目录 | 第1-9页 |
摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-14页 |
缩略词(Abbreviation) | 第14-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-27页 |
前言 | 第15页 |
1 卵泡发育 | 第15-16页 |
2 卵泡发育的调控 | 第16-21页 |
·生殖激素对卵泡发育的调节 | 第17-19页 |
·促性腺激素释放激素 | 第17页 |
·促性腺激素 | 第17-18页 |
·类固醇激素 | 第18-19页 |
·细胞因子对卵泡发育的调节 | 第19-21页 |
·胰岛素样生长因子(IGF) | 第19-20页 |
·表皮生长因子(EGF) | 第20页 |
·转化生长因子(TGF)和肿瘤坏死因子(TNF) | 第20-21页 |
3 卵泡发育及排卵调控通路的研究 | 第21-24页 |
·MAPK-CEBPα/β信号通路在卵泡发育及排卵中的作用 | 第21-22页 |
·PKC信号通路在卵泡发育及排卵中的作用 | 第22页 |
·cAMP-PKA信号通路在卵泡发育及排卵中的作用 | 第22页 |
·钙离子信号通路在卵泡发育及排卵中的作用 | 第22-23页 |
·其他相关因子在卵泡发育及排卵中的作用 | 第23-24页 |
4 颗粒细胞凋亡 | 第24-26页 |
·细胞凋亡的概念 | 第24页 |
·细胞凋亡的生物学意义 | 第24页 |
·颗粒细胞凋亡的研究 | 第24页 |
·颗粒细胞与卵泡及卵母细胞发育 | 第24-26页 |
5 研究目的与意义 | 第26-27页 |
第二章 U0126和RU486对猪卵泡颗粒细胞的作用及其机制研究 | 第27-56页 |
1 引言 | 第27-28页 |
2 材料与方法 | 第28-33页 |
·材料 | 第28页 |
·实验材料 | 第28页 |
·主要试剂盒 | 第28页 |
·方法 | 第28-33页 |
·猪卵泡颗粒细胞的分离、培养和处理 | 第28-29页 |
·颗粒细胞总蛋白的提取 | 第29-30页 |
·颗粒细胞总RNA提取及检测 | 第30页 |
·RT-PCR合成第一链cDNA | 第30页 |
·颗粒细胞凋亡、周期、激素分泌相关基因的相对表达量分析 | 第30-31页 |
·Western blot分析 | 第31-32页 |
·U0126和RU486对猪颗粒细胞凋亡影响检测 | 第32页 |
·U0126和RU486对猪颗粒细胞周期的影响检测 | 第32-33页 |
·U0126和RU486对颗粒细胞中类固醇激素分泌量影响检测 | 第33页 |
·统计分析 | 第33页 |
3. 结果与分析 | 第33-46页 |
·LH/hCG对猪颗粒细胞中CEBPβ表达水平的影响 | 第33-34页 |
·U0126和RU486对猪颗粒细胞形态的影响 | 第34-35页 |
·U0126和RU486对CEBPβ及相关基因蛋白水平的影响 | 第35-36页 |
·FBS不影响U0126和RU486对猪颗粒细胞的作用 | 第36-37页 |
·U0126和RU486对p-p38MAPK蛋白表达的调控 | 第37-38页 |
·U0126和RU486显著改变猪颗粒细胞周期 | 第38-39页 |
·U0126和RU486显著影响猪颗粒细胞凋亡的变化 | 第39-40页 |
·U0126和RU486显著降低猪颗粒细胞中类固醇激素分泌 | 第40-42页 |
·猪颗粒细胞总RNA检测 | 第42页 |
·U0126和RU486对颗粒细胞CEBPβ mRNA水平的影响 | 第42-43页 |
·U0126和RU486对颗粒细胞中周期及凋亡相关基因mRNA水平的影响 | 第43-45页 |
·U0126和RU486对颗粒细胞中4个重要功能基因mRNA水平的影响 | 第45-46页 |
4 讨论分析 | 第46-54页 |
·LH和hCG显著促进颗粒细胞CEBPβ的表达 | 第46页 |
·U0126和RU486显著影响CEBPβ和p-ERK1/2蛋白的表达 | 第46-48页 |
