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氧化应激在Eimeria tenella宿主细胞线粒体调亡途径中的作用和机制

中英文缩略对照表第5-11页
摘要第11-14页
第一章 文献综述第14-32页
    参考文献第26-32页
第二章 E.tenella感染宿主细胞ROS和NO的产生与动态变化第32-61页
    试验材料第33-38页
        1 实验动物第33页
        2 实验虫株第33页
        3 主要试剂第33-34页
        4 主要实验仪器和器材第34-35页
        5 试剂配制第35-38页
    试验方法第38-45页
        1 鸡胚原代盲肠上皮细胞的分离与培养第38页
        2 apocynin、febuxostat、L-NMMA工作浓度确定试验第38-39页
        3 子孢子的分离及纯化第39-40页
        4 试验分组与处理第40-41页
        5 E.tenella感染宿主细胞内ROS的流式细胞术检测第41-42页
        6 E.tenella感染宿主细胞培养液中H_2O_2的测定第42页
        7 E.tenella感染宿主细胞XO活性测定第42-43页
        8 E.tenella感染宿主细胞NOX活性测定第43页
        9 E.tenella感染宿主细胞内NO含量的测定第43页
        10 E.tenella感染宿主细胞培养液中NO含量检测第43-44页
        11 E.tenella感染宿主细胞NOS活性测定第44页
        12 E.tenella虫体发育情况动态检测第44-45页
        13 数据处理方法第45页
    试验结果第45-54页
        1 apocynin、febuxostat、L-NMMA工作浓度的确定第45-46页
        2 ROS和NO生成与E.tenella发育的关系第46-47页
        3 NOX和XO对E.tenella感染宿主细胞ROS的影响第47-48页
        4 NOX对E.tenella感染宿主细胞培养液中H_2O_2的影响第48-49页
        5 E.tenella感染宿主细胞中NOX活性变化第49-50页
        6 E.tenella感染宿主细胞中XO活性变化情况第50-51页
        7 NOS对E.tenella感染宿主细胞内NO的影响第51-52页
        8 NOS对E.tenella感染宿主细胞培养液中NO的影响第52-53页
        9 E.tenella感染宿主细胞NOS活性的变化第53-54页
    分析与讨论第54-57页
    小结第57-58页
    参考文献第58-61页
第三章 E.tenella感染宿主细胞中ROS和NO与线粒体凋亡通路的关系第61-82页
    试验材料第62-63页
        1 实验动物第62页
        2 实验虫株第62页
        3 主要试剂第62页
        4 主要实验仪器和器材第62页
        5 试剂配制第62-63页
    试验方法第63-68页
        1 鸡胚原代盲肠上皮细胞的分离培养第63页
        2 子孢子的分离纯化第63页
        3 自由基抑制剂工作浓度的测定第63页
        4 试验分组与处理第63-64页
        5 E.tenella感染宿主细胞内ROS的流式细胞术检测第64-65页
        6 E.tenella感染宿主细胞培养液中H_2O_2的测定第65页
        7 流式细胞仪测定E.tenella感染宿主细胞的凋亡第65页
        8 E.tenella感染宿主细胞MPTP开放情况的测定第65-66页
        9 E.tenella感染宿主细胞caspase 9活性测定第66页
        10 E.tenella感染宿主细胞线粒体的分离第66-67页
        11 E.tenella感染宿主细胞的胞质cyt c和线粒体cyt c的测定第67-68页
        12 E.tenella虫体发育情况动态检测第68页
    试验结果第68-77页
        1 自由基抑制剂工作浓度的确定第68页
        2 自由基与E.tenella发育的关系第68-69页
        3 E.tenella感染宿主细胞中ROS水平的变化第69-70页
        4 E.tenella感染宿主细胞培养液中H_2O_2含量的变化第70-71页
        5 ROS和NO在E.tenella感染宿主细胞早期凋亡中的作用第71-72页
        6 ROS和NO在E.tenella感染宿主细胞晚期凋亡和坏死的作用第72-73页
        7 E.tenella感染宿主细胞线粒体通透性转运孔的开放情况第73-74页
        8 E.tenella感染宿主细胞中caspase 9活性的变化第74-75页
        9 E.tenella感染宿主细胞线粒体中cyt c含量的变化第75-76页
        10 E.tenella感染宿主细胞胞浆中cyt c水平的变化第76-77页
    分析与讨论第77-79页
    小结第79-80页
    参考文献第80-82页
第四章 ROS和NO在线粒体凋亡通路中的作用机制第82-102页
    试验材料第83-84页
        1 实验动物第83页
        2 实验虫株第83页
        3 主要试剂第83-84页
        4 主要仪器和器材第84页
