| 摘要 | 第4-9页 |
| ABSTRACT | 第9-14页 |
| 引言 | 第18-21页 |
| 第一章 文献综述 | 第21-35页 |
| 1.1 甲壳动物蜕壳周期的研究 | 第21-22页 |
| 1.2 甲壳动物蜕壳相关组织的研究 | 第22-23页 |
| 1.3 蜕皮抑制激素（MIH） | 第23-27页 |
| 1.3.1 MIH基因的结构与作用 | 第23-24页 |
| 1.3.2 MIH调控蜕皮激素分泌的相关机制研究 | 第24-25页 |
| 1.3.3 MIH基因在蜕壳周期内表达量的变化 | 第25-26页 |
| 1.3.4 MIH基因对Y-器官的作用 | 第26-27页 |
| 1.4 蜕皮激素（EH） | 第27-32页 |
| 1.4.1 蜕皮激素的合成 | 第27-29页 |
| 1.4.2 蜕皮激素和EcR基因的转录调控 | 第29-31页 |
| 1.4.3 EcR和RXR基因的相关研究 | 第31-32页 |
| 1.5 甲壳动物蜕壳生长的研究进展 | 第32-33页 |
| 1.5.1 转录组测序在甲壳动物蜕壳生长研究中的应用 | 第32页 |
| 1.5.2 RNA干扰技术 | 第32-33页 |
| 1.6 研究展望 | 第33-35页 |
| 第二章 中华绒螯蟹蜕壳周期内的基因表达特征研究 | 第35-53页 |
| 2.1 材料与方法 | 第36-41页 |
| 2.1.1 取材 | 第36页 |
| 2.1.2 RNA的提取和RNA-Seq文库的准备 | 第36-38页 |
| 2.1.3 转录组序列的组装 | 第38页 |
| 2.1.4 转录组序列的注释 | 第38-39页 |
| 2.1.5 差异表达分析 | 第39页 |
| 2.1.6 qPCR验证 | 第39-41页 |
| 2.2 结果 | 第41-50页 |
| 2.2.1 转录组的组装 | 第41-43页 |
| 2.2.2 转录组的注释 | 第43-45页 |
| 2.2.3 不同蜕壳阶段的差异表达基因 | 第45-48页 |
| 2.2.4 qPCR验证 | 第48-50页 |
| 2.3 讨论 | 第50-52页 |
| 2.3.1 中华绒螯蟹的转录组组装 | 第50页 |
| 2.3.2 不同蜕壳阶段的转录组数据分析 | 第50-52页 |
| 2.4 小结 | 第52-53页 |
| 第三章 中华绒螯蟹内参基因的稳定性评估 | 第53-70页 |
| 3.1 材料和方法 | 第54-58页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第54页 |
| 3.1.2 RNA的提取和cDNA的合成 | 第54-56页 |
| 3.1.3 内参基因的选择和引物设计 | 第56-58页 |
| 3.1.4 荧光定量PCR (qPCR) | 第58页 |
| 3.1.5 内参基因表达稳定性分析 | 第58页 |
| 3.1.6 内参基因筛选结果的验证 | 第58页 |
| 3.2 结果与分析 | 第58-67页 |
| 3.2.1 引物的扩增效率及特异性 | 第58-59页 |
| 3.2.2 内参基因的表达扩增值 | 第59-63页 |
| 3.2.3 内参基因的表达稳定性分析 | 第63-66页 |
| 3.2.4 内参基因筛选结果的验证 | 第66-67页 |
| 3.3 讨论 | 第67-69页 |
| 3.4 本章小结 | 第69-70页 |
| 第四章 EcR与MIH基因在中华绒螯蟹蜕壳过程中的时空表达特征分析 | 第70-89页 |
| 4.1 材料与方法 | 第71-79页 |
| 4.1.1 EcR基因和MIH基因的原核表达 | 第71-75页 |
| 4.1.2 EcR和MIH基因的多克隆抗体制备 | 第75页 |
| 4.1.3 Western blot | 第75-77页 |
| 4.1.4 荧光免疫组化 | 第77-78页 |
| 4.1.5 ELISA法测定蜕皮激素含量 | 第78-79页 |
| 4.2 结果 | 第79-85页 |
| 4.2.1 MIH与EcR基因的原核表达 | 第79-80页 |
| 4.2.2 不同组织中MIH与EcR基因的蛋白水平表达分析 | 第80-81页 |
| 4.2.3 MIH基因在眼柄组织中的荧光免疫组化分析 | 第81-82页 |
| 4.2.4 EcR基因在肌肉组织中的荧光免疫组化分析 | 第82-84页 |
| 4.2.5 不同蜕壳阶段中EcR与MIH的蛋白水平表达分析 | 第84页 |
| 4.2.6 蜕壳周期内蜕皮激素（EH）含量的变化 | 第84-85页 |
| 4.3 讨论 | 第85-88页 |
| 4.4 本章小结 | 第88-89页 |
| 第五章 EcR与MIH基因的功能互作研究 | 第89-103页 |
| 5.1 材料与方法 | 第89-93页 |
| 5.1.1 实验河蟹的来源与饲养 | 第89-90页 |
| 5.1.2 RNAi实验 | 第90-92页 |
| 5.1.2.1 中华绒螯蟹MIH与EcR基因dsRNA的引物设计 | 第90-91页 |
| 5.1.2.2 MIH和EcR基因干扰片段的扩增 | 第91页 |
| 5.1.2.3 EcR和MIH基因dsRNA的制备 | 第91-92页 |
| 5.1.2.4 dsRNA的注射及MIH与EcR基因敲减效率的检测 | 第92页 |
| 5.1.3 MIH重组蛋白的获得 | 第92-93页 |
| 5.1.4 MIH重组蛋白和抗体的注射 | 第93页 |
| 5.2 结果与分析 | 第93-99页 |
| 5.2.1 EcR与MIH基因敲减效率检测 | 第93页 |
| 5.2.2 敲减EcR基因对MIH基因的表达影响 | 第93页 |
| 5.2.3 敲减MIH基因对EcR基因的表达影响 | 第93-95页 |
| 5.2.4 注射MIH抗体和重组蛋白对MIH基因的表达影响 | 第95-96页 |
| 5.2.5 注射MIH抗体和重组蛋白对EcR基因的表达影响 | 第96-97页 |
| 5.2.6 在蜕壳前期敲减EcR和MIH基因对河蟹蜕壳的影响 | 第97-98页 |
| 5.2.7 在蜕壳后期持续敲减EcR和MIH基因及注射MIH抗体和重组蛋白对河蟹蜕壳的影响 | 第98-99页 |
| 5.3 讨论 | 第99-101页 |
| 5.4 本章小结 | 第101-103页 |
| 全文小结 | 第103-105页 |
| 展望 | 第105-107页 |
| 参考文献 | 第107-129页 |
| 博士期间科研成果及获奖情况 | 第129-130页 |
| 致谢 | 第130-132页 |
