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美洲大蠊生殖发育相关基因的筛选、克隆和鉴定及适应性进化分析

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
第一章 绪论第10-24页
    1.1 生殖发育相关基因研究第10-15页
        1.1.1 卵巢发育中重要的基因第10-13页
        1.1.2 精巢发育中几个主要基因第13-15页
    1.2 翅发育相关基因的研究第15-19页
        1.2.1 昆虫翅发育的概述第15-16页
        1.2.2 果蝇翅发育机制的研究第16-17页
        1.2.3 昆虫翅发育相关基因的研究第17-19页
    1.3 美洲大蠊概述第19-21页
        1.3.1 蜚蠊简介第19页
        1.3.2 美洲大蠊的生物学特性第19-20页
        1.3.3 美洲大蠊的生态学研究第20页
        1.3.4 美洲大蠊的利用第20-21页
    1.4 本研究的目的和意义第21-22页
    1.5 本研究创新点第22-24页
第二章 抑制消减杂交鉴定美洲大蠊生殖差异基因及microRNA的识别第24-57页
    2.1 引言第24-26页
    2.2 材料与方法第26-42页
        2.2.1 材料第26-29页
        2.2.2 方法第29-42页
    2.3 结果第42-52页
        2.3.1 总RNA的提取及mRNA的纯化第42-43页
        2.3.2 总RNA浓度和纯度检测结果第43页
        2.3.3 RsaⅠ酶消化结果检测第43-44页
        2.3.4 消减效率检测第44页
        2.3.5 消减文库的菌落PCR检测结果第44-45页
        2.3.6 消减文库阳性克隆的测序结果第45页
        2.3.7 EST序列同源性分析第45-48页
        2.3.8 Gene Ontology分类分析第48-49页
        2.3.9 美洲大蠊生殖发育相关基因在卵巢、精巢中的表达差异第49-50页
        2.3.10 系统发生分析第50-51页
        2.3.11 MicroRNA的预测第51-52页
        2.3.12 MicroRNA的验证第52页
    2.4 讨论第52-57页
        2.4.1 美洲大蠊雌雄生殖差异基因的表达第52-55页
        2.4.2 从EST序列中预测microRNA第55-57页
第三章 美洲大蠊精巢组织高通量测序分析第57-81页
    3.1 引言第57-59页
    3.2 实验材料和方法第59-67页
        3.2.1 材料第59-60页
        3.2.2 方法第60-67页
    3.3 结果第67-78页
        3.3.1 高通量测序样品的制备第67页
        3.3.2 原始测序数据统计第67页
        3.3.3 原始测序数据质控第67-69页
        3.3.4 原始数据去杂第69页
        3.3.5 拼接及拼接结果统计第69-71页
        3.3.6 拼接结果注释第71-72页
        3.3.7 单核苷酸多态性(SNP)分析第72页
        3.3.8 微卫星标记的开发和分析第72-76页
        3.3.9 微卫星标记的检测第76-77页
        3.3.10 雄性特异生殖基因在卵巢和精巢中的表达差异鉴定第77-78页
    3.4 讨论第78-81页
第四章 美洲大蠊翅发育wingless基因全长克隆及功能研究第81-123页
    4.1 引言第81-83页
    4.2 材料方法第83-97页
        4.2.1 材料和试剂第84-87页
        4.2.2 方法第87-97页
    4.3 结果第97-118页
        4.3.1 美洲大蠊雄虫胸部组织总RNA的提取第97页
        4.3.2 wg基因中间片段的克隆第97-98页
        4.3.3 wg基因全长扩增第98-99页
        4.3.4 wg基因全长序列分析第99-103页
        4.3.5 系统发生分析第103-104页
        4.3.6 PaWg蛋白质基本性质分析第104-111页
        4.3.7 含T7启动子的DNA模板的制备第111-112页
        4.3.8 美洲大蠊wg基因dsRNA的制备第112-113页
        4.3.9 wg基因dsRNA注射虫体第113-115页
        4.3.10 美洲大蠊wg基因体外转录(探针的制备)第115-116页
        4.3.11 美洲大蠊胚胎的原位杂交第116-117页
        4.3.12 wg基因在昆虫中的适应性进化分析第117-118页
    4.4 讨论第118-123页
        4.4.1 wg基因对美洲大蠊翅发育的影响第119页
        4.4.2 wg基因对美洲大蠊卵巢发育的影响第119-120页
        4.4.3 wg基因在美洲大蠊胚胎发育中的功能第120-122页
        4.4.4 wg基因在昆虫中的适应性进化分析第122-123页
总结与展望第123-125页
附录一第125-129页
附录二第129-131页
附录三第131-133页
参考文献第133-156页
在读期间发表的学术论文及研究成果第156-157页
致谢第157-158页

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