miR-203与APC之间的靶向关系 | 第50-51页 |
6.讨论 | 第51-54页 |
7.结论 | 第54页 |
参考文献 | 第54-59页 |
附录 | 第59-61页 |
致谢 | 第61-63页 |
综述 | 第63-81页 |
参考文献 | 第73-81页 |