| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-23页 |
| ·前言 | 第10页 |
| ·木质素的组成 | 第10-11页 |
| ·木质素的生物合成途径 | 第11-17页 |
| ·苯丙烷(Phenypropaniod)代谢途径 | 第11-16页 |
| ·苯丙氨酸氨解酶 | 第13页 |
| ·肉桂酸-4-羟基化酶 | 第13页 |
| ·4-羟基肉桂酰CoA连接酶 | 第13-14页 |
| ·对-香豆酸3-羟化酶 | 第14-15页 |
| ·咖啡酰CoA-O-甲基转移酶 | 第15页 |
| ·阿魏酸5-脱氢酶 | 第15-16页 |
| ·双重咖啡酸/5-羟基阿魏酸O-甲基转移酶 | 第16页 |
| ·木质素生物合成的特异途径 | 第16-17页 |
| ·肉桂酰CoA还原酶 | 第16页 |
| ·肉桂醇脱氢酶和芥子醇脱氢酶 | 第16-17页 |
| ·木质素基因工程现状 | 第17-19页 |
| ·苯丙烷途径的上游调控 | 第17-18页 |
| ·木质素组成的调控 | 第18页 |
| ·木质素特异合成途径的调控 | 第18-19页 |
| ·木质素在工农业生产中的应用 | 第19-20页 |
| ·木质素基因工程对制浆造纸的影响 | 第19页 |
| ·木质素基因工程在提高饲料消化率方面的应用 | 第19页 |
| ·木质素基因工程在农业及植物抗病方面的应用 | 第19-20页 |
| ·木质素合成酶HCT的研究进展 | 第20-21页 |
| ·本课题的目的及研究意义 | 第21-22页 |
| ·实验方案 | 第22-23页 |
| 第二章 107杨基因组DNA的提取及hct基因扩增引物的筛选 | 第23-30页 |
| ·材料和试剂 | 第23-24页 |
| ·材料 | 第23页 |
| ·试剂 | 第23页 |
| ·试剂的配制 | 第23-24页 |
| ·主要仪器 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-27页 |
| ·107杨树基因组DNA的提取 | 第24-25页 |
| ·1%琼脂糖凝胶的制作 | 第25页 |
| ·1%琼脂糖凝胶电泳 | 第25页 |
| ·特异引物的设计 | 第25-26页 |
| ·杨树DNA的PCR扩增 | 第26-27页 |
| ·结果与分析 | 第27-28页 |
| ·讨论 | 第28-30页 |
| 第三章 107杨次生木质部hct基因的RT-PCR扩增及鉴定 | 第30-37页 |
| ·材料和试剂 | 第30-31页 |
| ·实验材料 | 第30页 |
| ·主要试剂及试剂盒 | 第30页 |
| ·主要仪器 | 第30-31页 |
| ·实验方法与步骤 | 第31-34页 |
| ·欧美杨107次生木质部总RNA的提取 | 第31页 |
| ·实验材料的处理 | 第31页 |
| ·实验方法 | 第31页 |
| ·目的基因的RT-PCR扩增 | 第31-33页 |
| ·反转录cDNA第一条链 | 第31-32页 |
| ·PCR反应 | 第32-33页 |
| ·目的片段的回收 | 第33页 |
| ·1%琼脂糖凝胶电泳检测回收效果 | 第33-34页 |
| ·结果与分析 | 第34-36页 |
| ·总RNA的提取结果 | 第34页 |
| ·目的片段的RT-PCR扩增结果 | 第34页 |
| ·目的片段的回收结果 | 第34-36页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| 第四章 重组质粒的转化与鉴定 | 第37-49页 |
| ·材料 | 第37-38页 |
| ·菌种与载体 | 第37页 |
| ·酶及化学试剂 | 第37页 |
| ·试剂盒 | 第37页 |
| ·主要仪器 | 第37-38页 |
| ·实验方法 | 第38-44页 |
| ·培养基的制备 | 第38-40页 |
| ·LB液体培养基的制备 | 第38页 |
| ·LB固体培养基的制备 | 第38页 |
| ·LB/Amp平板培养基 | 第38-39页 |
| ·转化用LB/Amp/X-gal/IPTG平板培养基 | 第39页 |
| ·SOB液体培养基的制备 | 第39页 |
| ·SOC液体培养基的配制 | 第39-40页 |
| ·目的片段与pMD20-T载体的连接 | 第40页 |
| ·大肠杆菌JM109感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第40-41页 |
| ·重组质粒的转化 | 第41页 |
| ·重组质粒的菌落PCR鉴定 | 第41-42页 |
| ·重组质粒的提取 | 第42-43页 |
| ·重组质粒的扩增鉴定 | 第43页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第43-44页 |
| ·重组质粒的测序鉴定分析 | 第44页 |
| ·结果与分析 | 第44-47页 |
| ·菌落PCR筛选 | 第44-45页 |
| ·质粒提取检测结果 | 第45页 |
| ·重组质粒的扩增鉴定 | 第45页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第45-47页 |
| ·重组质粒的测序 | 第47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| 第五章 HCT的生物信息学分析 | 第49-63页 |
| ·前言 | 第49页 |
| ·实验方法 | 第49页 |
| ·序列分析及蛋白质结构预测 | 第49-62页 |
| ·DNA序列分析 | 第49-51页 |
| ·氨基酸序列分析 | 第51-54页 |
| ·遗传进化分析 | 第54页 |
| ·蛋白质性质的预测 | 第54-57页 |
| ·二级结构的预测 | 第57-59页 |
| ·信号肽的预测 | 第59-60页 |
| ·跨膜结构域的预测 | 第60-61页 |
| ·三级结构预测 | 第61-62页 |
| ·结论 | 第62-63页 |
| ·序列分析 | 第62页 |
| ·蛋白质结构预测 | 第62-63页 |
| 第六章 结果与展望 | 第63-65页 |
| ·实验结果 | 第63页 |
| ·问题与展望 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
