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基于微囊藻毒素处理后鲢鱼肝脏差减文库的构建和分析以及部分基因的克隆

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
第一章 引言第12-27页
 1 微囊藻毒素的产生、结构、毒性与危害第12-15页
   ·水体富营养化的形成及影响第12页
   ·微囊藻毒素的产生第12-13页
   ·微囊藻毒素的结构第13-14页
   ·微囊藻毒素的污染现状第14-15页
 2 微囊藻毒素对鱼类的毒理学效应第15-18页
   ·微囊藻毒素的致毒机制第15-16页
   ·微囊藻毒素对鱼类的致毒效应第16-18页
 3 淡水鱼类对微囊藻毒素的去除作用研究第18-20页
   ·鱼类对微囊藻毒素的生物净化第18页
   ·微囊藻毒素去毒机理及相关基因第18-20页
 4 抑制差减杂交技术(SSH)及其应用第20-24页
   ·SSH 的基本原理与技术流程第20-23页
   ·SSH 方法的优缺点第23页
   ·SSH 在鱼类基因克隆中的应用进展第23-24页
 5 cDNA 末端快速扩增(RACE)技术第24-26页
   ·RACE 的原理及方法第24-25页
   ·RACE 的优点和缺点第25-26页
   ·RACE 的应用进展第26页
 6 本研究的目的及意义第26-27页
第二章 鲢鱼肝脏MC-LR 暴露及不同时间GST 表达分析第27-32页
 1. 材料与方法第27-30页
   ·实验材料第27-28页
   ·实验方法第28-30页
 2. 结果第30-31页
 3. 讨论第31-32页
第三章 微囊藻毒素诱导的鲢鱼肝脏SSH 文库的构建及分析第32-53页
 1 材料与方法第32-44页
   ·实验材料第32-33页
   ·实验方法第33-44页
 2. 结果第44-50页
   ·cDNA 的合成和Rsa I 酶切第44页
   ·差减效率的验证第44-45页
   ·抑制差减文库的建立及分析第45-46页
   ·EST 测序及分析第46-50页
 3 讨论第50-53页
   ·高质量RNA 是构建高质量文库的基础第50页
   ·SSH 文库的质量检测第50-51页
   ·鲢鱼肝脏参与去除微囊藻毒素的相关基因第51-53页
第四章 鲢鱼肝脏差异表达基因的半定量表达分析第53-60页
 1 材料与方法第53-56页
   ·实验材料第53-54页
   ·实验方法第54-56页
 2 结果第56-57页
   ·正向文库F529、F559 和F570 在肝脏组织各时间点的表达第56-57页
   ·反向文库R52、R515 和R5161 在肝脏组织各时间点的表达第57页
 3 讨论第57-60页
第五章 鲢鱼PEPCK 和PDIA3 基因的克隆及其生物信息学分析第60-81页
 1 材料与方法第60-66页
   ·实验材料第60-61页
   ·实验方法第61-66页
 2 结果第66-78页
   ·鲢鱼PEPCK 基因RACE 扩增结果第66-74页
   ·鲢鱼 PDIA3 基因 RACE 扩增结果第74-78页
 3 讨论第78-81页
小结第81-83页
参考文献第83-94页
附录第94-95页
致谢第95页

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