中英文缩略对照表 | 第5-11页 |
摘要 | 第11-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-32页 |
参考文献 | 第26-32页 |
第二章 E.tenella感染宿主细胞ROS和NO的产生与动态变化 | 第32-61页 |
试验材料 | 第33-38页 |
1 实验动物 | 第33页 |
2 实验虫株 | 第33页 |
3 主要试剂 | 第33-34页 |
4 主要实验仪器和器材 | 第34-35页 |
5 试剂配制 | 第35-38页 |
试验方法 | 第38-45页 |
1 鸡胚原代盲肠上皮细胞的分离与培养 | 第38页 |
2 apocynin、febuxostat、L-NMMA工作浓度确定试验 | 第38-39页 |
3 子孢子的分离及纯化 | 第39-40页 |
4 试验分组与处理 | 第40-41页 |
5 E.tenella感染宿主细胞内ROS的流式细胞术检测 | 第41-42页 |
6 E.tenella感染宿主细胞培养液中H_2O_2的测定 | 第42页 |
7 E.tenella感染宿主细胞XO活性测定 | 第42-43页 |
8 E.tenella感染宿主细胞NOX活性测定 | 第43页 |
9 E.tenella感染宿主细胞内NO含量的测定 | 第43页 |
10 E.tenella感染宿主细胞培养液中NO含量检测 | 第43-44页 |
11 E.tenella感染宿主细胞NOS活性测定 | 第44页 |
12 E.tenella虫体发育情况动态检测 | 第44-45页 |
13 数据处理方法 | 第45页 |
试验结果 | 第45-54页 |
1 apocynin、febuxostat、L-NMMA工作浓度的确定 | 第45-46页 |
2 ROS和NO生成与E.tenella发育的关系 | 第46-47页 |
3 NOX和XO对E.tenella感染宿主细胞ROS的影响 | 第47-48页 |
4 NOX对E.tenella感染宿主细胞培养液中H_2O_2的影响 | 第48-49页 |
5 E.tenella感染宿主细胞中NOX活性变化 | 第49-50页 |
6 E.tenella感染宿主细胞中XO活性变化情况 | 第50-51页 |
7 NOS对E.tenella感染宿主细胞内NO的影响 | 第51-52页 |
8 NOS对E.tenella感染宿主细胞培养液中NO的影响 | 第52-53页 |
9 E.tenella感染宿主细胞NOS活性的变化 | 第53-54页 |
分析与讨论 | 第54-57页 |
小结 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-61页 |
第三章 E.tenella感染宿主细胞中ROS和NO与线粒体凋亡通路的关系 | 第61-82页 |
试验材料 | 第62-63页 |
1 实验动物 | 第62页 |
2 实验虫株 | 第62页 |
3 主要试剂 | 第62页 |
4 主要实验仪器和器材 | 第62页 |
5 试剂配制 | 第62-63页 |
试验方法 | 第63-68页 |
1 鸡胚原代盲肠上皮细胞的分离培养 | 第63页 |
2 子孢子的分离纯化 | 第63页 |
3 自由基抑制剂工作浓度的测定 | 第63页 |
4 试验分组与处理 | 第63-64页 |
5 E.tenella感染宿主细胞内ROS的流式细胞术检测 | 第64-65页 |
6 E.tenella感染宿主细胞培养液中H_2O_2的测定 | 第65页 |
7 流式细胞仪测定E.tenella感染宿主细胞的凋亡 | 第65页 |
8 E.tenella感染宿主细胞MPTP开放情况的测定 | 第65-66页 |
9 E.tenella感染宿主细胞caspase 9活性测定 | 第66页 |
10 E.tenella感染宿主细胞线粒体的分离 | 第66-67页 |
11 E.tenella感染宿主细胞的胞质cyt c和线粒体cyt c的测定 | 第67-68页 |
12 E.tenella虫体发育情况动态检测 | 第68页 |
试验结果 | 第68-77页 |
1 自由基抑制剂工作浓度的确定 | 第68页 |
2 自由基与E.tenella发育的关系 | 第68-69页 |
3 E.tenella感染宿主细胞中ROS水平的变化 | 第69-70页 |
4 E.tenella感染宿主细胞培养液中H_2O_2含量的变化 | 第70-71页 |
5 ROS和NO在E.tenella感染宿主细胞早期凋亡中的作用 | 第71-72页 |
6 ROS和NO在E.tenella感染宿主细胞晚期凋亡和坏死的作用 | 第72-73页 |
7 E.tenella感染宿主细胞线粒体通透性转运孔的开放情况 | 第73-74页 |
8 E.tenella感染宿主细胞中caspase 9活性的变化 | 第74-75页 |
9 E.tenella感染宿主细胞线粒体中cyt c含量的变化 | 第75-76页 |
10 E.tenella感染宿主细胞胞浆中cyt c水平的变化 | 第76-77页 |
分析与讨论 | 第77-79页 |
小结 | 第79-80页 |
参考文献 | 第80-82页 |
第四章 ROS和NO在线粒体凋亡通路中的作用机制 | 第82-102页 |
试验材料 | 第83-84页 |
1 实验动物 | 第83页 |
2 实验虫株 | 第83页 |
