| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第1章 引言 | 第14-18页 |
| ·柯萨奇病毒B组3型（Coxsackievirus group B type 3,CVB3） | 第14-15页 |
| ·3A蛋白 | 第15-16页 |
| ·酵母双杂交系统（Yeast two-hybrid system） | 第16-17页 |
| ·本论文研究基础和研究意义 | 第17-18页 |
| 第2章 材料与方法 | 第18-33页 |
| ·实验材料 | 第18-22页 |
| ·菌株 | 第18页 |
| ·质粒 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18-19页 |
| ·主要设备 | 第19-20页 |
| ·各类培养基 | 第20-21页 |
| ·Western-Blot所用试剂 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-33页 |
| ·p GBKT7-3A重组质粒的构建（图 2.1） | 第22-24页 |
| ·重组质粒p GBKT7-3A在酵母菌AH109中的表达 | 第24-26页 |
| ·3A对报告基因的转录自激活检测 | 第26页 |
| ·检测 3A的表达对酵母菌配合的影响 | 第26-27页 |
| ·筛选与 3A相互作用的蛋白 | 第27-28页 |
| ·阳性候选克隆的初步分析 | 第28-29页 |
| ·质粒DNA瞬时转染 | 第29页 |
| ·免疫荧光双标 | 第29-30页 |
| ·细胞内免疫共沉淀 | 第30-31页 |
| ·CCK-8 检测 3A对Hela细胞的活性影响 | 第31页 |
| ·Annexin V检测 3A对细胞凋亡的影响 | 第31页 |
| ·流式细胞仪检测 3A对细胞周期的影响 | 第31页 |
| ·病毒感染Hela细胞 | 第31-33页 |
| 第3章 结果 | 第33-46页 |
| ·CVB33A是一个适合用于酵母双杂交系统的诱饵蛋白 | 第33-36页 |
| ·重组质粒p GBKT7-3A的酶切鉴定 | 第33页 |
| ·重组质粒p GBKT7-3A的基因测序 | 第33-34页 |
| ·酵母菌AH109[p GBKT7-3A]的表型验证 | 第34页 |
| ·融合蛋白DNA-BD-c-Myc-3A表达的检测 | 第34页 |
| ·3A对报告基因无转录自激活作用 | 第34-35页 |
| ·3A对酵母配合功能的影响 | 第35-36页 |
| ·经大规模配合实验筛选得到6个相互作用的人心脏蛋白 | 第36-39页 |
| ·人心脏c DNA文库滴定 | 第36页 |
| ·大规模酵母配合实验的配合效率 | 第36页 |
| ·阳性候选克隆的初步分析 | 第36-39页 |
| ·3A与TMED4相互作用的进一步验证 | 第39-40页 |
| ·高内涵细胞成像分析系统观察 3A与TMED4存在细胞共定位 | 第39页 |
| ·细胞内免疫共沉淀检测 3A与TMED4的相互作用 | 第39-40页 |
| ·3A与TMED4的相互作用对细胞的影响 | 第40-46页 |
| ·CCK-8 检测 3A对He La细胞的活性影响 | 第40-41页 |
| ·Annexin V检测 3A对细胞凋亡的影响 | 第41页 |
| ·流式细胞仪检测 3A对细胞周期的影响 | 第41-43页 |
| ·3A对细胞中TMED4表达量的影响 | 第43-46页 |
| 第4章 讨论 | 第46-53页 |
| ·与 3A相互作用的6个人细胞蛋白 | 第46-47页 |
| ·TMED4 | 第47-48页 |
| ·CVB33A与TMED4相互作用的进一步确证 | 第48-49页 |
| ·细胞凋亡 | 第49-50页 |
| ·3A与细胞凋亡的关系 | 第50-53页 |
| 第5章 结论与展望 | 第53-54页 |
| ·结论 | 第53页 |
| ·展望 | 第53-54页 |
| 第6章 创新性 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第62-63页 |
| 综述 | 第63-70页 |
| 参考文献 | 第68-70页 |
