摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-24页 |
1 miRNA | 第12-19页 |
·miRNA的起源 | 第12-13页 |
·miRNA的生物合成 | 第13-16页 |
·miRNA的调控机理 | 第16-17页 |
·miRNA转录本的特征 | 第17-19页 |
2 miRNA与毒理学研究 | 第19-22页 |
·环境毒物与miRNA | 第19-21页 |
·miRNA在水生态毒理学研究中的应用 | 第21-22页 |
3 研究目的与意义 | 第22-24页 |
第二章 稀有鮈鲫miRNA的cDNA文库构建、Illumina高通量测序及生物信息学分析 | 第24-33页 |
前言 | 第24-25页 |
1 材料与方法 | 第25-28页 |
·实验动物 | 第25页 |
·主要试剂 | 第25页 |
·主要仪器设备 | 第25页 |
·总RNA提取 | 第25-26页 |
·总RNA的质量检测 | 第26页 |
·small RNA cDNA文库构建及高通量测序 | 第26-27页 |
·测序数据的生物信息学分析 | 第27-28页 |
2 结果与分析 | 第28-31页 |
·总RNA质量 | 第28-29页 |
·序列的长度分布 | 第29-30页 |
·Small RNA的注释及miRNA的鉴定 | 第30-31页 |
3 讨论 | 第31-33页 |
第三章 低分子量PAH-Phe对稀有鮈鲫肝脏细胞凋亡及Caspase酶活性的影响 | 第33-42页 |
前言 | 第33-34页 |
1 材料与方法 | 第34-38页 |
·实验用鱼的饲养 | 第34页 |
·化学品及试剂盒来源 | 第34页 |
·暴露实验设计 | 第34-35页 |
·TUNEL及Hoeschst 33342染色 | 第35-36页 |
·Caspase 3, 8, 9 酶活性测定 | 第36-37页 |
·数据处理与分析 | 第37-38页 |
2 结果与分析 | 第38-40页 |
·Phe对稀有鮈鲫肝脏细胞凋亡的影响 | 第38-40页 |
·Phe对稀有鮈鲫肝脏caspase 3,8,9 酶活性的影响 | 第40页 |
3 讨论 | 第40-42页 |
第四章 低分子量PAH-Phe对稀有鮈鲫p53通路相关基因表达的影响 | 第42-46页 |
前言 | 第42页 |
1 材料与方法 | 第42-44页 |
·实验用鱼的饲养 | 第42页 |
·化学品 | 第42-43页 |
·暴露实验设计 | 第43页 |
·RNA抽提及反转录 | 第43页 |
·荧光定量PCR | 第43-44页 |
·数据处理与分析 | 第44页 |
2 结果与分析 | 第44-45页 |
3 讨论 | 第45-46页 |
第五章 低分子量的PAHs-Phe对稀有鮈鲫miR-17~92 cluster的影响 | 第46-53页 |
前言 | 第46页 |
1 材料与方法 | 第46-50页 |
·实验用鱼的饲养 | 第46-47页 |
·化学品及试剂盒 | 第47页 |
·暴露实验设计 | 第47页 |
·miRNA的提取 | 第47-48页 |
·miRNA的逆转录反应 | 第48-50页 |
·数据处理与分析 | 第50页 |
2 结果与分析 | 第50-51页 |
3 讨论 | 第51-53页 |
结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-63页 |
附录 | 第63-64页 |
致谢 | 第64页 |