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猪圆环病毒2型ORF6基因功能的初步研究

摘要第1-11页
ABSTRACT第11-14页
缩略语表(Abbreviation)第14-16页
1 文献综述第16-23页
   ·猪圆环病毒2型研究进展第16-20页
     ·PCV2概述第16页
     ·PCV2的发现及命名第16-17页
     ·PCV2基因结构第17-18页
     ·PCV2编码蛋白第18-20页
   ·猪圆环病毒2型致病机制第20-21页
   ·猪圆环病毒2型检测与分析技术第21-23页
     ·感染性克隆第21页
     ·荧光定量PCR第21页
     ·间接免疫荧光第21-22页
     ·Western blot第22页
     ·细胞凋亡检测第22-23页
2 研究目的与意义第23-24页
3 材料与方法第24-46页
   ·材料第24-29页
     ·毒株与细胞第24页
     ·质粒与载体第24页
     ·工具酶及主要试剂第24页
     ·培养基和抗生素及其配制第24-25页
     ·主要缓冲液和试剂及其配制第25-26页
     ·主要实验仪器及设备第26页
     ·分子生物学分析软件第26页
     ·本研究所设计的引物第26-29页
   ·方法第29-46页
     ·PCV2 ORF6原核表达及多克隆抗体的制备第29-34页
     ·PCV2 ORF6的转录表达验证第34-36页
     ·PCV2 ORF6的真核表达第36-38页
     ·PCV2-WH株双拷贝感染性克隆的构建第38-41页
     ·PCV2 ORF6缺失双拷贝感染性克隆构建第41页
     ·感染性克隆的验证第41-43页
     ·PCV2 ORF6对病毒增殖的影响第43-44页
     ·PCV2 ORF6对细胞的凋亡影响检测第44-45页
     ·PCV2 ORF6对细胞因子的影响检测第45页
     ·抑制剂进一步检测PCV2 ORF6对IL-10的影响第45页
     ·统计学方法第45-46页
4 结果与分析第46-60页
   ·ORF6原核表达及抗体制备第46-47页
   ·PCV2 ORF6的转录表达验证第47-49页
     ·PCV2 ORF6的转录验证第47-48页
     ·PCV2 ORF6的表达验证第48-49页
   ·PCV2 ORF6的细胞定位及真核表达第49-50页
     ·PCV2 ORF6的细胞定位第49页
     ·PCV2 ORF6的真核表达第49-50页
   ·感染性克隆的构建第50-52页
     ·感染性克隆的结果示意图第50页
     ·PCV2-WUH株野生型双拷贝感染性克隆的构建第50-51页
     ·PCV2 ORF6缺失双拷贝感染性克隆构建第51-52页
   ·感染性克隆的拯救及验证第52-54页
     ·病毒ORF2 mRNA检测第52-53页
     ·IFA验证病毒拯救第53-54页
   ·ORF6蛋白对PCV2生物学功能的影响第54-55页
     ·病毒增殖能力检测第54页
     ·病毒的一步法生长曲线第54-55页
   ·PCV2 ORF6对细胞的凋亡影响第55-56页
   ·PCV2 ORF6对细胞因子的影响检测第56-58页
   ·PCV2 ORF6激活IL-10的信号通路分析第58-60页
5 讨论与结论第60-63页
   ·讨论第60-62页
     ·PCV2 ORF6蛋白鉴定与表达定位第60页
     ·PCV2 ORF6对病毒复制增殖的影响第60-61页
     ·PCV2 ORF6的生物学功能第61-62页
     ·PCV2 ORF6对IL-10的的影响第62页
   ·结论第62-63页
参考文献第63-72页
发表文章第72-73页
致谢第73页

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