中文摘要 | 第2-3页 |
Abstract | 第3-4页 |
中文文摘 | 第5-11页 |
绪论 | 第11-23页 |
1 死亡相关蛋白激酶(DAPK)的发现与功能 | 第11-12页 |
2 DAPK的表达调控 | 第12-18页 |
2.1 泛素-蛋白酶体途径 | 第13-15页 |
2.2 溶酶体途径 | 第15-17页 |
2.3 两条蛋白降解途径之间的互动 | 第17-18页 |
3 SUMO化修饰及功能 | 第18-20页 |
4 SUMO特异性蛋白酶(SENPs)的功能与癌症 | 第20-21页 |
5 研究的意义 | 第21-23页 |
第1章 材料与方法 | 第23-43页 |
1.1 材料 | 第23-30页 |
1.1.1 实验材料 | 第23页 |
1.1.2 实验仪器与耗材 | 第23-25页 |
1.1.3 实验试剂 | 第25-28页 |
1.1.4 试剂配制 | 第28-30页 |
1.2 实验方法 | 第30-43页 |
1.2.1 感受态细胞的制备 | 第30-31页 |
1.2.2 质粒在大肠杆菌中的转化 | 第31页 |
1.2.3 QIAGEN质粒大提 | 第31-32页 |
1.2.4 细胞的培养与保存 | 第32-33页 |
1.2.5 质粒转染实验 | 第33-34页 |
1.2.6 细胞总蛋白提取 | 第34页 |
1.2.7 蛋白印迹(western blot) | 第34-36页 |
1.2.8 RNA的提取 | 第36-37页 |
1.2.9 cDNA逆转 | 第37-38页 |
1.2.10 DNA聚合酶链反应(PCR) | 第38-39页 |
1.2.11 荧光定量PCR | 第39-40页 |
1.2.12 点突变 | 第40-43页 |
第2章 实验结果 | 第43-55页 |
2.1 UBC9可以调节TSC2介导的DAPK的降解 | 第43-44页 |
2.2 激活SUMO信号通路可下调DAPK蛋白的表达 | 第44-45页 |
2.3 SENPs调节DAPK的表达 | 第45-46页 |
2.4 SENPs调节DAPK的稳定具有普遍性 | 第46-47页 |
2.5 SENPs可以拮抗TSC2介导的DAPK蛋白表达量下调 | 第47-48页 |
2.6 SENPs可以调控DAPK的mRNA表达 | 第48-49页 |
2.7 DAPK缺失突变体的构建 | 第49-50页 |
2.8 SENPs通过1-364区域上调DAPK的表达 | 第50-52页 |
2.9 DAPK点突变体的构建 | 第52页 |
2.10 SENPs调控DAPK的表达依赖DAPK第141和167位的赖氨酸残基.42 | 第52-53页 |
2.11 溶酶体和蛋白酶体抑制剂对DAPK的作用 | 第53-55页 |
第3章 分析与讨论 | 第55-57页 |
第4章 结论 | 第57-59页 |
附录1 | 第59-61页 |
附录2 | 第61-63页 |
参考文献 | 第63-75页 |
攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第75-77页 |
致谢 | 第77-79页 |
个人简历 | 第79-83页 |