3 主要试剂 | 第83-84页 |
4 主要仪器和器材 | 第84页 |
5 试剂配制 | 第84页 |
试验方法 | 第84-89页 |
1 鸡胚原代盲肠上皮细胞的分离培养 | 第84页 |
2 子孢子的分离纯化 | 第84页 |
3 试验分组与处理 | 第84-85页 |
4 E.tenella感染宿主细胞中P-JNK水平的检测 | 第85-86页 |
5 E.tenella感染宿主细胞中P-p38水平的检测 | 第86页 |
6 E.tenella感染宿主细胞中BCL-2蛋白表达水平的检测 | 第86页 |
7 E.tenella感染宿主细胞中BAX蛋白表达水平的检测 | 第86-87页 |
8 E.tenella感染宿主细胞BCL-2和BAX mRNA相对表达量测定 | 第87-89页 |
8.1 E.tenella感染宿主细胞中总RNA的提取与浓度及纯度的测定 | 第87页 |
8.2 引物设计与合成 | 第87-88页 |
8.3 cDNA的合成 | 第88页 |
8.4 引物扩增与鉴定 | 第88-89页 |
8.4.1 PCR扩增 | 第88-89页 |
8.4.2 琼脂糖凝胶电泳 | 第89页 |
8.4.3 基因测序 | 第89页 |
8.5 实时荧光定量PCR | 第89页 |
试验结果 | 第89-97页 |
1 ROS和NO与E.tenella感染宿主细胞P-JNK的关系 | 第89-90页 |
2 ROS和NO与E.tenella感染宿主细胞P-p38的关系 | 第90-91页 |
3 ROS和NO对E.tenella感染宿主细胞BCL-2蛋白表达的影响 | 第91-92页 |
4 ROS和NO对E.tenella感染宿主细胞BAX蛋白表达的影响 | 第92-93页 |
5 ROS和NO对E.tenella感染宿主细胞BCL-2和BAX mRNA表达的影响 | 第93-97页 |
5.1 引物鉴定 | 第93-94页 |
5.1.1 BCL-2和BAX PCR产物电泳结果 | 第93-94页 |
5.1.2 鸡BCL-2和BAX基因测序 | 第94页 |
5.2 BCL-2、BAX和β-actin的动力曲线和溶解曲线 | 第94-95页 |
5.3 ROS和NO对E.tenella感染宿主细胞BCL-2 mRNA表达的影响 | 第95-96页 |
5.4 ROS和NO对E.tenella感染宿主细胞BAX mRNA表达的影响 | 第96-97页 |
分析与讨论 | 第97-99页 |
小结 | 第99-100页 |
参考文献 | 第100-102页 |
第五章 mitoK_(ATP)通道在E.tenella感染宿主细胞氧化应激中的作用 | 第102-120页 |
试验材料 | 第103页 |
1 实验动物 | 第103页 |
2 实验虫株 | 第103页 |
3 主要试剂 | 第103页 |
4 主要仪器和器材 | 第103页 |
5 试剂配制 | 第103页 |
试验方法 | 第103-106页 |
1 鸡胚原代盲肠上皮细胞的分离培养 | 第103页 |
2 子孢子的分离纯化 | 第103页 |
3 试验分组与处理 | 第103-104页 |
4 E.tenella感染宿主细胞内ROS的流式细胞术检测 | 第104页 |
5 E.tenella感染宿主细胞培养液中H_2O_2的测定 | 第104页 |
6 E.tenella感染宿主细胞内NO含量的测定 | 第104-105页 |
7 E.tenella感染宿主细胞培养基中NO含量检测 | 第105页 |
8 流式细胞仪测定E.tenella感染宿主细胞的凋亡 | 第105页 |
9 E.tenella感染宿主细胞caspase 9活性测定 | 第105页 |
10 E.tenella感染宿主细胞caspase 3活性测定 | 第105页 |
11 E.tenella虫体发育情况动态检测 | 第105页 |
12 TUNEL测定细胞DNA损伤 | 第105-106页 |
13 数据处理方法 | 第106页 |
试验结果 | 第106-114页 |
1 mitoK_(ATP)通道与E.tenella发育的关系 | 第106页 |
2 mitoK_(ATP)通道对E.tenella感染宿主细胞内ROS水平的影响 | 第106-107页 |
3 mitoK_(ATP)通道对E.tenella感染宿主细胞培养上清液中H_2O_2含量的影响 | 第107-108页 |
4 mitoK_(ATP)通道对E.tenella感染宿主细胞内NO水平的影响 | 第108-109页 |
5 mitoK_(ATP)通道对E.tenella感染宿主细胞培养液中NO水平的影响 | 第109-110页 |
6 mitoK_(ATP)通道在E.tenella感染宿主细胞凋亡中的作用 | 第110-111页 |
7 mitoK_(ATP)通道在E.tenella感染宿主细胞DNA损伤中的作用 | 第111-112页 |
8 E.tenella感染宿主细胞中caspase 9和caspase 3活性的变化 | 第112-114页 |
分析与讨论 | 第114-116页 |
小结 | 第116-117页 |
参考文献 | 第117-120页 |
全文结论及创新点 | 第120-121页 |
Abstract | 第121-123页 |
附图 | 第125-131页 |
附录:在读期间课题相关科研论著与成果 | 第131-133页 |
致谢 | 第133页 |