| 中文摘要 | 第2-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 中文文摘 | 第6-12页 |
| 绪论 | 第12-26页 |
| 1 干扰素的概述 | 第12-17页 |
| 1.1 干扰素的发现及命名 | 第12页 |
| 1.2 干扰素的分类 | 第12页 |
| 1.3 干扰素的诱生及作用机制 | 第12-15页 |
| 1.4 干扰素的功能 | 第15-17页 |
| 2 IFIT1的研究进展 | 第17-22页 |
| 2.1 IFIT蛋白家族的概述 | 第17页 |
| 2.2 IFIT1分子结构的基础性研究 | 第17-18页 |
| 2.3 IFIT1的功能 | 第18-22页 |
| 3 抗体制备技术 | 第22-23页 |
| 3.1 多克隆抗体制备技术 | 第22-23页 |
| 3.2 单克隆抗体制备技术 | 第23页 |
| 4 本实验的研究内容和意义 | 第23-26页 |
| 第一章 人类及小鼠IFIT1蛋白在大肠杆菌DH5α中的表达 | 第26-42页 |
| 1.1 前言 | 第26页 |
| 1.2 材料 | 第26-27页 |
| 1.3 方法 | 第27-32页 |
| 1.3.1 HIFIT1及mifit1基因序列信息的获取 | 第27页 |
| 1.3.2 HIFIT1及mifit1基因亚克隆于大肠杆菌表达系统 | 第27-31页 |
| 1.3.3 重组蛋白rHIFIT1及rMIFIT1的表达、提取和纯化 | 第31-32页 |
| 1.3.4 重组蛋白rHIFIT1及rMIFIT1的SDS-PAGE分析 | 第32页 |
| 1.4 结果与分析 | 第32-39页 |
| 1.4.1 HIFIT1及mifit1基因的生物信息学分析 | 第32-35页 |
| 1.4.2 HIFIT1及mifit1基因的扩增结果 | 第35-36页 |
| 1.4.3 重组质粒pGEX-4T-1/HIFIT1及pGEX-4T-1/mifit1的鉴定结果 | 第36-37页 |
| 1.4.4 重组蛋白rHIFIT1及rMIFIT1的表达情况分析 | 第37-39页 |
| 1.5 讨论 | 第39-42页 |
| 第二章 重组蛋白rHIFIT1及rMIFIT1多克隆抗体的制备 | 第42-54页 |
| 2.1 前言 | 第42页 |
| 2.2 材料 | 第42-43页 |
| 2.3 方法 | 第43-46页 |
| 2.3.1 重组蛋白rHIFIT1的透析及浓度测定 | 第43页 |
| 2.3.2 抗rHIFIT1鼠血清的制备 | 第43-44页 |
| 2.3.3 抗rMIFIT1兔血清的制备 | 第44页 |
| 2.3.4 间接酶联免疫吸附(ELISA)法检测鼠血清及兔血清抗体滴度 | 第44-45页 |
| 2.3.5 Western Blotting分析 | 第45-46页 |
| 2.3.6 间接免疫荧光抗体实验(IFAT)定位人293T细胞天然HIFIT1蛋白及鼠3 T3细胞天然MIFIT1蛋白 | 第46页 |
| 2.4 结果 | 第46-51页 |
| 2.4.1 间接ELISA法检测鼠血清及兔血清中特异性IgG抗体水平消长 | 第46-48页 |
| 2.4.2 Western Blotting分析结果 | 第48-50页 |
| 2.4.3 天然HIFIT1蛋白在293T细胞上的定位及天然MIFIT1蛋白在3T3细胞上的定位 | 第50-51页 |
| 2.5 讨论 | 第51-54页 |
| 第三章 HIFIT1蛋白单克隆抗体的制备 | 第54-62页 |
| 3.1 前言 | 第54页 |
| 3.2 材料、试剂及仪器 | 第54-55页 |
| 3.3 方法 | 第55-58页 |
| 3.3.1 BALB/c小鼠饲养层的制备 | 第55页 |
| 3.3.2 BALB/c小鼠脾细胞的制备 | 第55-56页 |
| 3.3.3 脾细胞与骨髓瘤细胞的融合 | 第56页 |
| 3.3.4 阳性细胞株的筛选 | 第56-57页 |
| 3.3.5 阳性杂交瘤细胞的克隆化 | 第57页 |
| 3.3.6 BALB/c小鼠腹水单克隆细胞的制备 | 第57-58页 |
| 3.4 结果 | 第58-60页 |
| 3.4.1 脾细胞与骨髓瘤细胞融合结果 | 第58页 |
| 3.4.2 ELISA检测鼠血清滴度结果 | 第58页 |
| 3.4.3 阳性孔细胞上清ELISA初筛结果 | 第58页 |
| 3.4.4 阳性孔细胞上清Western blotting分析结果 | 第58-59页 |
| 3.4.5 小鼠腹水Western blotting分析结果 | 第59-60页 |
| 3.5 讨论 | 第60-62页 |
| 结论 | 第62-64页 |
| 附录1 pGEX-4T-1基因图谱 | 第64-66页 |
| 附录2 英文缩略词表 | 第66-68页 |
| 附录3 主要试剂配方 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-76页 |
| 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第76-78页 |
| 致谢 | 第78-80页 |
| 个人简历 | 第80-84页 |