·U0126显著降低猪颗粒细胞中CEBPβ蛋白的表达 | 第46-47页 |
·RU486显著降低猪颗粒细胞中CEBPβ和p-ERK1/2蛋白的表达 | 第47-48页 |
·FBS不影响U0126和RU486对猪颗粒细胞的作用 | 第48页 |
·U0126和RU486可能通过p-p38MAPK调控CEBPβ的表达 | 第48-49页 |
·U0126和RU486显著影响猪颗粒细胞的凋亡 | 第49-50页 |
·U0126抑制猪颗粒细胞的凋亡 | 第49页 |
·RU486促进猪颗粒细胞的凋亡 | 第49页 |
·猪颗粒细胞凋亡基因的相对表达变化 | 第49-50页 |
·U0126和RU486显著影响猪颗粒细胞周期的分布 | 第50-51页 |
·U0126显著改变猪颗粒细胞周期的分布 | 第50-51页 |
·RU486显著改变猪颗粒细胞周期的分布 | 第51页 |
·U0126和RU486显著影响猪颗粒细胞周期调控基因的相对表达量 | 第51页 |
·U0126和RU486显著降低猪颗粒细胞中类固醇激素水平 | 第51-52页 |
·U0126和RU486调控猪颗粒细胞中关键功能基因的表达 | 第52-53页 |
·U0126和RU486对猪颗粒细胞的的调控机制 | 第53-54页 |
5 小结 | 第54-56页 |
第三章 干扰CEBPβ对猪卵泡颗粒细胞的影响及其机制研究 | 第56-81页 |
1 引言 | 第56-57页 |
2 材料与方法 | 第57-64页 |
·材料 | 第57页 |
·实验材料 | 第57页 |
·干扰载体 | 第57页 |
·主要试剂盒 | 第57页 |
·方法 | 第57-63页 |
·猪卵泡颗粒细胞的分离和培养 | 第57-58页 |
·CEBPβ基因RNAi重组干扰质粒构建 | 第58-60页 |
·重组质粒克隆及纯化 | 第60页 |
·重组质粒转染猪颗粒细胞 | 第60-61页 |
·颗粒细胞总蛋白的提取 | 第61页 |
·颗粒细胞总RNA提取及检测 | 第61页 |
·RT-PCR合成第一链cDNA | 第61页 |
·颗粒细胞中基因的相对表达量检测 | 第61-62页 |
·Western blot分析 | 第62页 |
·颗粒细胞凋亡检测 | 第62-63页 |
·颗粒细胞周期检测 | 第63页 |
·颗粒细胞类固醇激素分泌量检测 | 第63页 |
·统计分析 | 第63-64页 |
3 结果与分析 | 第64-72页 |
·CEBPβ基因RNAi重组质粒 | 第64-65页 |
·重组质粒CEBPβ转染猪颗粒细胞 | 第65页 |
·猪颗粒细胞总RNA提取检测 | 第65-66页 |
·CEBPβRNAi重组质粒干扰效率mRNA水平检测 | 第66-67页 |
·CEBPβ RNAi后对CEBPβ及p-ERK1/2蛋白水平影响 | 第67-68页 |
·CEBPβ RNA干扰对激素分泌水平及调控的影响 | 第68-69页 |
·CEBPβ RNA干扰对猪颗粒细胞周期的影响 | 第69-70页 |
·CEBPβ RNA干扰对猪颗粒细胞凋亡的影响 | 第70页 |
·CEBPβ RNA干扰对颗粒细胞周期及凋亡相关基因表达的影响 | 第70-71页 |
·CEBPβ RNA对颗粒细胞中4个重要功能基因表达的影响 | 第71-72页 |
4 讨论分析 | 第72-79页 |
·CEBPβ基因RNAi效果显著 | 第72-73页 |
·CEBPβ干扰后增加p-ERK1/2的蛋白表达,降低ERK2蛋白表达 | 第73-74页 |
·CEBPβ对猪颗粒细胞凋亡的影响 | 第74-75页 |
·CEBPβ显著改变猪颗粒细胞周期的分布 | 第75-76页 |
·CEBPβ显著提高猪颗粒细胞类固醇激素水平 | 第76-77页 |
·CEBPβ显著影响猪颗粒细胞中关键功能基因的表达 | 第77-79页 |
·CEBPβ促进颗粒细胞凋亡的作用机制 | 第79页 |
5 小结 | 第79-81页 |
全文结论 | 第81-83页 |
创新与不足 | 第83-84页 |
参考文献 | 第84-102页 |
已发表论文 | 第102-103页 |
致谢 | 第103页 |