| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 第一章 TLR7受体及其信号通路在SLE中的研究进展 | 第15-20页 |
| 1.1 SLE的研究概况 | 第15-16页 |
| 1.2 SLE与B细胞 | 第16-18页 |
| 1.3 TLR7与SLE | 第18页 |
| 1.4 TLR7与B细胞 | 第18页 |
| 1.5 TLR7的阻断剂对小鼠SLE模型的治疗 | 第18-20页 |
| 第二章 SLE活动期患者B细胞芯片差异表达基因的分析 | 第20-35页 |
| 2.1 引言 | 第20页 |
| 2.2 实验材料 | 第20-21页 |
| 2.2.1 实验对象 | 第20-21页 |
| 2.2.2 主要实验试剂 | 第21页 |
| 2.2.3 实验仪器 | 第21页 |
| 2.3 实验方法 | 第21-26页 |
| 2.3.1 人外周血B细胞的分离纯化 | 第21-22页 |
| 2.3.2 总RNA的提取和纯化 | 第22-23页 |
| 2.3.3 cDNA的合成和纯化(用来进行芯片杂交) | 第23页 |
| 2.3.4 芯片杂交 | 第23-24页 |
| 2.3.5 差异基因的生物信息学分析 | 第24-25页 |
| 2.3.6 cDNA的合成 | 第25页 |
| 2.3.7 小鼠脾脏B细胞的分离纯化 | 第25-26页 |
| 2.3.8 细胞培养 | 第26页 |
| 2.3.9 实时荧光定量PCR | 第26页 |
| 2.4 实验结果 | 第26-33页 |
| 2.4.1 差异表达基因聚类分析 | 第26-28页 |
| 2.4.2 基因芯片结果验证 | 第28-29页 |
| 2.4.3 GO term和GO tree分析 | 第29-31页 |
| 2.4.5 差异基因GO pathway分析 | 第31页 |
| 2.4.6 差异表达基因间相互作用关系网络 | 第31-32页 |
| 2.4.7 SLE患者和狼疮小鼠B细胞中CCND3的表达均升高 | 第32-33页 |
| 2.5 讨论 | 第33-35页 |
| 第三章 TLR7通路调控B细胞CCND3的分子机制 | 第35-50页 |
| 3.1 引言 | 第35页 |
| 3.2 实验材料 | 第35-36页 |
| 3.2.1 实验对象 | 第35页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第35-36页 |
| 3.2.3 主要仪器设备 | 第36页 |
| 3.3 实验方法 | 第36-40页 |
| 3.3.1 小鼠脾脏B细胞的分离纯化与培养 | 第36-37页 |
| 3.3.2 RNA的提取 | 第37页 |
| 3.3.3 cDNA的合成 | 第37页 |
| 3.3.4 实时定量PCR | 第37页 |
| 3.3.5 lipo2000脂质体转染实验 | 第37页 |
| 3.3.6 western blot | 第37-38页 |
| 3.3.7 luciferase实验 | 第38-39页 |
| 3.3.8 流式细胞术 | 第39页 |
| 3.3.9 小鼠肾脏HE染色 | 第39-40页 |
| 3.4 结果 | 第40-48页 |
| 3.4.1 激活TLR7通路能够上调CCND3在B细胞中的表达 | 第40-41页 |
| 3.4.2 激活TLR7通路能够下调miR-15b在B细胞中的表达 | 第41-42页 |
| 3.4.3 MiR-15b在活动期SLE和狼疮小鼠B细胞中的表达量均降低 | 第42-43页 |
| 3.4.4 MiR-15b能够直接靶向CCND3的3'-UTR | 第43-45页 |
| 3.4.5 咪喹莫特诱导的狼疮模型的构建 | 第45-48页 |
| 3.4.6 CCND3在咪喹莫特诱导的狼疮模型B细胞中表达上调,而miR-15b在该模型B细胞中表达下调 | 第48页 |
| 3.5 讨论 | 第48-50页 |
| 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-61页 |
| 附录 | 第61-62页 |
| 硕士期间发表及待发表的论文 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
