摘要 | 第9-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-33页 |
1 E.tenella的发育与宿主细胞损伤的关系 | 第12-13页 |
2 宿主细胞凋亡与寄生虫感染的研究进展 | 第13页 |
3 线粒体凋亡通路在寄生虫宿主细胞凋亡中的作用 | 第13-14页 |
4 E.tenella诱导宿主细胞凋亡的研究进展 | 第14-15页 |
5 钙离子与寄生虫宿主细胞凋亡的研究进展 | 第15页 |
6 钙离子在细胞凋亡中的作用机理 | 第15-22页 |
6.1 细胞内的钙分布与调控 | 第15-16页 |
6.2 Bcl-2家族蛋白调控细胞内的钙离子转运 | 第16-18页 |
6.3 内质网、细胞质和线粒体内钙离子的作用 | 第18-22页 |
7 研究的目的与意义 | 第22-24页 |
参考文献 | 第24-33页 |
第二章 E.tenella宿主细胞钙稳态与线粒体凋亡途径的关系 | 第33-65页 |
试验材料 | 第33-39页 |
1 实验动物 | 第33页 |
2 实验虫株 | 第33页 |
3 主要试剂 | 第33-34页 |
4 主要仪器和器材 | 第34-35页 |
5 试剂的配制 | 第35-39页 |
试验方法 | 第39-47页 |
1 鸡胚盲肠上皮原代细胞的分离培养 | 第39页 |
2 E.tenella子孢子的制备 | 第39页 |
3 试验分组和检测指标 | 第39-40页 |
4 检测方法 | 第40-46页 |
4.1 E.tenella虫体发育情况动态检测 | 第40-41页 |
4.2 E.tenella宿主细胞线粒体膜通透性测定 | 第41页 |
4.3 E.tenella宿主细胞凋亡的检测 | 第41-42页 |
4.4 E.tenella宿主细胞胞浆钙离子水平检测 | 第42页 |
4.5 E.tenella宿主细胞内Ca~(2+)-ATP酶活性的测定 | 第42-44页 |
4.6 E.tenella宿主细胞胞浆内Cytc含量的测定 | 第44-46页 |
5 数据处理方法 | 第46-47页 |
试验结果 | 第47-58页 |
1 钙稳态与E.tenella发育的关系 | 第47-48页 |
2 E.tenella宿主细胞凋亡与钙稳态的关系 | 第48-51页 |
2.1 E.tenella宿主细胞的早期凋亡与钙稳态的关系 | 第48页 |
2.2 E.tenella宿主细胞晚期凋亡和坏死与钙稳态的关系 | 第48-51页 |
3 E.tenella宿主细胞内游离Ca~(2+)浓度的变化与调控 | 第51-52页 |
4 E.tenella宿主细胞MPTP的变化与钙稳态的关系 | 第52-54页 |
5 E.tenella宿主细胞浆内Cytc含量的变化与钙稳态的关系 | 第54-56页 |
6 E.tenella宿主细胞胞内Ca~(2+)-ATP酶含量变化与钙稳态的关系 | 第56-58页 |
分析与讨论 | 第58-61页 |
1 钙稳态与E.tenella发育的关系 | 第58页 |
2 E.tenella宿主细胞质中游离钙和线粒体凋亡途径的关系 | 第58-60页 |
2.1 E.tenella宿主细胞质中游离钙和细胞凋亡的关系 | 第58-59页 |
2.2 E.tenella宿主细胞质中游离钙与MPTP和Cytc含量的关系 | 第59-60页 |
3 调控E.tenella宿主细胞钙稳态主要因素与线粒体凋亡通路的关系 | 第60-61页 |
小结 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-65页 |
第三章 钙蛋白酶在E.tenella宿主细胞线粒体凋亡通路中的作用与机理 | 第65-92页 |
试验材料 | 第65-66页 |
1 试验动物 | 第65页 |
2 试验虫株 | 第65页 |
3 主要试剂 | 第65页 |
4 主要仪器和器材 | 第65-66页 |
5 试剂的配制 | 第66页 |
试验方法 | 第66-75页 |
1 鸡胚盲肠上皮原代细胞的分离培养 | 第66页 |
2 E.tenella子孢子的制备 | 第66页 |
3 SJA6017对宿主细胞活性影响的测定 | 第66-67页 |
4 试验方法和检测指标 | 第67-68页 |
5 检测方法 | 第68-74页 |
5.1 E.tenella虫体发育情况动态检测 | 第68页 |
5.2 E.tenella宿主细胞线粒体膜通透性测定 | 第68页 |
5.3 E.tenella宿主细胞凋亡的流式细胞术检测 | 第68页 |
5.4 E.tenella宿主细胞钙蛋白酶活性的测定 | 第68-69页 |
5.5 E.tenella宿主细胞Bax和Bid mRNA相对表达量变化 | 第69-72页 |
5.6 E.tenella宿主细胞Bax蛋白表达测定 | 第72-73页 |
