摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 绪论 | 第10-24页 |
1.1 生殖发育相关基因研究 | 第10-15页 |
1.1.1 卵巢发育中重要的基因 | 第10-13页 |
1.1.2 精巢发育中几个主要基因 | 第13-15页 |
1.2 翅发育相关基因的研究 | 第15-19页 |
1.2.1 昆虫翅发育的概述 | 第15-16页 |
1.2.2 果蝇翅发育机制的研究 | 第16-17页 |
1.2.3 昆虫翅发育相关基因的研究 | 第17-19页 |
1.3 美洲大蠊概述 | 第19-21页 |
1.3.1 蜚蠊简介 | 第19页 |
1.3.2 美洲大蠊的生物学特性 | 第19-20页 |
1.3.3 美洲大蠊的生态学研究 | 第20页 |
1.3.4 美洲大蠊的利用 | 第20-21页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
1.5 本研究创新点 | 第22-24页 |
第二章 抑制消减杂交鉴定美洲大蠊生殖差异基因及microRNA的识别 | 第24-57页 |
2.1 引言 | 第24-26页 |
2.2 材料与方法 | 第26-42页 |
2.2.1 材料 | 第26-29页 |
2.2.2 方法 | 第29-42页 |
2.3 结果 | 第42-52页 |
2.3.1 总RNA的提取及mRNA的纯化 | 第42-43页 |
2.3.2 总RNA浓度和纯度检测结果 | 第43页 |
2.3.3 RsaⅠ酶消化结果检测 | 第43-44页 |
2.3.4 消减效率检测 | 第44页 |
2.3.5 消减文库的菌落PCR检测结果 | 第44-45页 |
2.3.6 消减文库阳性克隆的测序结果 | 第45页 |
2.3.7 EST序列同源性分析 | 第45-48页 |
2.3.8 Gene Ontology分类分析 | 第48-49页 |
2.3.9 美洲大蠊生殖发育相关基因在卵巢、精巢中的表达差异 | 第49-50页 |
2.3.10 系统发生分析 | 第50-51页 |
2.3.11 MicroRNA的预测 | 第51-52页 |
2.3.12 MicroRNA的验证 | 第52页 |
2.4 讨论 | 第52-57页 |
2.4.1 美洲大蠊雌雄生殖差异基因的表达 | 第52-55页 |
2.4.2 从EST序列中预测microRNA | 第55-57页 |
第三章 美洲大蠊精巢组织高通量测序分析 | 第57-81页 |
3.1 引言 | 第57-59页 |
3.2 实验材料和方法 | 第59-67页 |
3.2.1 材料 | 第59-60页 |
3.2.2 方法 | 第60-67页 |
3.3 结果 | 第67-78页 |
3.3.1 高通量测序样品的制备 | 第67页 |
3.3.2 原始测序数据统计 | 第67页 |
3.3.3 原始测序数据质控 | 第67-69页 |
3.3.4 原始数据去杂 | 第69页 |
3.3.5 拼接及拼接结果统计 | 第69-71页 |
3.3.6 拼接结果注释 | 第71-72页 |
3.3.7 单核苷酸多态性(SNP)分析 | 第72页 |
3.3.8 微卫星标记的开发和分析 | 第72-76页 |
3.3.9 微卫星标记的检测 | 第76-77页 |
3.3.10 雄性特异生殖基因在卵巢和精巢中的表达差异鉴定 | 第77-78页 |
3.4 讨论 | 第78-81页 |
第四章 美洲大蠊翅发育wingless基因全长克隆及功能研究 | 第81-123页 |
4.1 引言 | 第81-83页 |
4.2 材料方法 | 第83-97页 |
4.2.1 材料和试剂 | 第84-87页 |
4.2.2 方法 | 第87-97页 |
4.3 结果 | 第97-118页 |
4.3.1 美洲大蠊雄虫胸部组织总RNA的提取 | 第97页 |
4.3.2 wg基因中间片段的克隆 | 第97-98页 |
4.3.3 wg基因全长扩增 | 第98-99页 |
4.3.4 wg基因全长序列分析 | 第99-103页 |
4.3.5 系统发生分析 | 第103-104页 |
4.3.6 PaWg蛋白质基本性质分析 | 第104-111页 |
4.3.7 含T7启动子的DNA模板的制备 | 第111-112页 |
4.3.8 美洲大蠊wg基因dsRNA的制备 | 第112-113页 |
4.3.9 wg基因dsRNA注射虫体 | 第113-115页 |
4.3.10 美洲大蠊wg基因体外转录(探针的制备) | 第115-116页 |
4.3.11 美洲大蠊胚胎的原位杂交 | 第116-117页 |
4.3.12 wg基因在昆虫中的适应性进化分析 | 第117-118页 |
4.4 讨论 | 第118-123页 |
4.4.1 wg基因对美洲大蠊翅发育的影响 | 第119页 |
4.4.2 wg基因对美洲大蠊卵巢发育的影响 | 第119-120页 |
4.4.3 wg基因在美洲大蠊胚胎发育中的功能 | 第120-122页 |
4.4.4 wg基因在昆虫中的适应性进化分析 | 第122-123页 |
总结与展望 | 第123-125页 |
附录一 | 第125-129页 |
附录二 | 第129-131页 |
附录三 | 第131-133页 |
参考文献 | 第133-156页 |
在读期间发表的学术论文及研究成果 | 第156-157页 |
致谢 | 第157-158页 |