摘要 | 第1-11页 |
ABSTRACT | 第11-14页 |
缩略语表(Abbreviation) | 第14-16页 |
1 文献综述 | 第16-23页 |
·猪圆环病毒2型研究进展 | 第16-20页 |
·PCV2概述 | 第16页 |
·PCV2的发现及命名 | 第16-17页 |
·PCV2基因结构 | 第17-18页 |
·PCV2编码蛋白 | 第18-20页 |
·猪圆环病毒2型致病机制 | 第20-21页 |
·猪圆环病毒2型检测与分析技术 | 第21-23页 |
·感染性克隆 | 第21页 |
·荧光定量PCR | 第21页 |
·间接免疫荧光 | 第21-22页 |
·Western blot | 第22页 |
·细胞凋亡检测 | 第22-23页 |
2 研究目的与意义 | 第23-24页 |
3 材料与方法 | 第24-46页 |
·材料 | 第24-29页 |
·毒株与细胞 | 第24页 |
·质粒与载体 | 第24页 |
·工具酶及主要试剂 | 第24页 |
·培养基和抗生素及其配制 | 第24-25页 |
·主要缓冲液和试剂及其配制 | 第25-26页 |
·主要实验仪器及设备 | 第26页 |
·分子生物学分析软件 | 第26页 |
·本研究所设计的引物 | 第26-29页 |
·方法 | 第29-46页 |
·PCV2 ORF6原核表达及多克隆抗体的制备 | 第29-34页 |
·PCV2 ORF6的转录表达验证 | 第34-36页 |
·PCV2 ORF6的真核表达 | 第36-38页 |
·PCV2-WH株双拷贝感染性克隆的构建 | 第38-41页 |
·PCV2 ORF6缺失双拷贝感染性克隆构建 | 第41页 |
·感染性克隆的验证 | 第41-43页 |
·PCV2 ORF6对病毒增殖的影响 | 第43-44页 |
·PCV2 ORF6对细胞的凋亡影响检测 | 第44-45页 |
·PCV2 ORF6对细胞因子的影响检测 | 第45页 |
·抑制剂进一步检测PCV2 ORF6对IL-10的影响 | 第45页 |
·统计学方法 | 第45-46页 |
4 结果与分析 | 第46-60页 |
·ORF6原核表达及抗体制备 | 第46-47页 |
·PCV2 ORF6的转录表达验证 | 第47-49页 |
·PCV2 ORF6的转录验证 | 第47-48页 |
·PCV2 ORF6的表达验证 | 第48-49页 |
·PCV2 ORF6的细胞定位及真核表达 | 第49-50页 |
·PCV2 ORF6的细胞定位 | 第49页 |
·PCV2 ORF6的真核表达 | 第49-50页 |
·感染性克隆的构建 | 第50-52页 |
·感染性克隆的结果示意图 | 第50页 |
·PCV2-WUH株野生型双拷贝感染性克隆的构建 | 第50-51页 |
·PCV2 ORF6缺失双拷贝感染性克隆构建 | 第51-52页 |
·感染性克隆的拯救及验证 | 第52-54页 |
·病毒ORF2 mRNA检测 | 第52-53页 |
·IFA验证病毒拯救 | 第53-54页 |
·ORF6蛋白对PCV2生物学功能的影响 | 第54-55页 |
·病毒增殖能力检测 | 第54页 |
·病毒的一步法生长曲线 | 第54-55页 |
·PCV2 ORF6对细胞的凋亡影响 | 第55-56页 |
·PCV2 ORF6对细胞因子的影响检测 | 第56-58页 |
·PCV2 ORF6激活IL-10的信号通路分析 | 第58-60页 |
5 讨论与结论 | 第60-63页 |
·讨论 | 第60-62页 |
·PCV2 ORF6蛋白鉴定与表达定位 | 第60页 |
·PCV2 ORF6对病毒复制增殖的影响 | 第60-61页 |
·PCV2 ORF6的生物学功能 | 第61-62页 |
·PCV2 ORF6对IL-10的的影响 | 第62页 |
·结论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-72页 |
发表文章 | 第72-73页 |
致谢 | 第73页 |