| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 绪论 | 第10-18页 |
| 1.1 引言 | 第10页 |
| 1.2 高效液相色谱分类 | 第10-13页 |
| 1.2.1 高效体积排阻色谱 | 第10-11页 |
| 1.2.2 高效亲和色谱 | 第11页 |
| 1.2.3 高效反相色谱 | 第11-12页 |
| 1.2.4 高效离子交换色谱 | 第12-13页 |
| 1.2.5 高效疏水色谱 | 第13页 |
| 1.3 疏水电荷诱导 | 第13-14页 |
| 1.3.1 混合模式层析 | 第13页 |
| 1.3.2 亲硫吸附 | 第13-14页 |
| 1.3.3 疏水电荷诱导层析 | 第14页 |
| 1.4 硅胶微球填料的制备 | 第14-15页 |
| 1.4.1 硅烷偶联剂 | 第14-15页 |
| 1.4.2 微球的封尾技术的进展 | 第15页 |
| 1.5 模型蛋白的理化性质 | 第15-16页 |
| 1.5.1 牛血清蛋白的结构简介 | 第15-16页 |
| 1.5.2 溶菌酶的结构简介 | 第16页 |
| 1.5.3 免疫球蛋白G的结构简介 | 第16页 |
| 1.5.4 Protein A的理化参数 | 第16页 |
| 1.6 本论文立题意义及研究内容 | 第16-18页 |
| 第二章 材料与方法 | 第18-24页 |
| 2.1 材料与设备 | 第18-19页 |
| 2.1.1 试剂 | 第18页 |
| 2.1.2 菌株 | 第18-19页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第19页 |
| 2.2 硅胶微球的活化与偶联 | 第19-21页 |
| 2.2.1 硅胶微球的预处理 | 第19-20页 |
| 2.2.2 硅胶微球的活化 | 第20页 |
| 2.2.3 不同配基的偶联 | 第20页 |
| 2.2.4 填料的封尾 | 第20页 |
| 2.2.5 活化密度和偶联密度的测定 | 第20-21页 |
| 2.3 模型蛋白质的保留行为和分离行为 | 第21页 |
| 2.3.1 保留因子的测定 | 第21页 |
| 2.3.2 测定保留因子的色谱条件 | 第21页 |
| 2.4 模型蛋白质在HPHCIC下的分离行为 | 第21-22页 |
| 2.4.1 分离度的测定 | 第21-22页 |
| 2.4.2 分离蛋白色谱条件 | 第22页 |
| 2.5 HPHCIC的应用研究 | 第22-24页 |
| 2.5.1 Protein A的表达 | 第22页 |
| 2.5.2 Protein A上清液的提取 | 第22-23页 |
| 2.5.3 HPHCIC介质及C18反相色谱柱分析分离Protein A | 第23页 |
| 2.5.4 溶菌酶的分离纯化 | 第23-24页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第24-57页 |
| 3.1 硅胶微球的活化与偶联 | 第24-28页 |
| 3.1.1 时间对硅胶微球环氧活化密度的影响 | 第24-25页 |
| 3.1.2 温度对硅胶微球环氧活化密度的影响 | 第25页 |
| 3.1.3 二甲亚砜对偶联密度的影响 | 第25-26页 |
| 3.1.4 配基对偶联密度的影响 | 第26页 |
| 3.1.5 反应时间对偶联密度的影响 | 第26-27页 |
| 3.1.6 反应温度对偶联密度的影响 | 第27-28页 |
| 3.1.7 小结 | 第28页 |
| 3.2 流动相对蛋白质保留因子的影响 | 第28-41页 |
| 3.2.1 三种配基流动相p H对蛋白质的保留因子影响 | 第28-32页 |
| 3.2.2 三种配基流动相盐离子浓度对蛋白质的保留因子影响 | 第32-36页 |
| 3.2.3 三种配基流动相乙腈浓度对蛋白质的保留因子影响 | 第36-40页 |
| 3.2.4 小结 | 第40-41页 |
| 3.3 流动相对蛋白质分离行为的影响 | 第41-51页 |
| 3.3.1 三种模型蛋白在三种色谱柱上的分离行为初探 | 第41-44页 |
| 3.3.2 模型蛋白在 2-巯基 1-甲基咪唑配基色谱柱上的分离行为 | 第44-51页 |
| 3.3.3 小结 | 第51页 |
| 3.4 2-巯基 1-甲基咪唑为配基的HPHCIC介质应用研究 | 第51-57页 |
| 3.4.1 Protein A蛋白电泳图 | 第51-52页 |
| 3.4.2 Protein A在HPHCIC中的分离纯化 | 第52-53页 |
| 3.4.3 Protein A在C18柱中蛋白分离 | 第53-54页 |
| 3.4.4 溶菌酶的蛋白电泳图 | 第54页 |
| 3.4.5 溶菌酶在HPHCIC中的分离纯化 | 第54-55页 |
| 3.4.6 溶菌酶在C18色谱柱中的分离纯化 | 第55-57页 |
| 结论与展望 | 第57页 |
| 主要结论 | 第57-58页 |
| 展望 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间主要研究成果 | 第65页 |
