目录 | 第1-9页 |
摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-14页 |
缩略词表(Abbreviaitons) | 第14-16页 |
第一章 文献综述及课题思路 | 第16-45页 |
1 课题的提出 | 第16-17页 |
2 植物成花发育研究进展 | 第17-35页 |
·植物成花诱导 | 第18-31页 |
·春化途径 | 第20-22页 |
·光周期途径 | 第22-25页 |
·自主途径 | 第25-27页 |
·赤霉素途径 | 第27-29页 |
·开花途径的整合 | 第29-31页 |
·植物花的发端 | 第31-33页 |
·茎端分生组织特征基因 | 第31-32页 |
·花分生组织特征基因 | 第32-33页 |
·花器官的发育 | 第33-35页 |
·植物花发育的ABC模型 | 第33-34页 |
·ABCD及ABCDE模型 | 第34-35页 |
·花发育的四重奏模型 | 第35页 |
3 MADS-box家族基因研究 | 第35-39页 |
·MADS-box的由来 | 第35-36页 |
·MADS-box基因的类型及结构 | 第36-37页 |
·植物MADS-box基因功能的多样性 | 第37-39页 |
·MADS-box基因对成花发育的调控 | 第37-38页 |
·MADS-box基因对营养生长的调控 | 第38页 |
·MADS-box基因对果实及胚珠发育的调控 | 第38-39页 |
4 高等植物启动子研究概述 | 第39-43页 |
·启动子的概念及结构特征 | 第39-40页 |
·植物启动子的类型及应用 | 第40-43页 |
·组成型启动子 | 第40-41页 |
·诱导型启动子 | 第41页 |
·组织特异型启动子 | 第41-43页 |
5 本研究的内容、目的和意义 | 第43-45页 |
第二章 早实枳PtFLC基因不同转录本作用机制研究 | 第45-69页 |
1 引言 | 第45-47页 |
2 材料与方法 | 第47-57页 |
·实验材料 | 第47-48页 |
·植物材料 | 第47页 |
·菌种和质粒 | 第47页 |
·试剂和仪器 | 第47-48页 |
·实验方法 | 第48-57页 |
·植物总RNA的提取及纯化 | 第48页 |
·第一链cDNA的合成 | 第48-49页 |
·PtFLC各转录本序列分离 | 第49-50页 |
·PtFLC启动子的克隆 | 第50-51页 |
·PtFLC启动子的序列分析 | 第51页 |
·相关载体构建 | 第51-52页 |
·转录活性分析 | 第52页 |
·根癌农杆菌介导的拟南芥遗传转化 | 第52-54页 |
·酵母单、双杂交文库构建及筛选 | 第54-55页 |
·PtFLC启动子GUS活性分析 | 第55-57页 |
3 结果与分析 | 第57-66页 |
·PtFLC各转录本序列结构分析 | 第57-58页 |
·各转录本转录活性分析 | 第58-59页 |
·PtFLC各转录本在拟南芥中的异位表达 | 第59-61页 |
·PtFLC互作蛋白筛选 | 第61-62页 |
·PtFLC启动子序列顺式元件预测 | 第62-63页 |
·PtFLC上游调节因子筛选 | 第63-64页 |
·PtFLC启动子时空表达分析 | 第64-66页 |
4 讨论 | 第66-69页 |
第三章 早实枳AP1同源基因的分离、表达及功能分析 | 第69-86页 |
1 引言 | 第69-70页 |
2 材料与方法 | 第70-73页 |
·实验材料 | 第70页 |
·植物材料 | 第70页 |
·菌种和质粒 | 第70页 |
·实验方法 | 第70-73页 |
·PtAP1基因的扩增 | 第70页 |
·相关基因表达分析 | 第70-71页 |
·PtAP1启动子的分离及序列分析 | 第71页 |
·表达载体及报告载体的构建 | 第71-72页 |
·PtAP1的亚细胞定位 | 第72页 |
·根癌农杆菌介导的拟南芥遗传转化 | 第72页 |
