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内生菌促进药用植物茅苍术挥发油积累的信号调控机制研究

摘要第3-4页
Abstract第4页
第1章 绪论第9-20页
    1.1 内生真菌调控药用植物活性成分的生物合成第9-15页
        1.1.1 调控药用植物活性成分生物合成的内生真菌诱导子第10-11页
        1.1.2 植物细胞次生代谢产物合成的信号调控规律第11-15页
    1.2 蛋白质组学及其主要研究进展第15-19页
        1.2.1 蛋白质组学相关技术第16-18页
        1.2.2 蛋白质组学在植物上的应用第18-19页
    1.3 展望第19-20页
第2章 内生菌诱导子的鉴定第20-29页
    2.1 材料与方法第20-23页
        2.1.1 真菌培养第20-21页
        2.1.2 诱导子的制备第21-22页
        2.1.3 胞外多糖的成分分析第22-23页
        2.1.4 诱导子活性检测第23页
    2.2 结果与分析第23-28页
        2.2.1 组分Ⅰ组分Ⅱ组分Ⅲ对苍术挥发油积累作用的比较第24页
        2.2.2 EPS的分离纯化第24-25页
        2.2.3 EPS成分鉴定第25-28页
    2.3 小结第28-29页
第3章 茉莉酸调节内生真菌诱导茅苍术挥发油积累的信号网络第29-43页
    3.1 材料与方法第29-32页
        3.1.1 试验材料和处理方法第30页
        3.1.2 真菌培养和接种第30页
        3.1.3 H_2O_2和NO测定第30-31页
        3.1.4 SA的测定第31页
        3.1.5 挥发油和茉莉酸的提取测定第31页
        3.1.6 实时定量RT-PCR分析第31-32页
        3.1.7 数据分析第32页
    3.2 结果第32-40页
        3.2.1 真菌诱导挥发油积累依赖JA第32-33页
        3.2.2 JA在NO和H_2O_2信号通路的下游起调控作用第33-37页
        3.2.3 JA和SA在调节真菌诱导挥发油积累中存在互补作用第37-39页
        3.2.4 真菌引起的倍半萜类生产依赖于JA的产生第39-40页
    3.3 讨论第40-43页
第4章 内生真菌诱导茅苍术挥发油积累依赖钙信号与油菜素内酯的互作第43-56页
    4.1 材料与方法第44-45页
        4.1.1 试验材料和处理方法第44页
        4.1.2 [Ca~(2+)]_(cyt)检测和CaM定量第44页
        4.1.3 油菜素内酯含量测定第44-45页
        4.1.4 实时定量PCR第45页
        4.1.5 NO含量测定第45页
        4.1.6 挥发油含量提取测定第45页
        4.1.7 数据分析第45页
    4.2 结果第45-54页
        4.2.1 真菌诱导挥发油积累依赖Ca~(2+)-CaM途径第45-48页
        4.2.2 BL参与真菌诱导挥发油积累第48-49页
        4.2.3 Ca~(2+)-CaM和BL的相互促进作用调节真菌诱导挥发油积累第49-52页
        4.2.4 NO参与Ca~(2+)-CaM途径调节真菌诱导挥发油积累第52-54页
    4.3 讨论第54-56页
第5章 一氧化氮和油菜素内酯依赖蛋白磷酸途径调节内生真菌诱导茅苍术挥发油积累第56-70页
    5.1 材料与方法第56-58页
        5.1.1 试验材料和处理方法第56-57页
        5.1.2 真菌培养和接种第57页
        5.1.3 BL的测定第57页
        5.1.4 NO含量测定第57页
        5.1.5 体内激酶活性分析第57-58页
        5.1.6 HMGR基因表达水平测定第58页
        5.1.7 挥发油提取及含量测定第58页
        5.1.8 数据分析第58页
    5.2 结果第58-68页
        5.2.1 真菌接种后茅苍术体内的总蛋白磷酸化水平及Ca~(2+)-依赖磷酸化水平第58-60页
        5.2.2 NO参与真菌AL12诱导的总蛋白磷酸化水平及Ca~(2+)-依赖磷酸化水平改变第60-62页
        5.2.3 BL参与真菌AL12诱导的总蛋白磷酸化水平及Ca~(2+)-依赖磷酸化水平改变第62-65页
        5.2.4 蛋白磷酸化调节AL12诱导的NO产生第65-67页
        5.2.5 蛋白磷酸化调节AL12诱导的茅苍术挥发油积累第67-68页
    5.3 讨论第68-70页
第6章 差异蛋白组学鉴定内生菌与宿主互作的功能蛋白第70-93页
    6.1 材料与方法第70-75页
        6.1.1 材料处理第70页
        6.1.2 蛋白质提取第70-71页
        6.1.3 试剂和相关仪器第71页
        6.1.4 相关试剂配制第71-72页
        6.1.5 双向电泳(2-DE)第72-74页
        6.1.6 凝胶图像分析第74页
        6.1.7 差异蛋白的处理及鉴定分析第74-75页
    6.2 结果与讨论第75-93页
        6.2.1 内生真菌接种茅苍术组培苗18天后的蛋白质表达变化第75-78页
        6.2.2 差异蛋白质谱鉴定和搜索第78-80页
        6.2.3 差异表达蛋白的类型与功能第80-82页
        6.2.4 讨论第82-93页
全文总结第93-97页
附录第97-101页
参考文献第101-118页
在读期间发表的学术论文及研究成果第118-119页
致谢第119页

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