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生物法合成D-1,2,4-丁三醇关键基因的克隆及重组菌的构建

摘要第1-4页
Abstract第4-7页
第一章 绪论第7-17页
   ·D-1,2,4-丁三醇概括第7-14页
     ·D-1,2,4-丁三醇的性质及应用第7-8页
     ·丁三醇的化学法合成第8-12页
     ·化学与酶学结合生产 1,2,4-丁三醇第12-13页
     ·生物法合成 1,2,4-丁三醇第13-14页
   ·研究意义及主要研究内容第14-17页
     ·研究意义第14-15页
     ·研究内容第15-17页
第二章 材料与方法第17-25页
   ·材料第17-18页
     ·菌株与质粒第17页
     ·工具酶第17页
     ·主要试剂及药品第17页
     ·培养基第17-18页
     ·主要实验仪器第18页
   ·方法第18-25页
     ·菌株的筛选第18-19页
     ·菌株的保藏第19页
     ·菌株的生理生化试验第19页
     ·菌株的 16s rDNA 鉴定第19页
     ·菌株染色体 DNA 的提取第19-20页
     ·不同基因片段的扩增第20-21页
     ·PCR 产物胶回收及 T 载体连接第21页
     ·大肠杆菌质粒 DNA 的提取第21页
     ·大肠杆菌热激转化用感受态细胞的制作及转化步骤第21-22页
     ·质粒的构建第22页
     ·木糖脱氢酶和苯甲酰甲酸脱羧酶基因的重组表达第22-23页
     ·木糖脱氢酶酶活的测定第23页
     ·产物的处理分析与检测第23-25页
第三章 结果与讨论第25-43页
   ·丁三醇生物合成途径关键基因的克隆及分析第25-30页
     ·木糖脱氢酶菌株的筛选及鉴定第25-26页
     ·苯甲酰甲酸脱羧酶菌株的筛选及鉴定第26-28页
     ·D-木糖脱氢酶基因和苯甲酰甲酸脱羧酶基因的克隆及分析第28-30页
   ·D-1,2,4-丁三醇生物法合成途径的设计第30-37页
     ·重组质粒 pEtac-xylB 和 pEtac-mdlC 的构建第31-32页
     ·外源基因在 E. coli W3110 中的表达第32-33页
     ·D-1,2,4-丁三醇生物法合成途径的确立第33-37页
   ·一步法生物合成 D-1,2,4-丁三醇重组菌的构建第37-43页
     ·重组质粒 pEtac-mdlC-tac-xylB 的构建及表达第37-38页
     ·一步法发酵生产 D-1,2,4-丁三醇第38-39页
     ·重组菌 E. coli W3110(pEtac-mdlC-tac-xylB)合成 D-1,2,4-丁三醇发酵条件的初步优化第39-43页
主要结论与展望第43-45页
 主要结论第43页
 展望第43-45页
致谢第45-47页
参考文献第47-51页
附录 作者在攻读硕士学位期间发表的论文第51页

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