·启动子的GUS活性分析 | 第72页 |
·酵母单杂交文库的筛选及互作验证 | 第72-73页 |
3 结果与分析 | 第73-83页 |
·PtAP1氨基酸序列比对与进化分析 | 第73-75页 |
·早实枳内源PtAP1基因表达分析 | 第75-76页 |
·赤霉素和脱落酸处理对PtAP1表达的影响 | 第76-77页 |
·PtAP1蛋白亚细胞定位 | 第77页 |
·PtAP1基因在转基因拟南芥中的表型分析 | 第77-80页 |
·PtAP1启动子的克隆及元件预测 | 第80-81页 |
·PtAP1启动子的时空表达模式分析 | 第81-83页 |
·PtAP1上游调控因子的鉴定 | 第83页 |
4 讨论 | 第83-86页 |
第四章 柑橘AGL24同源基因的克隆及功能鉴定 | 第86-106页 |
1 引言 | 第86-87页 |
2 材料与方法 | 第87-90页 |
·实验材料 | 第87页 |
·植物材料 | 第87页 |
·菌种和质粒 | 第87页 |
·实验方法 | 第87-90页 |
·总RNA的提取及PtAGL24基因cDNA的分离 | 第87-88页 |
·PtAGL24基因转录水平分析 | 第88页 |
·PtAGL24启动子的克隆及生物信息学分析 | 第88页 |
·表达载体构建 | 第88-89页 |
·PtAGL24亚细胞定位 | 第89页 |
·拟南芥的转化及转基因植株的分子鉴定 | 第89页 |
·扫描电镜分析 | 第89页 |
·酵母双杂交分析 | 第89-90页 |
·启动子组织化学染色及定量检测 | 第90页 |
3 结果与分析 | 第90-103页 |
·早实枳PtAGL24 MADS-box基因的分离及序列分析 | 第90-93页 |
·PtAGL24在早实枳发育过程中的表达 | 第93-94页 |
·PtAGL24蛋白的亚细胞定位分析 | 第94页 |
·蛋白互作分析 | 第94-95页 |
·异位表达PtAGL24引起转基因拟南芥的早花及形态改变 | 第95-98页 |
·PtAGL24与拟南芥异源MADS蛋白的互作 | 第98-99页 |
·PtAGL24启动子的分离及结构分析 | 第99-101页 |
·PtAGL24启动子在转基因拟南芥中的时空表达模式 | 第101-103页 |
4 讨论 | 第103-106页 |
第五章 早实枳与普通枳中miRNA的比较分析 | 第106-119页 |
1 引言 | 第106-107页 |
2 材料与方法 | 第107-108页 |
·实验材料 | 第107页 |
·实验方法 | 第107-108页 |
·总RNA的提取 | 第107页 |
·小RNA文库的构建及测序 | 第107页 |
·保守的及新颖的miRNAs的发掘 | 第107-108页 |
·miRNA潜在靶基因的预测及功能注释 | 第108页 |
·茎环定量RT-PCR扩增 | 第108页 |
·靶基因的区域定量RT-PCR检测 | 第108页 |
3 结果与分析 | 第108-117页 |
·小RNA文库的Solexa测序及筛选 | 第108-111页 |
·保守的和新颖的候选miRNAs的鉴定 | 第111-112页 |
·保守的和新颖的miRNA的表达模式 | 第112页 |
·候选miRNA的表达分析 | 第112页 |
·miRNA靶基因的预测及功能注释 | 第112-115页 |
·miRNA所靶定mRNA的区域表达检测 | 第115-117页 |
4 讨论 | 第117-119页 |
第六章 全文小结与展望 | 第119-122页 |
1 小结与推论 | 第119-120页 |
2 主要创新点 | 第120-121页 |
3 研究展望 | 第121-122页 |
参考文献 | 第122-139页 |
附录(Appendix) | 第139-159页 |
附录Ⅰ 部分实验操作 | 第139-142页 |
附录Ⅱ 附表 | 第142-158页 |
附录Ⅲ 发表和准备发表论文 | 第158-159页 |
致谢 | 第159页 |