5.7 E.tenella宿主细胞Bid含量的检测 | 第73-74页 |
6 数据处理方法 | 第74-75页 |
试验结果 | 第75-87页 |
1 钙蛋白酶抑制剂(SJA6017)对宿主细胞活性的影响 | 第75-76页 |
2 钙蛋白酶与E.tenella发育的关系 | 第76页 |
3 E.tenella宿主细胞钙稳态与钙蛋白酶含量变化的关系 | 第76-78页 |
4 钙蛋白酶与E.tenella宿主细胞凋亡的关系 | 第78-79页 |
4.1 钙蛋白酶与E.tenella宿主细胞早期凋亡的关系 | 第78页 |
4.2 钙蛋白酶与E.tenella宿主细胞的晚期凋亡和坏死率的关系 | 第78-79页 |
5 钙蛋白酶与E.tenella宿主细胞线粒体膜通透性的关系 | 第79-80页 |
6 E.tenella宿主细胞内Bax和Bid mRNA表达量的变化 | 第80-84页 |
6.1 引物鉴定 | 第80-81页 |
6.1.1 Bax和Bid PCR产物电泳结果 | 第80-81页 |
6.1.2 鸡Bax和Bid基因测序 | 第81页 |
6.2 Bax、Bid和β-actin的动力曲线和溶解曲线 | 第81-82页 |
6.3 钙蛋白酶与E.tenella宿主细胞内Bax的mRNA表达量的关系 | 第82-83页 |
6.4 钙蛋白酶与E.tenella宿主细胞Bid mRNA表达的关系 | 第83-84页 |
7 钙蛋白酶与E.tenella宿主细胞Bax蛋白表达的关系 | 第84-85页 |
8 钙蛋白酶与E.tenella宿主细胞Bid蛋白表达量的关系 | 第85-87页 |
分析讨论 | 第87-89页 |
1 SJA6017药物添加浓度和作用时间的确定 | 第87页 |
2 钙蛋白酶与E.tenella发育的关系 | 第87页 |
3 E.tenella宿主细胞钙蛋白酶和细胞凋亡的关系 | 第87-88页 |
4 E.tenella宿主细胞钙蛋白酶与线粒体凋亡通路的关系 | 第88-89页 |
小结 | 第89-90页 |
参考文献 | 第90-92页 |
第四章 钙调蛋白在E.tenella宿主细胞线粒体凋亡通路中的作用与机理 | 第92-109页 |
1 试验动物 | 第92页 |
2 试验虫株 | 第92页 |
3 主要试剂 | 第92页 |
4 主要仪器和器材 | 第92-93页 |
5 试剂的配制 | 第93页 |
试验方法 | 第93-98页 |
1 鸡胚盲肠上皮细胞的分离培养 | 第93页 |
2 E.tenella子孢子的制备 | 第93页 |
3 试验方法和检测指标 | 第93-94页 |
4 检测方法 | 第94-97页 |
4.1 E.tenella虫体发育情况动态检测 | 第94页 |
4.2 E.tenella宿主细胞线粒体膜通透性测定 | 第94页 |
4.3 E.tenella宿主细胞凋亡的流式细胞术检测 | 第94页 |
4.4 E.tenella宿主细胞钙调神经磷酸酶活性测定 | 第94-96页 |
4.5 E.tenella宿主细胞Bad含量测定 | 第96页 |
4.6 E.tenella宿主细胞14-3-3蛋白含量测定 | 第96-97页 |
5 数据处理方法 | 第97-98页 |
试验结果 | 第98-105页 |
1 钙稳态和钙调蛋白与E.tenella发育的关系 | 第98页 |
2 钙调蛋白与E.tenella宿主细胞凋亡的关系 | 第98-101页 |
2.1 钙调蛋白与E.tenella宿主细胞早期凋亡的关系 | 第99页 |
2.2 钙调蛋白与E.tenella宿主细胞晚期凋亡和坏死率的关系 | 第99-101页 |
3 E.tenella宿主细胞钙稳态与钙调神经磷酸酶的关系 | 第101-102页 |
4 钙调蛋白与E.tenella宿主细胞线粒体膜通透性的关系 | 第102-103页 |
5 钙调蛋白与E.tenella宿主细胞内Bad含量的关系 | 第103-104页 |
6 钙调蛋白与E.tenella宿主细胞内14-3-3蛋白含量的关系 | 第104-105页 |
分析讨论 | 第105-107页 |
1 钙稳态和钙调蛋白与E.tenella发育的关系 | 第105页 |
2 E.tenella宿主细胞中钙调蛋白和细胞凋亡的关系 | 第105页 |
3 钙调蛋白与E.tenella宿主细胞中钙调神经磷酸酶的关系 | 第105-106页 |
4 E.tenella宿主细胞钙调蛋白与线粒体凋亡通路的关系 | 第106-107页 |
小结 | 第107-108页 |
参考文献 | 第108-109页 |
全文结论及创新点 | 第109-111页 |
Abstract | 第111-113页 |
附图 | 第115-117页 |
附录:在读科期间研论文 | 第117-119页 |
致谢 | 第119页 |