| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 英文缩写词表 | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第10-21页 |
| ·F_1F_0-ATP 合成酶研究现状 | 第10-18页 |
| ·F_1F_0-ATP 合成酶的结构 | 第10-12页 |
| ·F_1F_0-ATP 合成酶的基因组成 | 第12-15页 |
| ·F_1F_0-ATP 合成酶的分布 | 第15页 |
| ·β-F1-ATPase 生物学特性 | 第15-18页 |
| ·基因功能研究方法 | 第18-21页 |
| ·基因转染技术 | 第18-19页 |
| ·RNA 干扰技术 | 第19-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-33页 |
| ·材料 | 第21-25页 |
| ·细胞株、菌株及质粒 | 第21-22页 |
| ·引物 | 第22-23页 |
| ·药品与试剂 | 第23-24页 |
| ·实验仪器 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-33页 |
| ·细胞总RNA 提取 | 第25页 |
| ·目的基因获得 | 第25-26页 |
| ·pEGFP-N_1-atp5b 的构建 | 第26-29页 |
| ·atp5b 基因shRNA 表达载体的构建 | 第29页 |
| ·pCDNA3.1-atp5b 重组质粒构建 | 第29-30页 |
| ·脂质体转染（24 孔板） | 第30页 |
| ·细胞蛋白质提取 | 第30-31页 |
| ·BCA 法测定蛋白浓度 | 第31页 |
| ·AF8_1 处理Chang liver 细胞 | 第31页 |
| ·Western bloting | 第31-32页 |
| ·MTT 法检测细胞增殖能力 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-49页 |
| ·pEGFP-N_1-atp5b 表达载体构建及在细胞中的表达 | 第33-38页 |
| ·细胞总RNA 提取结果 | 第33页 |
| ·atp5b 基因PCR 扩增 | 第33-34页 |
| ·pEGFP-N_1-atp5b 重组质粒构建 | 第34-37页 |
| ·pEGFP-N_1-atp5b 重组质粒的真核表达 | 第37-38页 |
| ·ATP5B 蛋白在不同细胞中表达量分析 | 第38-40页 |
| ·细胞蛋白提取结果 | 第38页 |
| ·Western blot 检测 ATP5B 蛋白表达情况 | 第38-39页 |
| ·AFB_1 对ATP58 蛋白表达的影响 | 第39-40页 |
| ·RNA 干扰atp5b 基因表达对细胞增殖的影响 | 第40-45页 |
| ·atp5b 基因shRNA 表达质粒构建结果 | 第40-41页 |
| ·shRNA 对细胞增殖的影响 | 第41-43页 |
| ·shRNA 对细胞克隆形成的影响 | 第43-45页 |
| ·atp5b 基因过表达载体构建及表达 | 第45-49页 |
| ·atp5b 基因PCR 扩增 | 第45页 |
| ·pCDNA3.1B-atp5b 重组质粒构建 | 第45-48页 |
| ·atp5b 基因过表达对细胞增殖的影响 | 第48-49页 |
| 4 讨论 | 第49-52页 |
| ·ATP5B 在细胞中定位表达 | 第49页 |
| ·ATP5B 蛋白在不同细胞中表达量差异 | 第49-50页 |
| ·靶向atp5b的shRNA对细胞增殖的影响 | 第50-51页 |
| ·ATP5B 过表达载体构建及表达 | 第51-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| ·重组质粒转染细胞 | 第52页 |
| ·shRNA 诱导基因沉默表达 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 附录 | 第59-63页 |