        5 试剂配制第84页
    试验方法第84-89页
        1 鸡胚原代盲肠上皮细胞的分离培养第84页
        2 子孢子的分离纯化第84页
        3 试验分组与处理第84-85页
        4 E.tenella感染宿主细胞中P-JNK水平的检测第85-86页
        5 E.tenella感染宿主细胞中P-p38水平的检测第86页
        6 E.tenella感染宿主细胞中BCL-2蛋白表达水平的检测第86页
        7 E.tenella感染宿主细胞中BAX蛋白表达水平的检测第86-87页
        8 E.tenella感染宿主细胞BCL-2和BAX mRNA相对表达量测定第87-89页
            8.1 E.tenella感染宿主细胞中总RNA的提取与浓度及纯度的测定第87页
            8.2 引物设计与合成第87-88页
            8.3 cDNA的合成第88页
            8.4 引物扩增与鉴定第88-89页
                8.4.1 PCR扩增第88-89页
                8.4.2 琼脂糖凝胶电泳第89页
                8.4.3 基因测序第89页
            8.5 实时荧光定量PCR第89页
    试验结果第89-97页
        1 ROS和NO与E.tenella感染宿主细胞P-JNK的关系第89-90页
        2 ROS和NO与E.tenella感染宿主细胞P-p38的关系第90-91页
        3 ROS和NO对E.tenella感染宿主细胞BCL-2蛋白表达的影响第91-92页
        4 ROS和NO对E.tenella感染宿主细胞BAX蛋白表达的影响第92-93页
        5 ROS和NO对E.tenella感染宿主细胞BCL-2和BAX mRNA表达的影响第93-97页
            5.1 引物鉴定第93-94页
                5.1.1 BCL-2和BAX PCR产物电泳结果第93-94页
                5.1.2 鸡BCL-2和BAX基因测序第94页
            5.2 BCL-2、BAX和β-actin的动力曲线和溶解曲线第94-95页
            5.3 ROS和NO对E.tenella感染宿主细胞BCL-2 mRNA表达的影响第95-96页
            5.4 ROS和NO对E.tenella感染宿主细胞BAX mRNA表达的影响第96-97页
    分析与讨论第97-99页
    小结第99-100页
    参考文献第100-102页
第五章 mitoK_(ATP)通道在E.tenella感染宿主细胞氧化应激中的作用第102-120页
    试验材料第103页
        1 实验动物第103页
        2 实验虫株第103页
        3 主要试剂第103页
        4 主要仪器和器材第103页
        5 试剂配制第103页
    试验方法第103-106页
        1 鸡胚原代盲肠上皮细胞的分离培养第103页
        2 子孢子的分离纯化第103页
        3 试验分组与处理第103-104页
        4 E.tenella感染宿主细胞内ROS的流式细胞术检测第104页
        5 E.tenella感染宿主细胞培养液中H_2O_2的测定第104页
        6 E.tenella感染宿主细胞内NO含量的测定第104-105页
        7 E.tenella感染宿主细胞培养基中NO含量检测第105页
        8 流式细胞仪测定E.tenella感染宿主细胞的凋亡第105页
        9 E.tenella感染宿主细胞caspase 9活性测定第105页
        10 E.tenella感染宿主细胞caspase 3活性测定第105页
        11 E.tenella虫体发育情况动态检测第105页
        12 TUNEL测定细胞DNA损伤第105-106页
        13 数据处理方法第106页
    试验结果第106-114页
        1 mitoK_(ATP)通道与E.tenella发育的关系第106页
        2 mitoK_(ATP)通道对E.tenella感染宿主细胞内ROS水平的影响第106-107页
        3 mitoK_(ATP)通道对E.tenella感染宿主细胞培养上清液中H_2O_2含量的影响第107-108页
        4 mitoK_(ATP)通道对E.tenella感染宿主细胞内NO水平的影响第108-109页
        5 mitoK_(ATP)通道对E.tenella感染宿主细胞培养液中NO水平的影响第109-110页
        6 mitoK_(ATP)通道在E.tenella感染宿主细胞凋亡中的作用第110-111页
        7 mitoK_(ATP)通道在E.tenella感染宿主细胞DNA损伤中的作用第111-112页
        8 E.tenella感染宿主细胞中caspase 9和caspase 3活性的变化第112-114页
    分析与讨论第114-116页
    小结第116-117页
    参考文献第117-120页
全文结论及创新点第120-121页
Abstract第121-123页
附图第125-131页
附录:在读期间课题相关科研论著与成果第131-133页
致谢第133页

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