摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-12页 |
第一章 引言 | 第12-27页 |
1 微囊藻毒素的产生、结构、毒性与危害 | 第12-15页 |
·水体富营养化的形成及影响 | 第12页 |
·微囊藻毒素的产生 | 第12-13页 |
·微囊藻毒素的结构 | 第13-14页 |
·微囊藻毒素的污染现状 | 第14-15页 |
2 微囊藻毒素对鱼类的毒理学效应 | 第15-18页 |
·微囊藻毒素的致毒机制 | 第15-16页 |
·微囊藻毒素对鱼类的致毒效应 | 第16-18页 |
3 淡水鱼类对微囊藻毒素的去除作用研究 | 第18-20页 |
·鱼类对微囊藻毒素的生物净化 | 第18页 |
·微囊藻毒素去毒机理及相关基因 | 第18-20页 |
4 抑制差减杂交技术(SSH)及其应用 | 第20-24页 |
·SSH 的基本原理与技术流程 | 第20-23页 |
·SSH 方法的优缺点 | 第23页 |
·SSH 在鱼类基因克隆中的应用进展 | 第23-24页 |
5 cDNA 末端快速扩增(RACE)技术 | 第24-26页 |
·RACE 的原理及方法 | 第24-25页 |
·RACE 的优点和缺点 | 第25-26页 |
·RACE 的应用进展 | 第26页 |
6 本研究的目的及意义 | 第26-27页 |
第二章 鲢鱼肝脏MC-LR 暴露及不同时间GST 表达分析 | 第27-32页 |
1. 材料与方法 | 第27-30页 |
·实验材料 | 第27-28页 |
·实验方法 | 第28-30页 |
2. 结果 | 第30-31页 |
3. 讨论 | 第31-32页 |
第三章 微囊藻毒素诱导的鲢鱼肝脏SSH 文库的构建及分析 | 第32-53页 |
1 材料与方法 | 第32-44页 |
·实验材料 | 第32-33页 |
·实验方法 | 第33-44页 |
2. 结果 | 第44-50页 |
·cDNA 的合成和Rsa I 酶切 | 第44页 |
·差减效率的验证 | 第44-45页 |
·抑制差减文库的建立及分析 | 第45-46页 |
·EST 测序及分析 | 第46-50页 |
3 讨论 | 第50-53页 |
·高质量RNA 是构建高质量文库的基础 | 第50页 |
·SSH 文库的质量检测 | 第50-51页 |
·鲢鱼肝脏参与去除微囊藻毒素的相关基因 | 第51-53页 |
第四章 鲢鱼肝脏差异表达基因的半定量表达分析 | 第53-60页 |
1 材料与方法 | 第53-56页 |
·实验材料 | 第53-54页 |
·实验方法 | 第54-56页 |
2 结果 | 第56-57页 |
·正向文库F529、F559 和F570 在肝脏组织各时间点的表达 | 第56-57页 |
·反向文库R52、R515 和R5161 在肝脏组织各时间点的表达 | 第57页 |
3 讨论 | 第57-60页 |
第五章 鲢鱼PEPCK 和PDIA3 基因的克隆及其生物信息学分析 | 第60-81页 |
1 材料与方法 | 第60-66页 |
·实验材料 | 第60-61页 |
·实验方法 | 第61-66页 |
2 结果 | 第66-78页 |
·鲢鱼PEPCK 基因RACE 扩增结果 | 第66-74页 |
·鲢鱼 PDIA3 基因 RACE 扩增结果 | 第74-78页 |
3 讨论 | 第78-81页 |
小结 | 第81-83页 |
参考文献 | 第83-94页 |
附录 | 第94-95页 |
致谢 | 第95页 |