| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 英文缩略表 | 第12-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-19页 |
| ·牛支原体（Mycoplasma bovis）简介 | 第13页 |
| ·牛支原体的流行病学 | 第13-14页 |
| ·牛支原体的临床症状和病理变化 | 第14页 |
| ·牛支原体的鉴别诊断 | 第14-15页 |
| ·M.bovis的分离培养 | 第14-15页 |
| ·M.bovis的血清学诊断 | 第15页 |
| ·M.bovis的分子生物学诊断 | 第15页 |
| ·牛支原体相关疾病的防治 | 第15-16页 |
| ·牛支原体脂质相关膜蛋白(lipid-associated membrane proteins,LAMPs)诱导宿主免疫应答的研究 | 第16-18页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 第二章 关键信号分子的扩增及其重组质粒的构建 | 第19-27页 |
| ·材料 | 第19页 |
| ·菌株、质粒、细胞及实验动物 | 第19页 |
| ·主要试剂 | 第19页 |
| ·主要设备仪器 | 第19页 |
| ·方法 | 第19-23页 |
| ·引物的设计与合成 | 第19-20页 |
| ·EBL细胞的培养及cDNA的制备 | 第20-21页 |
| ·目的基因的扩增 | 第21页 |
| ·重组质粒的构建与鉴定 | 第21页 |
| ·重组质粒pET-30a-p65（N端 666bp）的转化及诱导表达 | 第21-22页 |
| ·重组p65（N端 666bp）可溶性判断 | 第22页 |
| ·重组p65（N端 666bp）的纯化 | 第22页 |
| ·抗p65（N端 666bp）蛋白小鼠阳性血清的制备 | 第22页 |
| ·小鼠抗p65（N端 666bp）蛋白阳性血清的Western Blotting验证 | 第22-23页 |
| ·结果 | 第23-26页 |
| ·目的基因的扩增结果 | 第23页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定结果 | 第23-24页 |
| ·重组质粒的双酶切鉴定结果 | 第24页 |
| ·序列测定结果 | 第24页 |
| ·重组p65（N端 666bp）的诱导及可溶性判定 | 第24-25页 |
| ·重组p65（N端 666bp）的纯化结果 | 第25页 |
| ·小鼠抗p65（N端 666bp）蛋白的阳性血清的Western Blotting检测 | 第25-26页 |
| ·小结 | 第26-27页 |
| 第三章 牛支原体的LAMPs诱导EBL细胞IL-1β 释放的分子机制研究 | 第27-36页 |
| ·材料 | 第27-28页 |
| ·菌株、细胞和质粒 | 第27页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·主要设备 | 第27-28页 |
| ·方法 | 第28-30页 |
| ·M.bovis的培养及其LAMPs的提取 | 第28页 |
| ·SYBR Green I实时定量PCR及质粒转染 | 第28页 |
| ·SYBR Green I Real-time PCR检测M.bovis刺激EBL细胞IL-1β 表达情况 | 第28-29页 |
| ·SYBR Green I Real-time PCR检测LAMPs刺激EBL细胞IL-1β 释放的最佳时间和最佳剂量 | 第29页 |
| ·ELISA方法检测LAMPs诱导EBL细胞IL-1β 的释放量 | 第29页 |
| ·激光共聚焦显微镜检测LAMPs诱导EBL细胞p65转核 | 第29页 |
| ·Western Blotting检测LAMPs诱导EBL细胞p65转核 | 第29-30页 |
| ·SYBR Green I Real-time PCR检测NF-κB活性被抑制后LAMPs刺激EBL细胞IL-1β 表达情况 | 第30页 |
| ·SYBR Green I Real-time PCR检测TLR2对LAMPs刺激的EBL细胞IL-1β 表达水平的影响 | 第30页 |
| ·结果 | 第30-34页 |
| ·SYBR Green I Real-time PCR检测M.bovis刺激EBL细胞IL-1β 表达情况 | 第30-31页 |
| ·SYBR Green I Real-time PCR检测LAMPs刺激EBL细胞IL-1β 表达的最佳时间和最佳剂量 | 第31页 |
| ·ELISA方法检测LAMPs诱导EBL细胞IL-1β 的释放量 | 第31-32页 |
| ·激光共聚焦显微镜检测LAMPs诱导EBL细胞p65转核 | 第32-33页 |
| ·Western Blotting证明LAMPs能够诱导EBL细胞p65转核 | 第33页 |
| ·SYBR Green I Real-time PCR证明NF-κB活性被抑制后LAMPs刺激EBL细胞IL-1β 表达下调 | 第33-34页 |
| ·SYBR Green I Real-time PCR检测TLR2对LAMPs刺激的EBL细胞IL-1β 表达水平的影响 | 第34页 |
| ·小结 | 第34页 |
| ·讨论 | 第34-36页 |
| 第四章 结论 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 作者简介 | 第44页 |
