| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-20页 |
| ·金黄色葡萄球菌表面蛋白 | 第8-14页 |
| ·金黄色葡萄球菌蛋白A | 第9-12页 |
| ·纤连蛋白结合蛋白(FnBP) | 第12-13页 |
| ·胶原蛋白结合蛋白(Cna) | 第13-14页 |
| ·凝聚因子(ClfA) | 第14页 |
| ·金黄色葡萄球菌的致病性 | 第14-16页 |
| ·金黄色葡萄球菌肠毒素(SE)的生物学性状 | 第14-15页 |
| ·金黄色葡萄球菌肠毒素(SE)的致病性 | 第15-16页 |
| ·金黄色葡萄球菌的检测 | 第16-17页 |
| ·纸片法检测金黄色葡萄球菌 | 第16页 |
| ·金黄色葡萄球菌的鉴别培养基法 | 第16-17页 |
| ·金黄色葡萄球菌的免疫学检测方法 | 第17页 |
| ·分子生物学方法检测金黄色葡萄球菌 | 第17页 |
| ·胶体金技术在细菌检测中的应用 | 第17-18页 |
| ·分子克隆技术 | 第18页 |
| ·立题背景 | 第18-20页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第20-42页 |
| ·实验材料 | 第20-25页 |
| ·菌种与载体 | 第20页 |
| ·试验用仪器 | 第20-21页 |
| ·主要实验药品 | 第21页 |
| ·主要试剂配制 | 第21-25页 |
| ·实验方法 | 第25-42页 |
| ·金黄色葡萄球菌鉴定 | 第25页 |
| ·金黄色葡萄球菌DNA提取 | 第25页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第25-26页 |
| ·引物设计与合成 | 第26页 |
| ·目的基因获得 | 第26-27页 |
| ·测序 | 第27-31页 |
| ·pET-28a(+)-SPA重组质粒的构建及克隆培养 | 第31-34页 |
| ·原核表达重组蛋白 | 第34-38页 |
| ·重组蛋白抗原活性分析 | 第38-42页 |
| 第三章 实验结果与讨论 | 第42-57页 |
| ·试验菌株的鉴定 | 第42页 |
| ·SPA片断克隆及测序 | 第42-46页 |
| ·SPA基因片断的获得 | 第42页 |
| ·目的基因的回收 | 第42-46页 |
| ·目的基因的原核表达 | 第46-50页 |
| ·目的基因酶切回收 | 第46-47页 |
| ·目的基因的连接转化 | 第47-49页 |
| ·阳性重组质粒pET-28a(+)-SPA酶切鉴定 | 第49-50页 |
| ·重组蛋白的原核表达及纯化 | 第50-54页 |
| ·不同诱导剂浓度的选择 | 第50-51页 |
| ·不同诱导时间的选择 | 第51页 |
| ·最佳诱导温度的选择 | 第51-52页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第52-54页 |
| ·目的蛋白的复性 | 第54页 |
| ·SPA蛋白的活性分析 | 第54-57页 |
| ·重组蛋白的免疫印迹鉴定 | 第55页 |
| ·酶联免疫吸附试验 | 第55-57页 |
| 第四章 实验结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-61页 |
| 致谢 | 第61页 |