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microRNA-203通过APC介导活化Wnt/β-catenin信号通路在佐剂性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞中的调控作用及机制研究

英文缩略词表第7-10页
中文摘要第10-13页
英文摘要第13-16页
1.前言第17-20页
2.实验材料第20-24页
    2.1 实验动物第20页
    2.2 实验试剂第20-21页
    2.3 仪器与设备第21-22页
    2.4 溶液的配制第22-24页
3.实验方法第24-38页
    3.1 佐剂性关节炎(AA)大鼠模型的建立第24页
    3.2 AA大鼠模型的确立第24-25页
        3.2.1 多发性关节炎指数(PI)评分第24页
        3.2.2 膝关节组织病理学检查第24-25页
    3.3 大鼠滑膜细胞的分离与培养第25-27页
        3.3.1 实验准备第25-26页
        3.3.2 大鼠滑膜组织的提取第26页
        3.3.3 大鼠FLS的分离第26页
        3.3.4 大鼠FLS的培养与传代第26-27页
    3.4 lipofectamine~TM 2000试剂瞬时转染实验第27-28页
    3.5 MTT比色法测细胞增殖第28页
    3.6 Q-PCR第28-33页
        3.6.1 细胞总RNA的提取第28-29页
        3.6.2 cDNA的合成第29-30页
        3.6.3 Real Time PCR反应第30-32页
        3.6.4 MicroRNA的定量第32-33页
    3.7 Western Blot第33-38页
        3.7.1 细胞总蛋白的提取第33页
        3.7.2 BCA法蛋白定量第33-34页
        3.7.3 SDS-聚丙烯酸胺凝胶电泳第34-35页
        3.7.4 电转移第35-36页
        3.7.5 免疫反应第36-37页
        3.7.6 ECL显色第37页
        3.7.7 结果分析第37-38页
4.统计学分析第38页
5.实验结果第38-51页
    5.1 AA模型的确立第38-39页
    5.2 AA大鼠FLS中Wnt/β-catenin信号通路的变化第39-40页
    5.3 APC在FLS活化过程中的作用第40-44页
        5.3.1 AA大鼠FLS中APC的表达第40-41页
        5.3.2 沉默APC对AA大鼠FLS增殖的影响第41页
        5.3.3 沉默APC对AA大鼠FLS中Wnt/β-catenin信号通路的影响第41-44页
    5.4 APC的上游靶点预测第44页
    5.5 miRNA-203在FLS活化过程中的作用第44-51页
        5.5.1 AA大鼠FLS中miR-203的表达第44-45页
        5.5.2 过表达miR-203对大鼠FLS的影响第45-48页
        5.5.3 沉默miR-203对大鼠FLS的影响第48-50页
        5.5.4 miR-203与APC之间的靶向关系第50-51页
6.讨论第51-54页
7.结论第54页
参考文献第54-59页
附录第59-61页
致谢第61-63页
综述第63-81页
    参考文献第73-81页

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